Női termékenység, környezeti tényezők és stressz-oxidánsok (FERTENOX)
FERTilité féminine, Agents ENvironnementaux et Stress OXydant
Az ipari, gyógyszerészeti, mezőgazdasági és mezőgazdasági területeken használt szintetikus termékek megtalálhatók környezetünkben. Így az emberek egyidejűleg több ilyen szennyező hatásnak is ki lehetnek téve. Ezen túlmenően ezek a környezeti ágensek káros hatást fejtenek ki vagy fejthetnek ki a termékenységre azáltal, hogy megváltoztatják az ivarsejtek és az embriók minőségét az endokrin zavaró hatások vagy az ivarmirigyek oxidatív stresszének fokozása révén (amelyről ismert, hogy számos emberi reprodukciós patológiában részt vesznek).
Ebben az összefüggésben a jelen projekt célja leíró és elemző adatok beszerzése a nők és a petesejtek számos környezeti ágensnek (biszfenolok, etinil-ösztradiol és glifozát) való kitettségéről. Vizsgálni fogjuk a follikuláris folyadékban és a vizeletben mért szennyezőanyag-mérések (a franciaországi Tours-i Egyetemi Kórházban in vitro megtermékenyítési (IVF) protokollon átesett nők) és a petesejtek minősége, az IVF és a terhesség sikere közötti összefüggést. Több oxidatív stressz biomarkert is mérnek a vérben és a tüszőfolyadékban ezeknél a nőknél, akik kitöltenek egy kérdőívet az életmódjukról. Végül, az in vitro megközelítéseknek köszönhetően ezeknek a szennyező anyagoknak a hatásait és hatásmechanizmusait (beleértve az oxidatív stresszt is) (önmagában vagy koktélokban) vizsgálják majd ezekből a betegekből származó granulosa sejteken.
A tanulmány áttekintése
Állapot
Körülmények
Beavatkozás / kezelés
Részletes leírás
Miután a Fertenox projektről a Fecondation In Vitro protokollt ismertető megbeszélésen értesültek, minden nőbeteg, aki nem ellenzi a vizsgálatban való részvételt és az egyéni információk felhasználását, bekerül a kutatásba a szokásos bakteriológiai vizsgálat során, amelyet 1-2 hónappal megelőzően végeznek. petesejtek felvétele az egyetemi kórházban. A vizsga során megkapják az életmódjukról szóló kérdőívet.
A petesejt felvétel előestéjén (a petefészek stimuláció végén) a szokásos vérvétel során minden egyes beteg számára három további cső vért vesznek az egyetemi kórházban. A nők a reggeli utáni vizeletmintához szükséges csavaros tartályt is megkapják, és az életmód kérdőív kitöltését is ellenőrizni fogják (szükség esetén tanácsokat adunk a betegeknek a kérdőív kitöltéséhez). A mintákat a követelményeknek megfelelően még aznap kezelik, aliquot részekre osztják és tárolják.
A petesejtek felvételének napján az első reggeli vizeletet a betegek otthon (vagy egyébként a kórházban) gyűjtik össze. A kitöltött kérdőívet visszanyerjük, és minden nőnél összegyűjtjük a follikuláris folyadékot és a granulosa sejteket. A mintákat aliquot részekre osztják és a követelményeknek megfelelően tárolják még aznap. A granulosa sejteket még aznap kutatólaboratóriumokban in vitro módszerekhez tenyésztik.
A vérből, vizeletből és tüszőfolyadékból álló csöveket kódolják és -80°C-on tartják az Egyetemi Kórházban, amíg el nem szállítják őket a laboratóriumokba, ahol szennyező anyagok (biszfenolok, etinil-ösztradiol és glifozát) és oxidatív stressz biomarkerek (antioxidáns vitaminok, FRAP) elemzése történik. ), számos enzim (kataláz, szuperoxid-diszmutáz, glutation-peroxidáz) és oxidált lipidek) aktivitását vizsgálják.
Tanulmány típusa
Beiratkozás (Várható)
Kapcsolatok és helyek
Tanulmányi kapcsolat
- Név: Fabrice GUERIF, MD-PhD
- Telefonszám: +33 02.47.47.84.76
- E-mail: fabrice.guerif@univ-tours.fr
Tanulmányozza a kapcsolattartók biztonsági mentését
- Név: Virginie MAILLARD, PhD
- Telefonszám: +33 02.47.42.79.71
- E-mail: virginie.maillard@inrae.fr
Tanulmányi helyek
-
-
-
Tours, Franciaország, 37044
- Toborzás
- Department of Reproductive Medicine and Biology, Univesity Hospital, Tours
-
Kapcsolatba lépni:
- Fabrice GUERIF, MD-PhD
-
Kapcsolatba lépni:
- Claire VIGNAULT, MD
-
Kutatásvezető:
- Fabrice GUERIF, MD-PhD
-
Alkutató:
- Claire VIGNAULT, MD
-
-
Részvételi kritériumok
Jogosultsági kritériumok
Tanulmányozható életkorok
Egészséges önkénteseket fogad
Tanulmányozható nemek
Mintavételi módszer
Tanulmányi populáció
Leírás
Bevételi kritériumok:
- 18 és 43 év közötti nő
- Első petesejt-punkció (IVF rang = 1)
Kizárási kritériumok:
- Az adatkezelés ellenzése
- IVF rang egyenlő vagy nagyobb, mint 2
- Tojás adományozás
- Intracitoplazmatikus spermium injekció herebiopsziával
- Intracitoplazmatikus spermium injekció öntartósító szalmával
- Sperma adományozás
Tanulási terv
Hogyan készül a tanulmány?
Tervezési részletek
- Megfigyelési modellek: Kohorsz
- Időperspektívák: Leendő
Kohorszok és beavatkozások
Csoport / Kohorsz |
Beavatkozás / kezelés |
|---|---|
|
In vitro megtermékenyítési protokoll
A nők követték az osztályon az in vitro megtermékenyítési protokollt
|
További vérmintavétel a petefészek stimuláció monitorozása végén (a petesejtek felvételének előestéjén)
Az első vizelet gyűjtése a petesejtek felvételének napján reggel
Follikuláris folyadék és granulosa sejtek gyűjtése a petesejtek felvétele során.
|
Mit mér a tanulmány?
Elsődleges eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Etinilösztradiol jelenléte vagy hiánya a follikuláris folyadékban
Időkeret: Alapvonal
|
A follikuláris folyadékban lévő etinilösztradiol mérése tandem tömegspektrometriával (LC-MS/MS) összekapcsolt folyadékkromatográfiával.
|
Alapvonal
|
|
Etinilösztradiol jelenléte vagy hiánya a vizeletben
Időkeret: Alapvonal
|
A vizeletben lévő etinilösztradiol mérése alapján, tandem tömegspektrometriával (LC-MS/MS) kapcsolt folyadékkromatográfiával.
|
Alapvonal
|
|
Biszfenolok jelenléte vagy hiánya a follikuláris folyadékban
Időkeret: Alapvonal
|
A tüszőfolyadékban lévő biszfenolok mérése tandem tömegspektrometriához (LC-MS/MS) kapcsolt folyadékkromatográfiával.
|
Alapvonal
|
|
Biszfenolok jelenléte vagy hiánya a vizeletben
Időkeret: Alapvonal
|
A vizeletben lévő biszfenolok mérése alapján, tandem tömegspektrometriával (LC-MS/MS) kapcsolt folyadékkromatográfiával.
|
Alapvonal
|
|
Glifozát jelenléte vagy hiánya a follikuláris folyadékban
Időkeret: alapvonal
|
A follikuláris folyadékban lévő glifozát mérése alapján, tandem tömegspektrometriával (LC-MS/MS) kapcsolt folyadékkromatográfiával.
|
alapvonal
|
|
Glifozát jelenléte vagy hiánya a vizeletben
Időkeret: alapvonal
|
A vizeletben lévő glifozát mérése alapján, tandem tömegspektrometriával (LC-MS/MS) kapcsolt folyadékkromatográfiával.
|
alapvonal
|
|
Az etinilösztradiol koncentrációja a follikuláris folyadékban
Időkeret: alapvonal
|
Az etinilösztradiol koncentrációja a tüszőfolyadékban tandem tömegspektrometriával (LC-MS/MS) kapcsolt folyadékkromatográfiával.
|
alapvonal
|
|
Az etinilösztradiol koncentrációja a vizeletben
Időkeret: alapvonal
|
A vizelet etinilösztradiol koncentrációja alapján, tandem tömegspektrometriával (LC-MS/MS) kapcsolt folyadékkromatográfiával.
|
alapvonal
|
|
A biszfenolok koncentrációja a follikuláris folyadékban
Időkeret: alapvonal
|
A tüszőfolyadékban lévő biszfenolok koncentrációja alapján, tandem tömegspektrometriával (LC-MS/MS) kapcsolt folyadékkromatográfiával.
|
alapvonal
|
|
Biszfenolok koncentrációja a vizeletben
Időkeret: alapvonal
|
A vizelet biszfenol-koncentrációja alapján, tandem tömegspektrometriával (LC-MS/MS) kapcsolt folyadékkromatográfiával.
|
alapvonal
|
|
A glifozát koncentrációja a follikuláris folyadékban
Időkeret: alapvonal
|
A follikuláris folyadékban lévő glifozát koncentrációja alapján, tandem tömegspektrometriával (LC-MS/MS) kapcsolt folyadékkromatográfiával.
|
alapvonal
|
|
A glifozát koncentrációja a vizeletben
Időkeret: alapvonal
|
A vizelet glifozát-koncentrációja alapján, tandem tömegspektrometriával (LC-MS/MS) kapcsolt folyadékkromatográfiával.
|
alapvonal
|
Másodlagos eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Petesejtek minősége
Időkeret: alapvonal
|
Minden egyes összegyűjtött szúrt petesejtek nukleáris érettsége alapján értékeljük
|
alapvonal
|
|
Az embrió minősége
Időkeret: 2. nap és 5/6. nap a petesejtek felszedése után
|
Minden egyes átszúrt petesejtek in vitro korai embriófejlődési kompetenciája alapján értékelve (2. napi embriómorfológia, blasztociszta stádium elérésének képessége, 5/6. napi blasztociszta morfológia, blasztociszta kimenetele (transzfer, fagyasztás, eldobás)
|
2. nap és 5/6. nap a petesejtek felszedése után
|
|
Sikeres embrióbeültetés (sikeres terhesség)
Időkeret: Az embrióátültetés utáni 7. naptól a béta-hCG-teszthez, a 8 hetes amenorrhoea után a magzat szívműködése szempontjából és a születés után
|
A klinikai terhesség megerősítése (vér béta humán koriongonadotropin vizsgálat: > 1000 Unity Intenational /L), a folyamatban lévő terhesség megerősítése (a magzat szívműködésének ultrahangos mérése) és az élve és egészséges születés megerősítése alapján értékelve.
|
Az embrióátültetés utáni 7. naptól a béta-hCG-teszthez, a 8 hetes amenorrhoea után a magzat szívműködése szempontjából és a születés után
|
|
Oxidatív stressz biomarkerek follikuláris folyadékban
Időkeret: alapvonal
|
Az antioxidáns vitaminok (karotinoidok, E-vitamin, retinol) mérése nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával
|
alapvonal
|
|
Oxidatív stressz biomarkerek follikuláris folyadékban
Időkeret: Alapvonal
|
Az oxidált lipidek (izoprosztanoidok) mérése LC-MS/MS módszerrel
|
Alapvonal
|
|
Oxidatív stressz biomarkerek follikuláris folyadékban
Időkeret: Alapvonal
|
Az antioxidáns teljesítmény mérésével (FRAP: vasion redukáló antioxidáns teljesítmény) spektrofotometriával értékelve
|
Alapvonal
|
|
Oxidatív stressz biomarkerek follikuláris folyadékban
Időkeret: Alapvonal
|
A glutation-peroxidáz aktivitás mérése spektrofometriával
|
Alapvonal
|
|
Oxidatív stressz biomarkerek a vérben
Időkeret: Az alapállapot előestéjén
|
A plazma antioxidáns vitaminjai (karotinoidok, E-vitamin, retinol) HPLC-vel mérve.
|
Az alapállapot előestéjén
|
|
Oxidatív stressz biomarkerek a vérben
Időkeret: Az alapállapot előestéjén
|
A plazmában oxidált lipidek (izoprosztanoidok) mérése LC-MS/M módszerrel
|
Az alapállapot előestéjén
|
|
Oxidatív stressz biomarkerek a vérben
Időkeret: Az alapállapot előestéjén
|
A plazma antioxidáns erejének (FRAP) spektrofotometriás mérésével értékelve
|
Az alapállapot előestéjén
|
|
Oxidatív stressz biomarkerek a vérben
Időkeret: Az alapállapot előestéjén
|
A glutation-peroxidáz, kataláz és szuperoxid-diszmutáz aktivitásának mérése a vörösvértestekben UV és látható spektrofotometriával
|
Az alapállapot előestéjén
|
|
Oxidatív stressz biomarkerek a vizeletben
Időkeret: alapvonal
|
Az oxidált lipidek (izoprosztanoidok) mérése LC-MS/MS módszerrel
|
alapvonal
|
|
Információk a nők életmódjáról
Időkeret: Az életstílus utolsó 3 hónapja az alapvonal előtt
|
Kérdőíves értékelés: szociodemográfiai jellemzők, dohányzás, fizikai aktivitás, szakmai és környezetvédelmi kiállítások, étrend-kiegészítők (antioxidánsok) fogyasztása, italfogyasztás (csapvíz, műanyag palackból, dobozok...), étel melegítési szokása, ételfogyasztás bádogdobozból, higiéniai és kozmetikai termékek felhasználása...
|
Az életstílus utolsó 3 hónapja az alapvonal előtt
|
|
Szennyező hatások a páciens granulosa sejtjein in vitro
Időkeret: 24 vagy 48 órás expozíció után
|
Sejtéletképesség alapján értékelve (CCK8, élőhalott vizsgálat)
|
24 vagy 48 órás expozíció után
|
|
Szennyező hatások a páciens granulosa sejtjein in vitro
Időkeret: 24 vagy 48 órás expozíció után
|
Elterjedtség alapján (BrdU)
|
24 vagy 48 órás expozíció után
|
|
Szennyező hatások a páciens granulosa sejtjein in vitro
Időkeret: 48 vagy 72 órás expozíció után
|
A szteroidtermelés alapján értékelték (ELISA, LC-MS)
|
48 vagy 72 órás expozíció után
|
|
Szennyező hatások a páciens granulosa sejtjein in vitro
Időkeret: 1 vagy 24 órás expozíció után
|
Az energetikai anyagcserére vonatkozóan (mitokondriális és glikolitikus aktivitások Seahorse és Omnilog tesztekkel)
|
1 vagy 24 órás expozíció után
|
|
Szennyező hatások a páciens granulosa sejtjein in vitro
Időkeret: 5, 6 vagy 24 órás expozíció után
|
Oxidatív stressz biomarkereken (reaktív oxigéntermelés, Nrf2 nukleáris transzlokáció konfokális mikroszkóppal, citometria és fluorimetria) értékelve
|
5, 6 vagy 24 órás expozíció után
|
|
Szennyező hatások a páciens granulosa sejtjein in vitro
Időkeret: 24, 48 vagy 72 órás expozíció után
|
A vizsgált funkciók (beleértve az oxidatív stresszt is) számos markerének fehérje expresszióját (Western Blotting) értékelték
|
24, 48 vagy 72 órás expozíció után
|
|
Szennyező hatások a páciens granulosa sejtjein in vitro
Időkeret: 6 vagy 24 órás expozíció után
|
A vizsgált funkciók (beleértve az oxidatív stresszt is) számos markerének génexpresszióját (RNAseq és Quantitative Reverse Transcription-PCR) értékelték.
|
6 vagy 24 órás expozíció után
|
|
Szennyező hatások a páciens granulosa sejtjein in vitro
Időkeret: 1, 5, 10, 30 és 60 perces expozíció után
|
A jelátviteli útvonalak fehérje expresszióját (Western Blotting) értékelték
|
1, 5, 10, 30 és 60 perces expozíció után
|
|
Szennyező hatások a páciens granulosa sejtjein in vitro
Időkeret: 6 óra expozíció után
|
A jelátviteli útvonalak génexpresszióját (RNAseq és qRT-PCR) értékelték
|
6 óra expozíció után
|
Együttműködők és nyomozók
Szponzor
Nyomozók
- Kutatásvezető: Fabrice GUERIF, MD-PhD, University Hospital, Tours
Tanulmányi rekorddátumok
Tanulmány főbb dátumok
Tanulmány kezdete (Tényleges)
Elsődleges befejezés (Várható)
A tanulmány befejezése (Várható)
Tanulmányi regisztráció dátumai
Először benyújtva
Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Első közzététel (Tényleges)
Tanulmányi rekordok frissítései
Utolsó frissítés közzétéve (Tényleges)
Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Utolsó ellenőrzés
Több információ
A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések
Kulcsszavak
További vonatkozó MeSH feltételek
Egyéb vizsgálati azonosító számok
- DR200209
- 2020-A03241-38 (Egyéb azonosító: IdRCB)
Gyógyszer- és eszközinformációk, tanulmányi dokumentumok
Egy amerikai FDA által szabályozott gyógyszerkészítményt tanulmányoz
Egy amerikai FDA által szabályozott eszközterméket tanulmányoz
Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .
Klinikai vizsgálatok a Vérminta
-
Hillel Yaffe Medical CenterIsmeretlen