Płodność kobiet, czynniki środowiskowe i utleniacz stresu (FERTENOX)
FERTilité féminine, Agents ENvironnementaux et Stress OXydant
W naszym środowisku spotykamy produkty syntetyczne stosowane w przemyśle, farmacji, rolno-spożywczym czy rolniczym. W ten sposób ludzie mogą być jednocześnie narażeni na kilka z tych zanieczyszczeń. Co więcej, te czynniki środowiskowe wywierają lub mogą wywierać niekorzystny wpływ na płodność, zmieniając jakość gamet i zarodków poprzez działanie zaburzające gospodarkę hormonalną lub poprzez wzrost stresu oksydacyjnego w gonadach (ścieżka komórkowa, o której wiadomo, że jest zaangażowana w kilka ludzkich patologii rozrodczych).
W tym kontekście celem niniejszego projektu jest uzyskanie danych opisowych i analitycznych dotyczących ekspozycji kobiet i oocytów na kilka czynników środowiskowych (bisfenole, etynyloestradiol i glifosat). Zbadany zostanie związek między tymi pomiarami zanieczyszczeń w płynie pęcherzykowym i moczu (od kobiet otrzymujących obserwację protokołu zapłodnienia in vitro (IVF) w szpitalu uniwersyteckim w Tours we Francji) a jakością oocytów, zapłodnieniem in vitro i sukcesami ciąży. U tych kobiet zostanie również zmierzonych kilka biomarkerów stresu oksydacyjnego we krwi i płynie pęcherzykowym, które wypełnią kwestionariusz dotyczący ich stylu życia. Wreszcie, dzięki podejściu in vitro, efekty i mechanizmy działania (w tym stres oksydacyjny) tych zanieczyszczeń (pojedynczo lub w koktajlach) będą badane na komórkach warstwy ziarnistej od tych pacjentów.
Przegląd badań
Status
Warunki
Interwencja / Leczenie
Szczegółowy opis
Po poinformowaniu o projekcie Fertenox podczas spotkania opisującego protokół Fecondation In Vitro, wszystkie pacjentki nie wyrażające sprzeciwu wobec udziału w badaniu i wykorzystania indywidualnych informacji zostaną włączone do badania podczas zwykłego badania bakteriologicznego przeprowadzanego 1-2 miesiące przed odbiór komórek jajowych w Szpitalu Uniwersyteckim. Podczas tego egzaminu otrzymają kwestionariusz dotyczący ich stylu życia.
W przeddzień pobrania komórki jajowej (pod koniec stymulacji jajników) podczas zwyczajowego pobierania krwi, w Szpitalu Uniwersyteckim od każdej pacjentki zostaną pobrane trzy dodatkowe probówki krwi. Kobiety otrzymają również zakręcany pojemnik na poranną próbkę moczu oraz sprawdzenie wypełnienia kwestionariusza dotyczącego stylu życia (w razie potrzeby udzielone zostaną porady ułatwiające pacjentom wypełnienie kwestionariusza). Próbki zostaną poddane obróbce, podzielone na porcje i przechowywane zgodnie z wymaganiami tego samego dnia.
W dniu pobrania komórki jajowej, pierwszy poranny mocz zostanie pobrany przez pacjentki w domu (lub inaczej w szpitalu). Wypełniony kwestionariusz zostanie odzyskany, a od każdej kobiety zostanie pobrany płyn pęcherzykowy i komórki ziarniste. Próbki zostaną podzielone na porcje i przechowywane zgodnie z wymaganiami tego samego dnia. Komórki ziarniste będą hodowane tego samego dnia w laboratoriach badawczych do celów badań in vitro.
Probówki z krwią, moczem i płynem pęcherzykowym będą kodowane i przechowywane w Szpitalu Uniwersyteckim w temperaturze -80°C do czasu wysyłki do laboratoriów, gdzie przeprowadzane będą analizy zanieczyszczeń (bisfenole, etynyloestradiol i glifosat) oraz analizy biomarkerów stresu oksydacyjnego (witaminy przeciwutleniające, FRAP ), zbadana zostanie aktywność kilku enzymów (katalazy, dysmutazy ponadtlenkowej, peroksydazy glutationowej) oraz utlenionych lipidów).
Typ studiów
Zapisy (Szacowany)
Kontakty i lokalizacje
Kontakt w sprawie studiów
- Nazwa: Fabrice GUERIF, MD-PhD
- Numer telefonu: +33 02.47.47.84.76
- E-mail: fabrice.guerif@univ-tours.fr
Kopia zapasowa kontaktu do badania
- Nazwa: Virginie MAILLARD, PhD
- Numer telefonu: +33 02.47.42.79.71
- E-mail: virginie.maillard@inrae.fr
Lokalizacje studiów
-
-
-
Tours, Francja, 37044
- Rekrutacyjny
- Department of Reproductive Medicine and Biology, Univesity Hospital, Tours
-
Kontakt:
- Fabrice GUERIF, MD-PhD
-
Kontakt:
- Claire VIGNAULT, MD
-
Główny śledczy:
- Fabrice GUERIF, MD-PhD
-
Pod-śledczy:
- Claire VIGNAULT, MD
-
-
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
Akceptuje zdrowych ochotników
Metoda próbkowania
Badana populacja
Opis
Kryteria przyjęcia:
- Kobieta w wieku od 18 do 43 lat
- Pierwsze nakłucie oocytu (ranking IVF = 1)
Kryteria wyłączenia:
- Sprzeciw wobec przetwarzania danych
- Stopień IVF równy lub wyższy niż 2
- Darowizna jaj
- Docytoplazmatyczna iniekcja plemnika z biopsją jąder
- Docytoplazmatyczne wstrzyknięcie plemnika ze słomką samozachowawczą
- Oddawanie nasienia
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
- Modele obserwacyjne: Kohorta
- Perspektywy czasowe: Spodziewany
Kohorty i interwencje
Grupa / Kohorta |
Interwencja / Leczenie |
|---|---|
|
Protokół zapłodnienia in vitro
Kobiety następnie w oddziale do protokołu zapłodnienia in vitro
|
Dodatkowe pobranie krwi na zakończenie monitoringu stymulacji jajników (przeddzień pobrania komórki jajowej)
Pobranie pierwszego moczu rano w dniu pobrania komórki jajowej
Pobieranie płynu pęcherzykowego i komórek ziarnistych podczas pobierania oocytów.
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Obecność lub brak etynyloestradiolu w płynie pęcherzykowym
Ramy czasowe: Linia bazowa
|
Oceniane na podstawie pomiaru etynyloestradiolu w płynie pęcherzykowym metodą chromatografii cieczowej sprzężonej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS/MS)
|
Linia bazowa
|
|
Obecność lub brak etynyloestradiolu w moczu
Ramy czasowe: Linia bazowa
|
Oceniane na podstawie pomiaru etynyloestradiolu w moczu metodą chromatografii cieczowej połączonej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS/MS)
|
Linia bazowa
|
|
Obecność lub brak bisfenoli w płynie pęcherzykowym
Ramy czasowe: Linia bazowa
|
Oceniane na podstawie pomiaru bisfenoli w płynie pęcherzykowym metodą chromatografii cieczowej sprzężonej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS/MS)
|
Linia bazowa
|
|
Obecność lub brak bisfenoli w moczu
Ramy czasowe: Linia bazowa
|
Oceniane na podstawie pomiaru bisfenoli w moczu metodą chromatografii cieczowej sprzężonej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS/MS)
|
Linia bazowa
|
|
Obecność lub brak glifosatu w płynie pęcherzykowym
Ramy czasowe: linia bazowa
|
Oceniane na podstawie pomiaru glifosatu w płynie pęcherzykowym metodą chromatografii cieczowej połączonej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS/MS)
|
linia bazowa
|
|
Obecność lub brak glifosatu w moczu
Ramy czasowe: linia bazowa
|
Oceniane na podstawie pomiaru glifosatu w moczu metodą chromatografii cieczowej połączonej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS/MS)
|
linia bazowa
|
|
Stężenie etynyloestradiolu w płynie pęcherzykowym
Ramy czasowe: linia bazowa
|
Oceniane na podstawie stężenia etynyloestradiolu w płynie pęcherzykowym metodą chromatografii cieczowej sprzężonej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS/MS)
|
linia bazowa
|
|
Stężenie etynyloestradiolu w moczu
Ramy czasowe: linia bazowa
|
Oceniane na podstawie stężenia etynyloestradiolu w moczu metodą chromatografii cieczowej sprzężonej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS/MS)
|
linia bazowa
|
|
Stężenie bisfenoli w płynie pęcherzykowym
Ramy czasowe: linia bazowa
|
Oceniane na podstawie stężenia bisfenoli w płynie pęcherzykowym metodą chromatografii cieczowej sprzężonej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS/MS)
|
linia bazowa
|
|
Stężenie bisfenoli w moczu
Ramy czasowe: linia bazowa
|
Oceniane na podstawie stężenia bisfenoli w moczu metodą chromatografii cieczowej sprzężonej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS/MS)
|
linia bazowa
|
|
Stężenie glifosatu w płynie pęcherzykowym
Ramy czasowe: linia bazowa
|
Oceniane na podstawie stężenia glifosatu w płynie pęcherzykowym metodą chromatografii cieczowej połączonej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS/MS)
|
linia bazowa
|
|
Stężenie glifosatu w moczu
Ramy czasowe: linia bazowa
|
Oceniane na podstawie stężenia glifosatu w moczu metodą chromatografii cieczowej połączonej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS/MS)
|
linia bazowa
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Jakość oocytów
Ramy czasowe: linia bazowa
|
Oceniano na podstawie dojrzałości jądrowej każdego zebranego nakłutego oocytu
|
linia bazowa
|
|
Jakość zarodka
Ramy czasowe: Dzień 2 i dzień 5/6 po pobraniu komórki jajowej
|
Oceniane na podstawie kompetencji rozwojowych wczesnego zarodka każdego nakłutego oocytu in vitro (morfologia zarodka w dniu 2, zdolność do osiągnięcia stadium blastocysty, morfologia blastocysty w dniu 5/6, wynik blastocysty (przeniesienie, zamrożenie, odrzucenie)
|
Dzień 2 i dzień 5/6 po pobraniu komórki jajowej
|
|
Sukces implantacji zarodka (powodzenie ciąży)
Ramy czasowe: Od 7. dnia po transferze zarodków do oznaczenia beta hCG, w 8. tygodniu braku miesiączki do badania czynności serca płodu i po urodzeniu
|
Oceniane na podstawie potwierdzenia klinicznej ciąży (test beta ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej we krwi: > 1000 Unity Intenational /L), potwierdzenia trwającej ciąży (badanie ultrasonograficzne czynności serca płodu) oraz potwierdzenia porodu żywego i zdrowego
|
Od 7. dnia po transferze zarodków do oznaczenia beta hCG, w 8. tygodniu braku miesiączki do badania czynności serca płodu i po urodzeniu
|
|
Biomarkery stresu oksydacyjnego w płynie pęcherzykowym
Ramy czasowe: linia bazowa
|
Oceniane na podstawie pomiaru witamin przeciwutleniających (karotenoidów, witaminy E, retinolu) metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej
|
linia bazowa
|
|
Biomarkery stresu oksydacyjnego w płynie pęcherzykowym
Ramy czasowe: Linia bazowa
|
Oceniane na podstawie pomiaru utlenionych lipidów (izoprostanoidów) metodą LC-MS/MS
|
Linia bazowa
|
|
Biomarkery stresu oksydacyjnego w płynie pęcherzykowym
Ramy czasowe: Linia bazowa
|
Oceniane na podstawie miary siły przeciwutleniającej (FRAP: siła przeciwutleniająca redukująca jony żelaza) za pomocą spektrofotometrii
|
Linia bazowa
|
|
Biomarkery stresu oksydacyjnego w płynie pęcherzykowym
Ramy czasowe: Linia bazowa
|
Oceniono na podstawie pomiaru aktywności peroksydazy glutationowej metodą spektrometryczną
|
Linia bazowa
|
|
Biomarkery stresu oksydacyjnego we krwi
Ramy czasowe: W przeddzień linii bazowej
|
Oceniane przez pomiar witamin antyoksydacyjnych w osoczu (karotenoidy, witamina E, retinol) metodą HPLC
|
W przeddzień linii bazowej
|
|
Biomarkery stresu oksydacyjnego we krwi
Ramy czasowe: W przeddzień linii bazowej
|
Oceniane na podstawie pomiaru utlenionych lipidów w osoczu (izoprostanoidów) metodą LC-MS/M
|
W przeddzień linii bazowej
|
|
Biomarkery stresu oksydacyjnego we krwi
Ramy czasowe: W przeddzień linii bazowej
|
Oceniono za pomocą pomiaru mocy antyoksydacyjnej osocza (FRAP) metodą spektrofotometryczną
|
W przeddzień linii bazowej
|
|
Biomarkery stresu oksydacyjnego we krwi
Ramy czasowe: W przeddzień linii bazowej
|
Oceniane na podstawie pomiaru aktywności peroksydazy glutationowej, katalazy i dysmutazy ponadtlenkowej w krwinkach czerwonych za pomocą spektrometrii UV i widzialnej
|
W przeddzień linii bazowej
|
|
Biomarkery stresu oksydacyjnego w moczu
Ramy czasowe: linia bazowa
|
Oceniane na podstawie pomiaru utlenionych lipidów (izoprostanoidów) metodą LC-MS/MS
|
linia bazowa
|
|
Informacje o stylu życia kobiet
Ramy czasowe: 3 ostatnie miesiące stylu życia przed punktem odniesienia
|
Oceniano za pomocą kwestionariusza dotyczącego cech socjodemograficznych, palenia tytoniu, aktywności fizycznej, narażenia zawodowego i środowiskowego, spożycia suplementów diety (przeciwutleniaczy), spożycia napojów (wody z kranu, z butelki plastikowej, puszki...), zwyczaju podgrzewania żywności, spożycia żywności z blaszanego pudełka, używanie produktów higienicznych i kosmetycznych...
|
3 ostatnie miesiące stylu życia przed punktem odniesienia
|
|
Wpływ zanieczyszczeń na komórki warstwy ziarnistej pacjenta in vitro
Ramy czasowe: po 24 lub 48 godzinach ekspozycji
|
Oceniono żywotność komórek (CCK8, test żywych trupów)
|
po 24 lub 48 godzinach ekspozycji
|
|
Wpływ zanieczyszczeń na komórki warstwy ziarnistej pacjenta in vitro
Ramy czasowe: po 24 lub 48 godzinach ekspozycji
|
Ocena proliferacji (BrdU)
|
po 24 lub 48 godzinach ekspozycji
|
|
Wpływ zanieczyszczeń na komórki warstwy ziarnistej pacjenta in vitro
Ramy czasowe: po 48 lub 72 godzinach ekspozycji
|
Oceniany pod kątem produkcji steroidów (ELISA, LC-MS)
|
po 48 lub 72 godzinach ekspozycji
|
|
Wpływ zanieczyszczeń na komórki warstwy ziarnistej pacjenta in vitro
Ramy czasowe: po 1 lub 24h ekspozycji
|
Ocena metabolizmu energetycznego (aktywność mitochondrialna i glikolityczna za pomocą testów Seahorse i Omnilog)
|
po 1 lub 24h ekspozycji
|
|
Wpływ zanieczyszczeń na komórki warstwy ziarnistej pacjenta in vitro
Ramy czasowe: po 5, 6 lub 24h ekspozycji
|
Oceniane na podstawie biomarkerów stresu oksydacyjnego (reaktywne wytwarzanie tlenu, translokacja jądrowa Nrf2 za pomocą mikroskopii konfokalnej, cytometrii i fluorymetrii)
|
po 5, 6 lub 24h ekspozycji
|
|
Wpływ zanieczyszczeń na komórki warstwy ziarnistej pacjenta in vitro
Ramy czasowe: po 24, 48 lub 72 godzinach ekspozycji
|
Oceniono ekspresję białek (Western Blotting) kilku markerów badanych funkcji (w tym stresu oksydacyjnego)
|
po 24, 48 lub 72 godzinach ekspozycji
|
|
Wpływ zanieczyszczeń na komórki warstwy ziarnistej pacjenta in vitro
Ramy czasowe: po 6 lub 24h ekspozycji
|
Ocena ekspresji genów (RNAseq i Quantitative Reverse Transcription-PCR) kilku markerów badanych funkcji (w tym stresu oksydacyjnego)
|
po 6 lub 24h ekspozycji
|
|
Wpływ zanieczyszczeń na komórki warstwy ziarnistej pacjenta in vitro
Ramy czasowe: po 1, 5, 10, 30 i 60 minutach ekspozycji
|
Oceniono ekspresję białek (Western Blotting) szlaków sygnałowych
|
po 1, 5, 10, 30 i 60 minutach ekspozycji
|
|
Wpływ zanieczyszczeń na komórki warstwy ziarnistej pacjenta in vitro
Ramy czasowe: po 6h ekspozycji
|
Oceniono ekspresję genów (RNAseq i qRT-PCR) szlaków sygnałowych
|
po 6h ekspozycji
|
Współpracownicy i badacze
Sponsor
Śledczy
- Główny śledczy: Fabrice GUERIF, MD-PhD, University Hospital, Tours
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów (Rzeczywisty)
Zakończenie podstawowe (Szacowany)
Ukończenie studiów (Szacowany)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (Rzeczywisty)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Rzeczywisty)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Słowa kluczowe
Dodatkowe istotne warunki MeSH
Inne numery identyfikacyjne badania
- DR200209
- 2020-A03241-38 (Inny identyfikator: IdRCB)
Informacje o lekach i urządzeniach, dokumenty badawcze
Bada produkt leczniczy regulowany przez amerykańską FDA
Bada produkt urządzenia regulowany przez amerykańską FDA
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .