Fertilidade Feminina, Agentes Ambientais e Oxidantes de Estresse (FERTENOX)
FERTilité féminine, Agents ENvironnementaux et Stress OXydant
No nosso ambiente encontram-se produtos sintéticos de uso industrial, farmacêutico, agroalimentar ou agrícola. Assim, os seres humanos poderiam ser expostos simultaneamente a vários desses poluentes. Além disso, esses agentes ambientais exercem ou podem exercer ações adversas sobre a fertilidade, alterando a qualidade dos gametas e embriões por meio de efeitos desreguladores endócrinos ou pelo aumento do estresse oxidativo nas gônadas (via celular conhecida por estar envolvida em diversas patologias reprodutivas humanas).
Neste contexto, os objetivos do presente projeto são obter dados descritivos e analíticos sobre a exposição de mulheres e ovócitos a diversos agentes ambientais (bisfenóis, etinilestradiol e glifosato). Será estudada a relação entre as medidas desses poluentes no fluido folicular e na urina (de mulheres que seguem o protocolo de fertilização in vitro (FIV) no hospital universitário de Tours, França) e a qualidade do oócito, a fertilização in vitro e o sucesso da gravidez. Vários biomarcadores de estresse oxidativo no sangue e fluido folicular também serão medidos para essas mulheres, que preencherão um questionário sobre seus estilos de vida. Finalmente, graças a abordagens in vitro, serão estudados os efeitos e os mecanismos de ação (incluindo estresse oxidativo) desses poluentes (isolados ou em coquetéis) nas células da granulosa desses pacientes.
Visão geral do estudo
Status
Condições
Intervenção / Tratamento
Descrição detalhada
Após serem informadas sobre o projeto Fertenox durante uma reunião descrevendo sobre o protocolo de Fecondação In Vitro, todas as pacientes do sexo feminino que não se opuserem a participar do estudo e usar informações individuais serão incluídas na pesquisa durante o exame bacteriológico usual realizado 1-2 meses antes coleta de ovócitos no hospital universitário. Eles receberão o questionário sobre seu estilo de vida durante este exame.
Na véspera da coleta do ovócito (ao final da estimulação ovariana), durante a coleta de sangue habitual, três tubos adicionais de sangue serão coletados para cada paciente no hospital universitário. As mulheres também receberão o recipiente com tampa de rosca para amostra de urina da manhã seguinte e o preenchimento do questionário de estilo de vida será verificado (algumas orientações serão feitas, se necessário, para ajudar as pacientes a preencher o questionário). As amostras serão tratadas, aliquotadas e armazenadas de acordo com os requisitos no mesmo dia.
No dia da coleta do ovócito, a primeira urina da manhã será coletada pelas pacientes em casa (ou no hospital). O questionário preenchido será recuperado e o líquido folicular e as células da granulosa serão coletados para cada mulher. As amostras serão aliquotadas e armazenadas de acordo com os requisitos no mesmo dia. As células da granulosa serão cultivadas para abordagens in vitro em laboratórios de pesquisa no mesmo dia.
Tubos de sangue, urina e fluido folicular serão codificados e mantidos a -80°C no hospital universitário até seu envio aos laboratórios, onde serão realizadas análises de poluentes (bisfenóis, etinilestradiol e glifosato) e análises de biomarcadores de estresse oxidativo (vitaminas antioxidantes, FRAP ), atividade de várias enzimas (catalase, superóxido dismutase, glutationa peroxidase) e lipídios oxidados).
Tipo de estudo
Inscrição (Estimado)
Contactos e Locais
Contato de estudo
- Nome: Fabrice GUERIF, MD-PhD
- Número de telefone: +33 02.47.47.84.76
- E-mail: fabrice.guerif@univ-tours.fr
Estude backup de contato
- Nome: Virginie MAILLARD, PhD
- Número de telefone: +33 02.47.42.79.71
- E-mail: virginie.maillard@inrae.fr
Locais de estudo
-
-
-
Tours, França, 37044
- Recrutamento
- Department of Reproductive Medicine and Biology, Univesity Hospital, Tours
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Contato:
- Fabrice GUERIF, MD-PhD
-
Contato:
- Claire VIGNAULT, MD
-
Investigador principal:
- Fabrice GUERIF, MD-PhD
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Subinvestigador:
- Claire VIGNAULT, MD
-
-
Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
Aceita Voluntários Saudáveis
Método de amostragem
População do estudo
Descrição
Critério de inclusão:
- Mulher de 18 a 43 anos
- Primeira punção do oócito (classificação de fertilização in vitro = 1)
Critério de exclusão:
- Oposição ao processamento de dados
- Classificação de fertilização in vitro igual ou superior a 2
- doação de óvulos
- Injeção intracitoplasmática de espermatozoides com biópsia testicular
- Injeção intracitoplasmática de esperma com canudo de autopreservação
- doação de esperma
Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
- Modelos de observação: Coorte
- Perspectivas de Tempo: Prospectivo
Coortes e Intervenções
Grupo / Coorte |
Intervenção / Tratamento |
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Protocolo de Fertilização In Vitro
Mulheres acompanhadas no departamento para protocolo de fertilização in vitro
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Amostragem de sangue adicional no final do monitoramento da estimulação ovariana (na véspera da coleta do oócito)
Coleta da primeira urina pela manhã no dia da coleta do ovócito
Coleta de fluido folicular e células da granulosa durante a coleta de ovócitos.
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
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Presença ou ausência de etinilestradiol no fluido folicular
Prazo: Linha de base
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Avaliado pela medida de etinilestradiol no fluido folicular por Cromatografia Líquida acoplada à Espectrometria de Massa em tandem (LC-MS/MS)
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Linha de base
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Presença ou ausência de etinilestradiol na urina
Prazo: Linha de base
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Avaliado pela medida de etinilestradiol na urina por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa em tandem (LC-MS/MS)
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Linha de base
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Presença ou ausência de bisfenóis no fluido folicular
Prazo: Linha de base
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Avaliado pela medida de bisfenóis no fluido folicular por Cromatografia Líquida acoplada à Espectrometria de Massas tandem (LC-MS/MS)
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Linha de base
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Presença ou ausência de bisfenóis na urina
Prazo: Linha de base
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Avaliado pela medição de bisfenóis na urina por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa em tandem (LC-MS/MS)
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Linha de base
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Presença ou ausência de glifosato no fluido folicular
Prazo: linha de base
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Avaliado pela medida de glifosato no fluido folicular por Cromatografia Líquida acoplada à Espectrometria de Massa em Tandem (LC-MS/MS)
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linha de base
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Presença ou ausência de glifosato na urina
Prazo: linha de base
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Avaliado pela medida de glifosato na urina por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa em tandem (LC-MS/MS)
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linha de base
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Concentração de etinilestradiol no fluido folicular
Prazo: linha de base
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Avaliado pela concentração de etinilestradiol no fluido folicular por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa em tandem (LC-MS/MS)
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linha de base
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Concentração de etinilestradiol na urina
Prazo: linha de base
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Avaliado pela concentração de etinilestradiol na urina por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa em tandem (LC-MS/MS)
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linha de base
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Concentração de bisfenóis no fluido folicular
Prazo: linha de base
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Avaliado pela concentração de bisfenóis no fluido folicular por Cromatografia Líquida acoplada à Espectrometria de Massas tandem (LC-MS/MS)
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linha de base
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Concentração de bisfenóis na urina
Prazo: linha de base
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Avaliado pela concentração de bisfenóis na urina por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa em tandem (LC-MS/MS)
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linha de base
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Concentração de glifosato no fluido folicular
Prazo: linha de base
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Avaliado pela concentração de glifosato no fluido folicular por Cromatografia Líquida acoplada à Espectrometria de Massa em tandem (LC-MS/MS)
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linha de base
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Concentração de glifosato na urina
Prazo: linha de base
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Avaliado pela concentração de glifosato na urina por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa em tandem (LC-MS/MS)
|
linha de base
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Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
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Qualidade do ovócito
Prazo: linha de base
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Avaliado pela maturidade nuclear de cada oócito coletado e puncionado
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linha de base
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Qualidade do embrião
Prazo: Dia 2 e dia 5/6 após a coleta do oócito
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Avaliado pela competência de desenvolvimento do embrião inicial in vitro de cada oócito puncionado (morfologia do embrião do dia 2, capacidade de atingir o estágio de blastocisto, morfologia do blastocisto do dia 5/6, resultado do blastocisto (transferência, congelamento, descarte)
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Dia 2 e dia 5/6 após a coleta do oócito
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Sucesso da implantação do embrião (sucesso na gravidez)
Prazo: A partir do dia 7 após a transferência do embrião para ensaio de beta hCG, em 8 semanas de amenorréia para a atividade cardíaca do feto e após o nascimento
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Avaliado pela confirmação de uma gravidez clínica (ensaio de beta gonadotrofina coriônica humana no sangue: > 1000 Unity Intenational / L), pela confirmação de gravidez em andamento (medição ultrassonográfica da atividade cardíaca do feto) e pela confirmação de parto vivo e saudável
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A partir do dia 7 após a transferência do embrião para ensaio de beta hCG, em 8 semanas de amenorréia para a atividade cardíaca do feto e após o nascimento
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Biomarcadores de estresse oxidativo no fluido folicular
Prazo: linha de base
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Avaliado pela medida de vitaminas antioxidantes (carotenoides, vitamina E, retinol) por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência
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linha de base
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Biomarcadores de estresse oxidativo no fluido folicular
Prazo: Linha de base
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Avaliado por medida de lipídios oxidados (isoprostanóides) por LC-MS/MS
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Linha de base
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Biomarcadores de estresse oxidativo no fluido folicular
Prazo: Linha de base
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Avaliado por medida de poder antioxidante (FRAP: Poder Antioxidante Redutor de Íon Férrico) por espectrofotometria
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Linha de base
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Biomarcadores de estresse oxidativo no fluido folicular
Prazo: Linha de base
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Avaliado pela medida da atividade da glutationa peroxidase por espectrometria
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Linha de base
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Biomarcadores de estresse oxidativo no sangue
Prazo: Na véspera da linha de base
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Avaliado pela medida de vitaminas antioxidantes plasmáticas (carotenoides, vitamina E, retinol) por HPLC
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Na véspera da linha de base
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Biomarcadores de estresse oxidativo no sangue
Prazo: Na véspera da linha de base
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Avaliado pela medida de lipídios oxidados no plasma (isoprostanóides) por LC-MS/M
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Na véspera da linha de base
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Biomarcadores de estresse oxidativo no sangue
Prazo: Na véspera da linha de base
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Avaliado pela medida do poder antioxidante do plasma (FRAP) por espectrofotometria
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Na véspera da linha de base
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Biomarcadores de estresse oxidativo no sangue
Prazo: Na véspera da linha de base
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Avaliado pela medida das atividades da glutationa peroxidase, catalase e superóxido dismutase em hemácias por espectrometria UV e visível
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Na véspera da linha de base
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Biomarcadores de estresse oxidativo na urina
Prazo: linha de base
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Avaliado por medida de lipídios oxidados (isoprostanóides) por LC-MS/MS
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linha de base
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Informações sobre o estilo de vida da mulher
Prazo: Os 3 últimos meses de estilos de vida antes da linha de base
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Avaliados por questionário sobre características sociodemográficas, tabagismo, atividade física, exposições profissionais e ambientais, consumo de suplementos alimentares (antioxidantes), consumo de bebidas (água da torneira, de garrafa plástica, latas...), hábito de reaquecer alimentos, consumo de alimentos desde caixa de lata, uso de produtos de higiene e cosmética...
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Os 3 últimos meses de estilos de vida antes da linha de base
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Efeitos de poluentes em células da granulosa de pacientes in vitro
Prazo: após 24 ou 48h de exposição
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Avaliado na viabilidade celular (CCK8, ensaio de mortos-vivos)
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após 24 ou 48h de exposição
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Efeitos de poluentes em células da granulosa de pacientes in vitro
Prazo: após 24 ou 48h de exposição
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Avaliado em proliferação (BrdU)
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após 24 ou 48h de exposição
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Efeitos de poluentes em células da granulosa de pacientes in vitro
Prazo: após 48 ou 72h de exposição
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Avaliado na produção de esteroides (ELISA, LC-MS)
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após 48 ou 72h de exposição
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Efeitos de poluentes em células da granulosa de pacientes in vitro
Prazo: após 1 ou 24h de exposição
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Avaliado no metabolismo energético (atividades mitocondriais e glicolíticas pelos ensaios Seahorse e Omnilog)
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após 1 ou 24h de exposição
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Efeitos de poluentes em células da granulosa de pacientes in vitro
Prazo: após 5, 6 ou 24h de exposição
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Avaliado em biomarcadores de estresse oxidativo (produção reativa de oxigênio, translocação nuclear Nrf2 por microscopia confocal, citometria e fluorimetria)
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após 5, 6 ou 24h de exposição
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Efeitos de poluentes em células da granulosa de pacientes in vitro
Prazo: após 24, 48 ou 72h de exposição
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Avaliada na expressão proteica (Western Blotting) de vários marcadores das funções estudadas (incluindo estresse oxidativo)
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após 24, 48 ou 72h de exposição
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Efeitos de poluentes em células da granulosa de pacientes in vitro
Prazo: após 6 ou 24h de exposição
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Avaliada na expressão gênica (RNAseq e Quantitative Reverse Transcription-PCR) de vários marcadores das funções estudadas (incluindo estresse oxidativo)
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após 6 ou 24h de exposição
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Efeitos de poluentes em células da granulosa de pacientes in vitro
Prazo: após 1, 5, 10, 30 e 60 min de exposição
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Avaliado na expressão de proteínas (Western Blotting) de vias de sinalização
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após 1, 5, 10, 30 e 60 min de exposição
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Efeitos de poluentes em células da granulosa de pacientes in vitro
Prazo: após 6h de exposição
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Avaliado na expressão gênica (RNAseq e qRT-PCR) de vias de sinalização
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após 6h de exposição
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Investigadores
- Investigador principal: Fabrice GUERIF, MD-PhD, University Hospital, Tours
Datas de registro do estudo
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Real)
Conclusão Primária (Estimado)
Conclusão do estudo (Estimado)
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
Primeira postagem (Real)
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Real)
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
Última verificação
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Termos MeSH relevantes adicionais
Outros números de identificação do estudo
- DR200209
- 2020-A03241-38 (Outro identificador: IdRCB)
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
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