Женская фертильность, факторы окружающей среды и окислитель стресса (FERTENOX)
FERTilité féminine, Agents ENvironnementaux et Stress OXydant
Синтетические продукты, используемые в промышленности, фармацевтике, агропродовольственной или сельскохозяйственной областях, встречаются в нашей окружающей среде. Таким образом, люди могут одновременно подвергаться воздействию нескольких из этих загрязняющих веществ. Кроме того, эти агенты окружающей среды оказывают или могут оказывать неблагоприятное воздействие на фертильность, изменяя качество гамет и эмбрионов из-за воздействия эндокринных разрушителей или из-за увеличения окислительного стресса в гонадах (клеточный путь, который, как известно, участвует в некоторых репродуктивных патологиях человека).
В этом контексте цели настоящего проекта заключаются в получении описательных и аналитических данных о воздействии на женщину и ооциты нескольких факторов окружающей среды (бисфенолы, этинилэстрадиол и глифосат). Связь между этими показателями загрязняющих веществ в фолликулярной жидкости и моче (от женщин, получающих последующее наблюдение по протоколу экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) в университетской больнице Тура, Франция) и качеством ооцитов, успешностью ЭКО и беременностью будет изучена. У этих женщин также будет измерено несколько биомаркеров окислительного стресса в крови и фолликулярной жидкости, которые заполнят анкету об их образе жизни. Наконец, благодаря подходам in vitro эффекты и механизмы действия (включая окислительный стресс) этих загрязняющих веществ (по отдельности или в коктейлях) будут изучаться на клетках гранулезы у этих пациентов.
Обзор исследования
Статус
Условия
Подробное описание
После получения информации о проекте Fertenox во время встречи, посвященной протоколу Fecondation In Vitro, все пациентки, не возражающие против участия в исследовании и использования индивидуальной информации, будут включены в исследование во время обычного бактериологического исследования, проводимого за 1-2 месяца до яйцеклетку забрать в университетской больнице. Во время этого экзамена они получат анкету об их образе жизни.
Накануне забора ооцитов (в конце стимуляции яичников) во время обычного забора крови у каждой пациентки в университетской больнице будет взято по три дополнительные пробирки с кровью. Женщины также получат контейнер с завинчивающейся крышкой для образца утренней мочи, и будет проверено заполнение анкеты об образе жизни (при необходимости будут даны некоторые советы, чтобы помочь пациенткам заполнить анкету). Образцы будут обработаны, разделены на аликвоты и сохранены в соответствии с требованиями в тот же день.
В день забора ооцитов первая утренняя моча будет собираться пациентками дома (или иным образом в больнице). Заполненный вопросник будет восстановлен, и у каждой женщины будут собраны фолликулярная жидкость и клетки гранулезы. Образцы будут разделены на аликвоты и сохранены в соответствии с требованиями в тот же день. Клетки гранулезы будут культивированы для подходов in vitro в исследовательских лабораториях в тот же день.
Пробирки с кровью, мочой и фолликулярной жидкостью будут закодированы и храниться при температуре -80°C в университетской больнице до их отправки в лаборатории, где будут проведены анализы загрязнителей (бисфенолы, этинилэстрадиол и глифосат) и анализы биомаркеров окислительного стресса (антиоксидантные витамины, FRAP). ), активности нескольких ферментов (каталазы, супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы) и окисленных липидов).
Тип исследования
Регистрация (Оцененный)
Контакты и местонахождение
Контакты исследования
- Имя: Fabrice GUERIF, MD-PhD
- Номер телефона: +33 02.47.47.84.76
- Электронная почта: fabrice.guerif@univ-tours.fr
Учебное резервное копирование контактов
- Имя: Virginie MAILLARD, PhD
- Номер телефона: +33 02.47.42.79.71
- Электронная почта: virginie.maillard@inrae.fr
Места учебы
-
-
-
Tours, Франция, 37044
- Рекрутинг
- Department of Reproductive Medicine and Biology, Univesity Hospital, Tours
-
Контакт:
- Fabrice GUERIF, MD-PhD
-
Контакт:
- Claire VIGNAULT, MD
-
Главный следователь:
- Fabrice GUERIF, MD-PhD
-
Младший исследователь:
- Claire VIGNAULT, MD
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- Женщина в возрасте от 18 до 43 лет
- Первая пункция ооцитов (ранг ЭКО = 1)
Критерий исключения:
- Противодействие обработке данных
- Ранг ЭКО равен или выше 2
- Донорство яйцеклеток
- Интрацитоплазматическая инъекция спермы с биопсией яичка
- Интрацитоплазматическая инъекция спермы с соломинкой для самосохранения
- Донорство спермы
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Наблюдательные модели: Когорта
- Временные перспективы: Перспективный
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Протокол экстракорпорального оплодотворения
Женщины последовали в отделение для протокола экстракорпорального оплодотворения
|
Дополнительный забор крови в конце мониторинга стимуляции яичников (накануне забора ооцитов)
Сбор первой мочи утром в день забора ооцитов
Сбор фолликулярной жидкости и гранулезных клеток во время забора ооцитов.
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Наличие или отсутствие этинилэстрадиола в фолликулярной жидкости
Временное ограничение: Базовый уровень
|
Оценивается путем измерения этинилэстрадиола в фолликулярной жидкости с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС).
|
Базовый уровень
|
|
Наличие или отсутствие этинилэстрадиола в моче
Временное ограничение: Базовый уровень
|
Оценивается путем измерения этинилэстрадиола в моче с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС).
|
Базовый уровень
|
|
Наличие или отсутствие бисфенолов в фолликулярной жидкости
Временное ограничение: Базовый уровень
|
Оценивается путем измерения содержания бисфенолов в фолликулярной жидкости с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС).
|
Базовый уровень
|
|
Наличие или отсутствие бисфенолов в моче
Временное ограничение: Базовый уровень
|
Оценивается путем измерения содержания бисфенолов в моче с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС).
|
Базовый уровень
|
|
Наличие или отсутствие глифосата в фолликулярной жидкости
Временное ограничение: исходный уровень
|
Оценивается путем измерения содержания глифосата в фолликулярной жидкости с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС).
|
исходный уровень
|
|
Наличие или отсутствие глифосата в моче
Временное ограничение: исходный уровень
|
Оценивается путем измерения содержания глифосата в моче с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС).
|
исходный уровень
|
|
Концентрация этинилэстрадиола в фолликулярной жидкости
Временное ограничение: исходный уровень
|
Оценивается по концентрации этинилэстрадиола в фолликулярной жидкости с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС).
|
исходный уровень
|
|
Концентрация этинилэстрадиола в моче
Временное ограничение: исходный уровень
|
Оценивается по концентрации этинилэстрадиола в моче с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС).
|
исходный уровень
|
|
Концентрация бисфенолов в фолликулярной жидкости
Временное ограничение: исходный уровень
|
Оценивается по концентрации бисфенолов в фолликулярной жидкости с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС).
|
исходный уровень
|
|
Концентрация бисфенолов в моче
Временное ограничение: исходный уровень
|
Оценивается по концентрации бисфенолов в моче с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС).
|
исходный уровень
|
|
Концентрация глифосата в фолликулярной жидкости
Временное ограничение: исходный уровень
|
Оценивается по концентрации глифосата в фолликулярной жидкости с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС).
|
исходный уровень
|
|
Концентрация глифосата в моче
Временное ограничение: исходный уровень
|
Оценивается по концентрации глифосата в моче с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС).
|
исходный уровень
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Качество ооцитов
Временное ограничение: исходный уровень
|
Оценивается по ядерной зрелости каждого собранного проколотого ооцита.
|
исходный уровень
|
|
Качество эмбриона
Временное ограничение: День 2 и день 5/6 после забора ооцитов
|
Оценивали способность каждого проколотого ооцита к раннему эмбриональному развитию in vitro (морфология эмбриона на 2-й день, способность достичь стадии бластоцисты, морфология бластоцисты на 5/6-й день, исход бластоцисты (перенос, замораживание, отбраковка)
|
День 2 и день 5/6 после забора ооцитов
|
|
Успех имплантации эмбриона (успешная беременность)
Временное ограничение: С 7-го дня после переноса эмбриона для определения бета-ХГЧ, на 8-й неделе аменореи для сердечной деятельности плода и после рождения
|
Оценивается по подтверждению клинической беременности (анализ бета-хорионического гонадотропина человека в крови: > 1000 Единиц по международным стандартам/л), подтверждению продолжающейся беременности (ультразвуковое исследование сердечной деятельности плода) и подтверждению родов живыми и здоровыми
|
С 7-го дня после переноса эмбриона для определения бета-ХГЧ, на 8-й неделе аменореи для сердечной деятельности плода и после рождения
|
|
Биомаркеры окислительного стресса в фолликулярной жидкости
Временное ограничение: исходный уровень
|
Оценка содержания витаминов-антиоксидантов (каротиноидов, витамина Е, ретинола) с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии.
|
исходный уровень
|
|
Биомаркеры окислительного стресса в фолликулярной жидкости
Временное ограничение: Базовый уровень
|
Оценивается путем измерения окисленных липидов (изопростаноидов) с помощью ЖХ-МС/МС
|
Базовый уровень
|
|
Биомаркеры окислительного стресса в фолликулярной жидкости
Временное ограничение: Базовый уровень
|
Оценивается по показателю антиоксидантной способности (FRAP: антиоксидантная способность, восстанавливающая ионы железа) с помощью спектрофотометрии.
|
Базовый уровень
|
|
Биомаркеры окислительного стресса в фолликулярной жидкости
Временное ограничение: Базовый уровень
|
Оценивается путем измерения активности глутатионпероксидазы с помощью спектрометрии.
|
Базовый уровень
|
|
Биомаркеры окислительного стресса в крови
Временное ограничение: Накануне базового
|
Оценивается по содержанию витаминов-антиоксидантов в плазме (каротиноиды, витамин Е, ретинол) с помощью ВЭЖХ.
|
Накануне базового
|
|
Биомаркеры окислительного стресса в крови
Временное ограничение: Накануне базового
|
Оценивается путем измерения содержания окисленных липидов в плазме (изопростаноидов) с помощью ЖХ-МС/М
|
Накануне базового
|
|
Биомаркеры окислительного стресса в крови
Временное ограничение: Накануне базового
|
Оценивается измерением антиоксидантной способности плазмы (FRAP) с помощью спектрофотометрии.
|
Накануне базового
|
|
Биомаркеры окислительного стресса в крови
Временное ограничение: Накануне базового
|
Оценивается по активности глутатионпероксидазы, каталазы и супероксиддисмутазы в эритроцитах с помощью УФ- и видимой спектрометрии.
|
Накануне базового
|
|
Биомаркеры окислительного стресса в моче
Временное ограничение: исходный уровень
|
Оценивается путем измерения окисленных липидов (изопростаноидов) с помощью ЖХ-МС/МС
|
исходный уровень
|
|
Информация об образе жизни женщины.
Временное ограничение: 3 последних месяца образа жизни перед исходным уровнем
|
Оценивается с помощью опросника по социально-демографическим характеристикам, курению, физической активности, профессиональным и экологическим экспозициям, потреблению пищевых добавок (антиоксидантов), потреблению напитков (водопроводная вода, из пластиковых бутылок, банок...), привычке разогревать пищу, потреблению пищи из жестяной коробки, использование средств гигиены и косметики...
|
3 последних месяца образа жизни перед исходным уровнем
|
|
Воздействие загрязняющих веществ на гранулезные клетки пациента in vitro
Временное ограничение: после 24 или 48 часов воздействия
|
Оценка жизнеспособности клеток (CCK8, анализ живых мертвецов)
|
после 24 или 48 часов воздействия
|
|
Воздействие загрязняющих веществ на гранулезные клетки пациента in vitro
Временное ограничение: после 24 или 48 часов воздействия
|
Оценка распространения (BrdU)
|
после 24 или 48 часов воздействия
|
|
Воздействие загрязняющих веществ на гранулезные клетки пациента in vitro
Временное ограничение: после 48 или 72 часов воздействия
|
Оценка продукции стероидов (ИФА, ЖХ-МС)
|
после 48 или 72 часов воздействия
|
|
Воздействие загрязняющих веществ на гранулезные клетки пациента in vitro
Временное ограничение: через 1 или 24 часа воздействия
|
Оценка энергетического метаболизма (митохондриальная и гликолитическая активность с помощью анализов Seahorse и Omnilog)
|
через 1 или 24 часа воздействия
|
|
Воздействие загрязняющих веществ на гранулезные клетки пациента in vitro
Временное ограничение: через 5, 6 или 24 часа воздействия
|
Оценка биомаркеров окислительного стресса (продукция реактивного кислорода, ядерная транслокация Nrf2 с помощью конфокальной микроскопии, цитометрии и флуориметрии)
|
через 5, 6 или 24 часа воздействия
|
|
Воздействие загрязняющих веществ на гранулезные клетки пациента in vitro
Временное ограничение: через 24, 48 или 72 часа воздействия
|
Оценивали по экспрессии белков (Вестерн-блоттинг) нескольких маркеров изучаемых функций (включая окислительный стресс)
|
через 24, 48 или 72 часа воздействия
|
|
Воздействие загрязняющих веществ на гранулезные клетки пациента in vitro
Временное ограничение: через 6 или 24 часа воздействия
|
Оценивали по экспрессии генов (RNAseq и Quantitative Reverse Transcription-PCR) нескольких маркеров изучаемых функций (включая окислительный стресс)
|
через 6 или 24 часа воздействия
|
|
Воздействие загрязняющих веществ на гранулезные клетки пациента in vitro
Временное ограничение: через 1, 5, 10, 30 и 60 мин воздействия
|
Оценивали по экспрессии белков (Вестерн-блоттинг) сигнальных путей
|
через 1, 5, 10, 30 и 60 мин воздействия
|
|
Воздействие загрязняющих веществ на гранулезные клетки пациента in vitro
Временное ограничение: через 6 часов воздействия
|
Оценено по экспрессии генов (RNAseq и qRT-PCR) сигнальных путей
|
через 6 часов воздействия
|
Соавторы и исследователи
Спонсор
Следователи
- Главный следователь: Fabrice GUERIF, MD-PhD, University Hospital, Tours
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования (Действительный)
Первичное завершение (Оцененный)
Завершение исследования (Оцененный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Действительный)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Дополнительные соответствующие термины MeSH
Другие идентификационные номера исследования
- DR200209
- 2020-A03241-38 (Другой идентификатор: IdRCB)
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .