Fenyylialaniiniton ruokavalio potilaille, joilla on toissijainen hyperfenyylialaninemia teho-osastolla

Tausta:

Tehohoidon osastolla olevat potilaat kärsivät usein ongelmista, kuten korkeasta aineenvaihduntanopeudesta ja korkeasta kudosten hajoamisnopeudesta kriittisten sairauksien aiheuttaman vakavan stressin aikana. Fenyylialaniini on ihmiskehon aminohappo ja runsaasti lihaskudosta. Nykyiset tutkimukset ovat kuitenkin osoittaneet, että jos fenyylialaniinin pitoisuus veressä nousee epänormaalisti, se voi viitata siihen, että kudos hajoaa suuria määriä. Tämä ilmiö voi liittyä taudin vakavuuteen. Äskettäinen havaintotutkimuksemme tehohoitoyksikön potilaista totesi, että potilailla, joilla oli kohonnut veren fenyylialaniini, kuolleisuus nelinkertaistui yhden vuoden sisällä.

Yleisin syy veren fenyylialaniinipitoisuuden kohoamiseen on harvinainen sairaus, jota esiintyy pikkulapsilla, joilla on synnynnäisiä aineenvaihduntahäiriöitä, nimeltään synnynnäinen fenyyliketonuria (PKU). Epänormaalin kohonnut fenyylialaniinipitoisuus voi johtaa toksisuuteen ja aiheuttaa aivojen hypoplasiaa, henkistä jälkeenjääneisyyttä, tajunnan häiriöitä ja jopa kohtauksia. Näitä PKU-potilaita tulee hoitaa maitoruokavaliolla, joka sisältää vähän fenyylialaniinia fenyylialaniinipitoisuuksien alentamiseksi. Tällä hetkellä lääketieteessä, vaikka synnynnäisen PKU:n omaavien imeväisten sairaanhoidon strategia on ollut selvä, aikuispotilaille ei vieläkään ole selkeää lääketieteellistä hoitostrategiaa.

Tutkimuksen tarkoitus: Selvittää, voivatko potilaat, joilla on korkea veren fenyylialaniinipitoisuus tehohoidossa, alentaa veren fenyylialaniinipitoisuutta fenyylialaniinittomalla ruokavaliolla, jotta voidaan kehittää yksilöllisiä laadukkaita ja spesifisiä hoitoja.

Menetelmät:

Pyrimme tekemään täydellisen tutkimuksen 30 potilaalla (edellisen tutkimuksemme perusteella rekrytoidaksemme 30 potilasta, joilla on korkea fenyylialaniini, tarvitsemme 100 tehohoitopotilasta seulontaan)

Interventioprotokolla Fenyylialaniinitonta maitoa syötetään 3 päivää ilmoittautumisen jälkeen. Maito ostetaan ABBOTT-yhtiöltä. Myös koko ravinnon sisältö päivittäiseen tarpeeseen räätälöidään ravitsemusterapeuttemme laskelman perusteella. Tutkimuksen päätyttyä kaikkien potilaiden ruokavalio palaa normaaliin ruokavalioon.

Opintojen päätepisteet: 3 päivän opiskelujakso suoritettu

Verinäytteenotto ja tutkimus fenyylialaniinimittausta varten (DBS) Fenyylialaniinin paastotaso mitataan LC/MS-MS:llä kuivaveripistemenetelmällä (verinäyte otetaan sormenpistolla) kaikilta mukana olevilta potilailta seuraavana aamuna tietoisen suostumuksen allekirjoittamisen jälkeen. Suodatinkorteille levitettyä verta kuivataan vähintään 3 tuntia huoneenlämmössä. DBS-kortteja säilytetään huoneenlämmössä 0-6 päivää ennen analyyseja. DBS:n fenyylialaniinipitoisuudet mitataan LC-MS/MS:llä käyttämällä kalibrointikäyrää 0,1 N HCl:ssa. Raportti vastaanotetaan yhden päivän kuluttua kuivan veripisteen keräämisestä. Kun mittaustulos osoittaa fenyylialaniinin pitoisuuden >112 uM, tämä potilas rekisteröidään viralliseen tutkimukseen. Kaikki tutkimukseen osallistuneet potilaat mittaavat fenyylialaniinitasot kuivalla veripisteellä 12 tunnin välein seuraavan 4 päivän ajan, kunnes tutkimusprotokolla on päättynyt.

Fenyylialaniinin mittaus UPLC:llä:

Sillä välin paastoveri kerätään laskimopunktiolla EDTA:ta sisältäviin putkiin seulontaaamuna, 2 ja 4 päivää ruokavaliointervention jälkeen. Kerättyä verta käytetään fenyylialaniinitason mittaamiseen UPLC:llä (ultra-performance nestekromatografia). Plasmanäytteet (100 µl) saostetaan 10 % sulfosalisyylihapolla. Proteiinisaostuksen ja sentrifugoinnin jälkeen derivatisointi aloitetaan AQC:llä asetonitriilissä. Aminohapot analysoidaan sitten käyttämällä ACQUITY UPLC -järjestelmää, joka koostuu Binary Solvent Managerista, Sample Managerista ja Tunable UV-detektorista. Käytämme EmpowerTM 2 -ohjelmistoa järjestelmän ohjaamiseen ja tietojen keräämiseen. Erotteleminen suoritetaan 2,1 x 100 mm ACQUITY BEH C18 -kolonnilla virtausnopeudella 0,70 ml/min. Keskimääräinen analyysin sisäinen variaatiokerroin on 2,6 % fenyylialaniinille. Kokonaisvariaatiokerroin on 2,7 % fenyylialaniinille. Fenyylialaniinin havaitsemisraja on 3,3 μM. Lineaarinen alue on 25-500 μM.

APACHE II -pisteet Sairauden vakavuus arvioidaan laskemalla APACHE II -pisteet teho-osastolle ensimmäisenä hoitopäivänä.