Fenylalaninfri kost för patienter med sekundär hyperfenylalaninemi på intensivvårdsavdelning

Bakgrund:

Patienter på intensivvårdsavdelningen lider ofta av problem som hög metabolisk hastighet och hög vävnadsnedbrytningshastighet under den allvarliga stressen av kritiska sjukdomar. Fenylalanin är en aminosyra i människokroppen och är rik på muskelvävnad. Men aktuella studier har funnit att om koncentrationen av fenylalanin i blodet är onormalt ökad kan det tyda på att vävnaden bryts ned i stora mängder. Detta fenomen kan vara relaterat till sjukdomens svårighetsgrad. Vår färska observationsstudie av patienter på intensivvårdsavdelningen fann att patienter med förhöjt fenylalanin i blodet hade en fyrfaldig ökning av dödligheten inom ett år.

Den vanligaste orsaken till förhöjda fenylalaninkoncentrationer i blodet är en sällsynt sjukdom som förekommer hos spädbarn med medfödda metabola avvikelser, kallad medfödd fenylketonuri (PKU). Den onormalt förhöjda fenylalaninkoncentrationen kan leda till toxicitet och orsaka hjärnhypoplasi, mental retardation, medvetandestörning och till och med anfall. Dessa PKU-patienter måste behandlas med mjölkdiet som innehåller låg mängd fenylalanin för att sänka fenylalaninkoncentrationerna. För närvarande, inom medicinen, även om det har funnits en tydlig medicinsk vårdstrategi för spädbarn med medfödd PKU, finns det fortfarande ingen tydlig medicinsk vårdstrategi för vuxna patienter.

Forskningssyfte: Att undersöka om patienter med hög fenylalaninkoncentration i blodet på intensivvårdsavdelningen kan sänka blodets fenylalaninkoncentration genom en diet utan fenylalanin, för att utveckla personliga, högkvalitativa och specifika behandlingar.

Metoder:

Vi siktar på att ha en komplett studie på 30 patienter (baserat på vår tidigare studie, för att rekrytera 30 patienter med högt fenylalanin, behöver vi 100 intensivvårdspatienter för screening)

Interventionsprotokoll Fenylalaninfri mjölk kommer att matas i 3 dagar efter inskrivningen. Mjölken köps från ABBOTT company. Innehållet i hela näringen för ett dagligt behov är också personanpassat utifrån beräkningar av våra dietister. Efter avslutad studie kommer kosten att återgå till normal kost för alla patienter.

Studiens slutpunkter: 3-dagars studieperioden avslutad

Blodprovtagning och undersökning för fenylalaninmätning (DBS) Fastande fenylalaninnivå kommer att mätas med LC/MS-MS med hjälp av torrblodsfläckmetoden (blodprov tas med fingerstick) hos alla inkluderade patienter nästa morgon efter undertecknat informerat samtycke. Blod som appliceras på filterkort torkas i minst 3 timmar vid rumstemperatur. DBS-kort förvaras i rumstemperatur i 0-6 dagar före analyser. Fenylalaninkoncentrationer i DBS mäts med LC-MS/MS, med användning av en kalibreringskurva i 0,1 N HCl. Rapporten kommer att erhållas en dag efter att torr blodfläck samlats in. När resultatet av mätningen visar koncentrationen av fenylalanin >112 uM, skrivs denna patient in för formell studie. Alla inskrivna patienter kommer att mäta fenylalaninnivåerna med torr blodfläck var 12:e timme under de följande 4 dagarna tills studieprotokollet avslutats.

Fenylalaninmätning med UPLC:

Under tiden kommer fastande blod att samlas in genom venpunktion i EDTA-innehållande rör på morgonen för screening, 2 och 4 dagar efter dietintervention. Det uppsamlade blodet kommer att användas för att mäta fenylalaninnivån med UPLC (ultra-performance liquid chromatography). Plasmaprover (100 μL) fälls ut med 10 % sulfosalicylsyra. Efter proteinfällning och centrifugering initieras derivatisering av AQC i acetonitril. Aminosyror analyseras sedan med ACQUITY UPLC-systemet, bestående av en binär lösningsmedelshanterare, en provhanterare och en avstämbar UV-detektor. Vi använder EmpowerTM 2 Software för att styra systemet och samla in data. Separationer utförs på en 2,1 x 100 mm ACQUITY BEH C18-kolonn med en flödeshastighet av 0,70 ml/min. Den genomsnittliga variationskoefficienten inom analysen är 2,6 % för fenylalanin. Den totala variationskoefficienten är 2,7 % för fenylalanin. Detektionsgränsen är 3,3 μM för fenylalanin. Det linjära området är 25-500 μM.

APACHE II-poäng Sjukdomens svårighetsgrad utvärderas genom att beräkna APACHE II-poäng den första dagen av intensivvårdsinläggning.