Fenylalaninevrij dieet voor patiënten met secundaire hyperfenylalaninemie op de IC

Achtergrond:

Patiënten op de intensive care-afdeling hebben vaak last van problemen zoals een hoge stofwisseling en een hoge snelheid van weefselafbraak onder de zware stress van kritieke ziekten. Fenylalanine is een aminozuur in het menselijk lichaam en is rijk aan spierweefsel. Uit huidige onderzoeken is echter gebleken dat als de concentratie van fenylalanine in het bloed abnormaal verhoogd is, dit erop kan wijzen dat het weefsel in grote hoeveelheden aan het ontbinden is. Dit fenomeen kan verband houden met de ernst van de ziekte. Uit onze recente observationele studie van patiënten op de intensive care-afdeling bleek dat patiënten met een verhoogd fenylalaninegehalte in het bloed binnen een jaar een viervoudige toename in mortaliteit hadden.

De meest voorkomende oorzaak van verhoging van de fenylalanineconcentratie in het bloed is een zeldzame ziekte die voorkomt bij zuigelingen met aangeboren metabole afwijkingen, congenitale fenylketonurie (PKU) genoemd. De abnormaal verhoogde fenylalanineconcentratie kan leiden tot toxiciteit en hersenhypoplasie, mentale retardatie, bewustzijnsstoornissen en zelfs toevallen veroorzaken. Deze PKU-patiënten moeten worden behandeld met een melkdieet dat een lage hoeveelheid fenylalanine bevat om de fenylalanineconcentraties te verlagen. Op dit moment is er in de geneeskunde weliswaar een duidelijke medische zorgstrategie voor zuigelingen met congenitale PKU, maar er is nog steeds geen duidelijke medische zorgstrategie voor volwassen patiënten.

Onderzoeksdoel: Nagaan of patiënten met een hoge fenylalanineconcentratie in het bloed op de intensive care de fenylalanineconcentratie in het bloed kunnen verlagen door een dieet zonder fenylalanine, om zo gepersonaliseerde hoogwaardige en specifieke behandelingen te ontwikkelen.

methoden:

We streven naar een volledige studie bij 30 patiënten (op basis van onze vorige studie, om 30 patiënten met een hoog fenylalaninegehalte te rekruteren, hebben we 100 IC-patiënten nodig voor screening)

Interventieprotocol Er wordt gedurende 3 dagen na inschrijving fenylalaninevrije melk gegeven. De melk wordt gekocht bij het bedrijf ABBOTT. Ook de inhoud van de volledige voeding voor een dagelijkse behoefte wordt gepersonaliseerd op basis van de berekening door onze diëtisten. Na voltooiing van de studie zal het dieet voor alle patiënten weer normaal zijn.

Studie-eindpunten: de studieperiode van 3 dagen is voltooid

Bloedafname en onderzoek voor fenylalaninemeting (DBS) De nuchtere fenylalaninespiegel zal de volgende ochtend worden gemeten door middel van LC/MS-MS met behulp van de dry blood spot-methode (bloedmonster wordt afgenomen door vingerprik) bij alle geïncludeerde patiënten, nadat de geïnformeerde toestemming is ondertekend. Op filterkaarten aangebracht bloed wordt minimaal 3 uur bij kamertemperatuur gedroogd. DBS-kaarten worden voorafgaand aan analyses 0-6 dagen bij kamertemperatuur bewaard. Fenylalanineconcentraties in DBS worden gemeten met LC-MS/MS, gebruikmakend van een ijkcurve in 0,1 N HCl. Het rapport wordt een dag na het verzamelen van de droge bloedvlek ontvangen. Zodra het resultaat van de meting de concentratie van fenylalanine >112 uM laat zien, wordt deze patiënt ingeschreven voor formeel onderzoek. Alle ingeschreven patiënten zullen gedurende de volgende 4 dagen om de 12 uur de fenylalaninespiegels meten door middel van een droge bloedvlek totdat het studieprotocol is voltooid.

Fenylalaninemeting door UPLC:

In de tussentijd zal nuchter bloed worden verzameld door venapunctie in EDTA-bevattende buisjes op de ochtend van de screening, 2 en 4 dagen na de dieetinterventie. Het verzamelde bloed zal worden gebruikt om het fenylalaninegehalte te meten door middel van UPLC (ultra-performance vloeistofchromatografie). Plasmamonsters (100 μl) worden neergeslagen met 10% sulfosalicylzuur. Na eiwitprecipitatie en centrifugatie wordt derivatisering geïnitieerd door AQC in acetonitril. Aminozuren worden vervolgens geanalyseerd met behulp van het ACQUITY UPLC-systeem, bestaande uit een Binary Solvent Manager, een Sample Manager en een Tunable UV-detector. We gebruiken EmpowerTM 2 Software om het systeem te besturen en gegevens te verzamelen. Scheidingen worden uitgevoerd op een 2,1 x 100 mm ACQUITY BEH C18-kolom met een stroomsnelheid van 0,70 ml/min. De gemiddelde intra-assay variatiecoëfficiënt is 2,6% voor fenylalanine. De totale variatiecoëfficiënt is 2,7% voor fenylalanine. De detectielimiet is 3,3 μM voor fenylalanine. Het lineaire bereik is 25-500 μM.

APACHE II-scores De ernst van de ziekte wordt geëvalueerd door de APACHE II-score te berekenen op de eerste dag van IC-opname.