Dieta priva di fenilalanina per pazienti con iperfenilalaninemia secondaria in terapia intensiva

Sfondo:

I pazienti nell'unità di terapia intensiva spesso soffrono di problemi come un alto tasso metabolico e un alto tasso di rottura dei tessuti sotto il grave stress delle malattie critiche. La fenilalanina è un amminoacido presente nel corpo umano ed è ricca di tessuto muscolare. Tuttavia, gli studi attuali hanno scoperto che se la concentrazione di fenilalanina nel sangue è aumentata in modo anomalo, potrebbe indicare che il tessuto si sta decomponendo in grandi quantità. Questo fenomeno può essere correlato alla gravità della malattia. Il nostro recente studio osservazionale sui pazienti nell'unità di terapia intensiva ha rilevato che i pazienti con livelli elevati di fenilalanina nel sangue avevano un aumento di quattro volte della mortalità entro un anno.

La causa più comune di aumento della concentrazione di fenilalanina nel sangue è una malattia rara che si verifica nei neonati con anomalie metaboliche congenite, chiamata fenilchetonuria congenita (PKU). La concentrazione anormalmente elevata di fenilalanina può portare a tossicità e causare ipoplasia cerebrale, ritardo mentale, disturbi della coscienza e persino convulsioni. Questi pazienti con PKU devono essere trattati con una dieta a base di latte che contenga una bassa quantità di fenilalanina per abbassare le concentrazioni di fenilalanina. Al momento, in medicina, sebbene ci sia stata una chiara strategia di assistenza medica per i neonati con PKU congenita, non esiste ancora una chiara strategia di assistenza medica per i pazienti adulti.

Scopo della ricerca: indagare se i pazienti con elevata concentrazione di fenilalanina nel sangue nell'unità di terapia intensiva possono ridurre la concentrazione di fenilalanina nel sangue con una dieta senza fenilalanina, in modo da sviluppare trattamenti personalizzati di alta qualità e specifici.

Metodi:

Miriamo ad avere uno studio completo su 30 pazienti (sulla base del nostro studio precedente, per reclutare 30 pazienti con fenilalanina alta, abbiamo bisogno di 100 pazienti in terapia intensiva per lo screening)

Protocollo di intervento Verrà somministrato latte privo di fenilalanina per 3 giorni dopo l'arruolamento. Il latte viene acquistato dalla società ABBOTT. Anche il contenuto dell'intera alimentazione per un fabbisogno giornaliero è personalizzato in base al calcolo dei nostri dietisti. Dopo il completamento dello studio, la dieta tornerà alla dieta normale per tutti i pazienti.

Punti finali dello studio: il periodo di studio di 3 giorni completato

Prelievo di sangue ed esame per la misurazione della fenilalanina (DBS) Il livello di fenilalanina a digiuno sarà misurato mediante LC / MS-MS utilizzando il metodo del punto di sangue secco (il campione di sangue viene raccolto mediante puntura del dito) in tutti i pazienti inclusi la mattina successiva dopo la firma del consenso informato. Il sangue applicato sulle carte filtranti viene asciugato per almeno 3 ore a temperatura ambiente. Le schede DBS vengono conservate a temperatura ambiente per 0-6 giorni prima delle analisi. Le concentrazioni di fenilalanina in DBS sono misurate con LC-MS/MS, utilizzando una curva di calibrazione in 0,1 N HCl. Il rapporto verrà ricevuto un giorno dopo la raccolta della macchia di sangue secco. Una volta che il risultato della misurazione mostra la concentrazione di fenilalanina > 112 uM, questo paziente viene arruolato per uno studio formale. Tutti i pazienti arruolati effettueranno la misurazione dei livelli di fenilalanina mediante macchia di sangue secco ogni 12 ore per i successivi 4 giorni fino al termine del protocollo di studio.

Misurazione della fenilalanina mediante UPLC:

Nel frattempo, il sangue a digiuno sarà raccolto mediante venipuntura in provette contenenti EDTA la mattina dello screening, 2 e 4 giorni dopo l'intervento dietetico. Il sangue raccolto verrà utilizzato per misurare il livello di fenilalanina mediante UPLC (cromatografia liquida ultra performante). I campioni di plasma (100μL) vengono precipitati con acido solfosalicilico al 10%. Dopo la precipitazione e la centrifugazione delle proteine, la derivatizzazione viene avviata mediante AQC in acetonitrile. Gli amminoacidi vengono quindi analizzati utilizzando il sistema ACQUITY UPLC, costituito da un gestore di solventi binari, un gestore di campioni e un rivelatore UV regolabile. Utilizziamo il software EmpowerTM 2 per controllare il sistema e raccogliere dati. Le separazioni vengono eseguite su una colonna ACQUITY BEH C18 da 2,1×100 mm a una portata di 0,70 ml/min. Il coefficiente medio di variazione intra-dosaggio è del 2,6% per la fenilalanina. Il coefficiente di variazione totale è del 2,7% per la fenilalanina. Il limite di rilevamento è 3,3 μM per la fenilalanina. L'intervallo lineare è 25-500 μM.

Punteggi APACHE II La gravità della malattia viene valutata calcolando il punteggio APACHE II il primo giorno di ricovero in terapia intensiva.