Dieta bez fenyloalaniny dla pacjentów z wtórną hiperfenyloalaninemią na OIT

Tło:

Pacjenci na oddziałach intensywnej terapii często cierpią z powodu problemów, takich jak wysoki poziom metabolizmu i wysoki wskaźnik rozpadu tkanek w wyniku silnego stresu związanego z chorobami krytycznymi. Fenyloalanina jest aminokwasem w organizmie człowieka i jest bogata w tkankę mięśniową. Jednak obecne badania wykazały, że jeśli stężenie fenyloalaniny we krwi jest nienormalnie zwiększone, może to wskazywać, że tkanka rozkłada się w dużych ilościach. Zjawisko to może być związane z ciężkością choroby. Nasze ostatnie badanie obserwacyjne pacjentów na oddziale intensywnej terapii wykazało, że pacjenci z podwyższonym poziomem fenyloalaniny we krwi mieli czterokrotny wzrost śmiertelności w ciągu jednego roku.

Najczęstszą przyczyną wzrostu stężenia fenyloalaniny we krwi jest rzadka choroba występująca u niemowląt z wrodzonymi wadami metabolicznymi, zwana wrodzoną fenyloketonurią (PKU). Nienormalnie podwyższone stężenie fenyloalaniny może prowadzić do zatrucia i powodować niedorozwój mózgu, upośledzenie umysłowe, zaburzenia świadomości, a nawet drgawki. Tacy pacjenci z PKU muszą być leczeni dietą mleczną zawierającą małą ilość fenyloalaniny w celu obniżenia stężenia fenyloalaniny. Obecnie w medycynie, chociaż istnieje jasna strategia opieki medycznej nad niemowlęciem z wrodzoną PKU, nadal nie ma jasnej strategii opieki nad dorosłymi pacjentami.

Cel badawczy: Zbadanie, czy pacjenci z wysokim stężeniem fenyloalaniny we krwi przebywający na oddziale intensywnej terapii mogą obniżyć stężenie fenyloalaniny we krwi poprzez dietę bez fenyloalaniny, aby opracować spersonalizowane, wysokiej jakości i specyficzne leczenie.

Metody:

Naszym celem jest przeprowadzenie pełnego badania na 30 pacjentach (w oparciu o nasze poprzednie badanie, aby zrekrutować 30 pacjentów z wysokim poziomem fenyloalaniny, potrzebujemy 100 pacjentów na OIT do badań przesiewowych)

Protokół interwencji Mleko bez fenyloalaniny będzie podawane przez 3 dni po włączeniu. Mleko kupowane jest od firmy ABBOTT. Zawartość całego odżywki na dzienne zapotrzebowanie również jest personalizowana na podstawie kalkulacji naszych dietetyków. Po zakończeniu badania dieta wszystkich pacjentów wróci do normy.

Punkty końcowe badania: zakończony 3-dniowy okres nauki

Pobieranie krwi i badanie do pomiaru fenyloalaniny (DBS) Stężenie fenyloalaniny na czczo zostanie zmierzone metodą LC/MS-MS metodą suchej plamki krwi (próbka krwi jest pobierana przez użądlenie palca) u wszystkich włączonych pacjentów następnego ranka po podpisaniu świadomej zgody. Krew nanoszona na karty filtracyjne suszy się przez co najmniej 3 godziny w temperaturze pokojowej. Karty DBS przechowuje się w temperaturze pokojowej przez 0-6 dni przed analizami. Stężenia fenyloalaniny w DBS mierzy się za pomocą LC-MS/MS, stosując krzywą kalibracyjną w 0,1 N HCl. Raport zostanie przesłany dzień po pobraniu suchej plamki krwi. Gdy wynik pomiaru wykaże stężenie fenyloalaniny >112 uM, pacjentka zostaje zakwalifikowana do badania formalnego. Wszyscy włączeni pacjenci będą mierzyć poziom fenyloalaniny za pomocą suchej plamki krwi co 12 godzin przez kolejne 4 dni, aż do zakończenia protokołu badania.

Pomiar fenyloalaniny metodą UPLC:

W międzyczasie krew na czczo zostanie pobrana przez nakłucie żyły do ​​probówek zawierających EDTA rano w dniu badania przesiewowego, 2 i 4 dni po interwencji dietetycznej. Pobrana krew posłuży do pomiaru poziomu fenyloalaniny metodą UPLC (ultrasprawna chromatografia cieczowa). Próbki osocza (100 μl) wytrąca się 10% kwasem sulfosalicylowym. Po wytrąceniu białka i odwirowaniu derywatyzacja jest inicjowana przez AQC w acetonitrylu. Aminokwasy są następnie analizowane przy użyciu systemu ACQUITY UPLC, składającego się z Binary Solvent Manager, Sample Manager i Tunable UV detektor. Używamy oprogramowania EmpowerTM 2 do sterowania systemem i gromadzenia danych. Rozdzielanie przeprowadza się na kolumnie ACQUITY BEH C18 2,1 x 100 mm przy szybkości przepływu 0,70 ml/min. Średni współczynnik zmienności wewnątrz testu wynosi 2,6% dla fenyloalaniny. Całkowity współczynnik zmienności wynosi 2,7% dla fenyloalaniny. Granica wykrywalności fenyloalaniny wynosi 3,3 μM. Zakres liniowy wynosi 25-500 μM.

Punktacja APACHE II Ciężkość choroby ocenia się obliczając punktację APACHE II w pierwszym dniu przyjęcia na OIOM.