Dieta isenta de fenilalanina para pacientes com hiperfenilalaninemia secundária em UTI

Fundo:

Os pacientes na unidade de terapia intensiva geralmente sofrem de problemas como alta taxa metabólica e alta taxa de degradação de tecidos sob o estresse severo de doenças críticas. A fenilalanina é um aminoácido no corpo humano e é rico em tecido muscular. No entanto, estudos atuais descobriram que, se a concentração de fenilalanina no sangue aumentar anormalmente, isso pode indicar que o tecido está se decompondo em grandes quantidades. Esse fenômeno pode estar relacionado à gravidade da doença. Nosso recente estudo observacional de pacientes na unidade de terapia intensiva descobriu que pacientes com níveis elevados de fenilalanina no sangue tiveram um aumento de quatro vezes na mortalidade em um ano.

A causa mais comum de elevação da concentração de fenilalanina no sangue é uma doença rara que ocorre em lactentes com anormalidades metabólicas congênitas, denominada fenilcetonúria congênita (PKU). A concentração anormalmente elevada de fenilalanina pode levar à toxicidade e causar hipoplasia cerebral, retardo mental, perturbação da consciência e até convulsões. Esses pacientes com PKU devem ser tratados com dieta láctea que contenha baixa quantidade de fenilalanina para diminuir as concentrações de fenilalanina. Atualmente, na medicina, embora haja uma estratégia clara de atendimento médico para lactentes com PKU congênita, ainda não há uma estratégia clara de atendimento médico para pacientes adultos.

Objetivo da pesquisa: Investigar se pacientes com alta concentração de fenilalanina no sangue na unidade de terapia intensiva podem reduzir a concentração de fenilalanina no sangue por meio de uma dieta sem fenilalanina, de modo a desenvolver tratamentos personalizados de alta qualidade e específicos.

Métodos:

Nosso objetivo é ter um estudo completo em 30 pacientes (com base em nosso estudo anterior, para recrutar 30 pacientes com fenilalanina alta, precisamos de 100 pacientes de UTI para triagem)

Protocolo de intervenção Leite isento de fenilalanina será fornecido por 3 dias após a inscrição. O leite é adquirido da empresa ABBOTT. O conteúdo de toda a nutrição para uma necessidade diária também é personalizado com base no cálculo de nossos nutricionistas. Após a conclusão do estudo, a dieta será de volta à dieta normal para todos os pacientes.

Pontos finais do estudo: o período de estudo de 3 dias concluído

Amostragem de sangue e exame para medição de fenilalanina (DBS) O nível de fenilalanina em jejum será medido por LC/MS-MS usando o método de sangue seco (a amostra de sangue é coletada por picada no dedo) em todos os pacientes incluídos na manhã seguinte após o consentimento informado assinado. O sangue aplicado nos cartões de filtro é seco por pelo menos 3 horas em temperatura ambiente. Os cartões DBS são armazenados em temperatura ambiente por 0-6 dias antes das análises. As concentrações de fenilalanina em DBS são medidas com LC-MS/MS, usando uma curva de calibração em 0,1 N HCl. O relatório será recebido um dia após a coleta do sangue seco. Uma vez que o resultado da medição mostra a concentração de fenilalanina >112 uM, este paciente é inscrito para estudo formal. Todos os pacientes inscritos farão a medição dos níveis de fenilalanina por meio de sangue seco a cada 12 horas pelos 4 dias seguintes até o término do protocolo do estudo.

Medição de fenilalanina por UPLC:

Enquanto isso, o sangue em jejum será coletado por punção venosa em tubos contendo EDTA na manhã da triagem, 2 e 4 dias após a intervenção dietética. O sangue coletado será usado para medir o nível de fenilalanina por UPLC (cromatografia líquida de ultra-performance). Amostras de plasma (100μL) são precipitadas com ácido sulfosalicílico a 10%. Após precipitação e centrifugação da proteína, a derivatização é iniciada por AQC em acetonitrila. Os aminoácidos são então analisados ​​usando o sistema ACQUITY UPLC, que consiste em um gerenciador de solvente binário, um gerenciador de amostra e um detector de UV ajustável. Usamos o software EmpowerTM 2 para controlar o sistema e coletar dados. As separações são realizadas em uma coluna ACQUITY BEH C18 de 2,1 × 100 mm a uma taxa de fluxo de 0,70 mL/min. O coeficiente de variação intraensaio médio é de 2,6% para a fenilalanina. O coeficiente total de variação é de 2,7% para a fenilalanina. O limite de detecção é de 3,3 μM para fenilalanina. A faixa linear é de 25-500 μM.

Escores APACHE II A gravidade da doença é avaliada pelo cálculo do escore APACHE II no primeiro dia de internação na UTI.