Fenylalaninfri diett for pasienter med sekundær hyperfenylalaninemi på intensivavdelingen

Bakgrunn:

Pasienter på intensivavdelingen lider ofte av problemer som høy metabolsk hastighet og høy vevsnedbrytningshastighet under alvorlig stress av kritiske sykdommer. Fenylalanin er en aminosyre i menneskekroppen og er rik på muskelvev. Nåværende studier har imidlertid funnet at dersom konsentrasjonen av fenylalanin i blodet økes unormalt, kan det tyde på at vevet brytes ned i store mengder. Dette fenomenet kan være relatert til sykdommens alvorlighetsgrad. Vår nylige observasjonsstudie av pasienter på intensivavdelingen fant at pasienter med forhøyet fenylalanin i blodet hadde en fire ganger økning i dødelighet i løpet av ett år.

Den vanligste årsaken til forhøyet konsentrasjon av fenylalanin i blodet er en sjelden sykdom som oppstår hos spedbarn med medfødte metabolske forstyrrelser, kalt medfødt fenylketonuri (PKU). Den unormalt forhøyede fenylalaninkonsentrasjonen kan føre til toksisitet og forårsake hjernehypoplasi, mental retardasjon, bevissthetsforstyrrelse og til og med anfall. Disse PKU-pasientene må behandles med melkekost som inneholder lav mengde fenylalanin for å senke fenylalaninkonsentrasjonene. For øyeblikket, i medisin, selv om det har vært en klar medisinsk behandlingsstrategi for spedbarn med medfødt PKU, er det fortsatt ingen klar medisinsk behandlingsstrategi for voksne pasienter.

Forskningsformål: Å undersøke om pasienter med høy fenylalaninkonsentrasjon i blodet på intensivavdelingen kan redusere fenylalaninkonsentrasjonen i blodet ved en diett uten fenylalanin, for å utvikle persontilpassede og spesifikke behandlinger av høy kvalitet.

Metoder:

Vi tar sikte på å ha en fullstendig studie på 30 pasienter (basert på vår forrige studie, for å rekruttere 30 pasienter med høyt fenylalanin, trenger vi 100 ICU-pasienter for screening)

Intervensjonsprotokoll Fenylalaninfri melk vil gis i 3 dager etter påmelding. Melken er kjøpt fra ABBOTT selskapet. Innholdet i hele ernæringen for et daglig behov er også personlig tilpasset basert på beregningen av våre kostholdseksperter. Etter at studien er fullført, vil kostholdet være tilbake til normalt kosthold for alle pasienter.

Studiesluttpunkt: 3-dagers studieperiode fullført

Blodprøvetaking og undersøkelse for fenylalaninmåling (DBS) Fastende fenylalaninnivå vil bli målt ved LC/MS-MS ved bruk av tørrblodflekkmetoden (blodprøven tas ved fingerstikk) hos alle inkluderte pasienter neste morgen etter at informert samtykke er signert. Blod påført på filterkort tørkes i minst 3 timer ved romtemperatur. DBS-kort oppbevares ved romtemperatur i 0-6 dager før analyser. Fenylalaninkonsentrasjoner i DBS måles med LC-MS/MS, ved bruk av en kalibreringskurve i 0,1 N HCl. Rapporten mottas én dag etter at tørr blodflekk er tatt. Når resultatet av målingen viser konsentrasjonen av fenylalanin >112 uM, blir denne pasienten registrert for formell studie. Alle påmeldte pasienter vil måle fenylalaninnivåer med tørr blodflekk hver 12. time i de påfølgende 4 dagene til studieprotokollen er ferdig.

Fenylalaninmåling ved UPLC:

I mellomtiden vil fastende blod samles ved venepunktur i EDTA-holdige rør om morgenen for screening, 2 og 4 dager etter diettintervensjon. Det oppsamlede blodet vil bli brukt til å måle fenylalaninnivå ved UPLC (ultra-performance væskekromatografi). Plasmaprøver (100μL) utfelles med 10 % sulfosalisylsyre. Etter proteinutfelling og sentrifugering initieres derivatisering av AQC i acetonitril. Aminosyrer analyseres deretter ved å bruke ACQUITY UPLC-systemet, som består av en binær løsningsmiddelbehandler, en prøvebehandler og en avstembar UV-detektor. Vi bruker EmpowerTM 2 Software for å kontrollere systemet og samle inn data. Separasjoner utføres på en 2,1 x 100 mm ACQUITY BEH C18-kolonne med en strømningshastighet på 0,70 ml/min. Gjennomsnittlig variasjonskoeffisient for intraanalysen er 2,6 % for fenylalanin. Den totale variasjonskoeffisienten er 2,7 % for fenylalanin. Deteksjonsgrensen er 3,3μM for fenylalanin. Det lineære området er 25-500 μM.

APACHE II-score Sykdommens alvorlighetsgrad vurderes ved å beregne APACHE II-score på den første dagen av innleggelse på intensivavdelingen.