Dieta libre de fenilalanina para pacientes con hiperfenilalaninemia secundaria en UCI

Fondo:

Los pacientes en la unidad de cuidados intensivos a menudo sufren problemas como una alta tasa metabólica y una alta tasa de descomposición de los tejidos bajo el estrés severo de las enfermedades críticas. La fenilalanina es un aminoácido en el cuerpo humano y es rico en tejido muscular. Sin embargo, los estudios actuales han encontrado que si la concentración de fenilalanina en la sangre aumenta de manera anormal, puede indicar que el tejido se está descomponiendo en grandes cantidades. Este fenómeno puede estar relacionado con la gravedad de la enfermedad. Nuestro estudio observacional reciente de pacientes en la unidad de cuidados intensivos encontró que los pacientes con niveles elevados de fenilalanina en sangre tenían un aumento de cuatro veces en la mortalidad dentro de un año.

La causa más común de elevación de la concentración de fenilalanina en la sangre es una enfermedad rara que ocurre en bebés con anomalías metabólicas congénitas, llamada fenilcetonuria congénita (PKU). La concentración de fenilalanina anormalmente elevada puede provocar toxicidad y causar hipoplasia cerebral, retraso mental, alteración de la conciencia e incluso convulsiones. Estos pacientes con PKU deben tratarse con una dieta láctea que contenga una cantidad baja de fenilalanina para reducir las concentraciones de fenilalanina. En la actualidad, en medicina, si bien ha existido una estrategia clara de atención médica para lactantes con PKU congénita, aún no existe una estrategia clara de atención médica para pacientes adultos.

Propósito de la investigación: Investigar si los pacientes con alta concentración de fenilalanina en sangre en la unidad de cuidados intensivos pueden reducir la concentración de fenilalanina en sangre mediante una dieta sin fenilalanina, para desarrollar tratamientos personalizados, específicos y de alta calidad.

Métodos:

Nuestro objetivo es tener un estudio completo en 30 pacientes (según nuestro estudio anterior, para reclutar 30 pacientes con fenilalanina alta, necesitamos 100 pacientes de la UCI para la detección)

Protocolo de intervención Se alimentará con leche sin fenilalanina durante 3 días después de la inscripción. La leche se compra a la empresa ABBOTT. El contenido de la nutrición completa para una necesidad diaria también se personaliza según el cálculo de nuestros dietistas. Después de la finalización del estudio, la dieta volverá a la dieta normal para todos los pacientes.

Puntos finales del estudio: el período de estudio de 3 días completado

Muestreo de sangre y examen para la medición de fenilalanina (DBS) El nivel de fenilalanina en ayunas se medirá mediante LC/MS-MS usando el método de mancha de sangre seca (la muestra de sangre se recolecta por picadura en el dedo) en todos los pacientes incluidos a la mañana siguiente después de firmar el consentimiento informado. La sangre aplicada en las tarjetas de filtro se seca durante al menos 3 horas a temperatura ambiente. Las tarjetas DBS se almacenan a temperatura ambiente durante 0-6 días antes de los análisis. Las concentraciones de fenilalanina en DBS se miden con LC-MS/MS, utilizando una curva de calibración en HCl 0,1 N. El informe se recibirá un día después de la recolección de la gota de sangre seca. Una vez que el resultado de la medición muestra una concentración de fenilalanina >112 uM, este paciente se inscribe para un estudio formal. A todos los pacientes inscritos se les realizará la medición de los niveles de fenilalanina mediante gota de sangre seca cada 12 horas durante los siguientes 4 días hasta finalizar el protocolo del estudio.

Medición de fenilalanina por UPLC:

Mientras tanto, se recolectará sangre en ayunas mediante punción venosa en tubos que contienen EDTA en la mañana de la selección, 2 y 4 días después de la intervención dietética. La sangre recolectada se usará para medir el nivel de fenilalanina por UPLC (cromatografía líquida de ultra rendimiento). Las muestras de plasma (100 μl) se precipitan con ácido sulfosalicílico al 10 %. Después de la precipitación y centrifugación de proteínas, se inicia la derivatización mediante AQC en acetonitrilo. A continuación, los aminoácidos se analizan con el sistema ACQUITY UPLC, que consta de un administrador de solventes binario, un administrador de muestras y un detector de UV sintonizable. Usamos el software EmpowerTM 2 para controlar el sistema y recopilar datos. Las separaciones se realizan en una columna ACQUITY BEH C18 de 2,1 × 100 mm a un caudal de 0,70 ml/min. El coeficiente de variación intraensayo medio es del 2,6 % para la fenilalanina. El coeficiente de variación total es del 2,7% para la fenilalanina. El límite de detección es de 3,3 μM para la fenilalanina. El rango lineal es 25-500 μM.

Puntuaciones APACHE II La gravedad de la enfermedad se evalúa calculando la puntuación APACHE II el primer día de ingreso en la UCI.