Безфенилаланиновая диета для пациентов с вторичной гиперфенилаланинемией в отделении интенсивной терапии

Фон:

Пациенты в отделении интенсивной терапии часто страдают от таких проблем, как высокая скорость метаболизма и высокая скорость разрушения тканей в условиях тяжелого стресса критических заболеваний. Фенилаланин является аминокислотой в организме человека и богат мышечной тканью. Однако текущие исследования показали, что если концентрация фенилаланина в крови аномально повышена, это может указывать на то, что ткань разлагается в больших количествах. Это явление может быть связано с тяжестью заболевания. Наше недавнее обсервационное исследование пациентов в отделении интенсивной терапии показало, что у пациентов с повышенным уровнем фенилаланина в крови смертность в течение одного года увеличивалась в четыре раза.

Наиболее частой причиной повышения концентрации фенилаланина в крови является редкое заболевание, возникающее у детей раннего возраста с врожденными нарушениями обмена веществ, называемое врожденной фенилкетонурией (ФКУ). Аномально повышенная концентрация фенилаланина может привести к токсичности и вызвать гипоплазию головного мозга, умственную отсталость, нарушение сознания и даже судороги. Этих пациентов с фенилкетонурией необходимо лечить молочной диетой с низким содержанием фенилаланина, чтобы снизить концентрацию фенилаланина. В настоящее время в медицине, хотя и существует четкая стратегия оказания помощи детям раннего возраста с врожденной фенилкетонурией, до сих пор отсутствует четкая стратегия оказания помощи взрослым пациентам.

Цель исследования: выяснить, могут ли пациенты с высокой концентрацией фенилаланина в крови в отделении интенсивной терапии снизить концентрацию фенилаланина в крови с помощью диеты без фенилаланина, чтобы разработать персонализированные высококачественные и специфические методы лечения.

Методы:

Мы стремимся провести полное исследование у 30 пациентов (на основе нашего предыдущего исследования, чтобы набрать 30 пациентов с высоким уровнем фенилаланина, нам нужно 100 пациентов ОИТ для скрининга)

Протокол вмешательства Молоко, не содержащее фенилаланина, будет даваться в течение 3 дней после включения в исследование. Молоко закупается у компании ABBOTT. Состав цельного питания для суточной потребности также персонализирован на основе расчета наших диетологов. После завершения исследования диета будет возвращена к обычному рациону для всех пациентов.

Конечные точки исследования: 3-дневный период исследования завершен.

Забор крови и исследование для измерения фенилаланина (DBS) Уровень фенилаланина натощак будет измерен с помощью ЖХ/МС-МС с использованием метода сухой капли крови (образец крови берется путем укуса пальца) у всех включенных пациентов на следующее утро после подписания информированного согласия. Кровь, нанесенную на фильтровальные карты, высушивают не менее 3 ч при комнатной температуре. Карты DBS хранят при комнатной температуре в течение 0-6 дней до анализа. Концентрации фенилаланина в DBS измеряют с помощью ЖХ-МС/МС с использованием калибровочной кривой в 0,1 н. HCl. Отчет будет получен через день после сбора сухой капли крови. Как только результат измерения показывает концентрацию фенилаланина >112 мкМ, этого пациента зачисляют на официальное исследование. Все зарегистрированные пациенты будут измерять уровень фенилаланина с помощью сухой капли крови каждые 12 часов в течение следующих 4 дней, пока протокол исследования не будет завершен.

Измерение фенилаланина методом UPLC:

Тем временем кровь натощак будет собираться путем венепункции в пробирки, содержащие ЭДТА, утром в день скрининга, через 2 и 4 дня после диетического вмешательства. Собранная кровь будет использоваться для измерения уровня фенилаланина с помощью UPLC (ультраэффективная жидкостная хроматография). Образцы плазмы (100 мкл) осаждают 10% сульфосалициловой кислотой. После осаждения белка и центрифугирования инициируют дериватизацию с помощью AQC в ацетонитриле. Затем аминокислоты анализируются с использованием системы ACQUITY UPLC, состоящей из Binary Solvent Manager, Sample Manager и Tunable UV детектора. Мы используем программное обеспечение EmpowerTM 2 для управления системой и сбора данных. Разделение проводят на колонке ACQUITY BEH C18 размером 2,1×100 мм при скорости потока 0,70 мл/мин. Средний коэффициент вариации внутри анализа составляет 2,6% для фенилаланина. Общий коэффициент вариации для фенилаланина составляет 2,7%. Предел обнаружения составляет 3,3 мкМ для фенилаланина. Линейный диапазон составляет 25-500 мкМ.

Баллы по шкале APACHE II Тяжесть заболевания оценивают путем подсчета баллов по шкале APACHE II в первый день поступления в отделение интенсивной терапии.