Dieta bez fenylalaninu pro pacienty se sekundární hyperfenylalaninemií na JIP

Pozadí:

Pacienti na jednotce intenzivní péče často trpí problémy, jako je vysoká rychlost metabolismu a vysoká rychlost rozpadu tkání pod silným stresem kritických onemocnění. Fenylalanin je aminokyselina v lidském těle a je bohatá na svalovou tkáň. Současné studie však zjistily, že pokud je koncentrace fenylalaninu v krvi abnormálně zvýšená, může to znamenat, že se tkáň rozkládá ve velkém množství. Tento jev může souviset se závažností onemocnění. Naše nedávná observační studie pacientů na jednotce intenzivní péče zjistila, že u pacientů se zvýšenou hladinou fenylalaninu v krvi došlo během jednoho roku ke čtyřnásobnému zvýšení úmrtnosti.

Nejčastější příčinou zvýšení koncentrace fenylalaninu v krvi je vzácné onemocnění, které se vyskytuje u kojenců s vrozenými metabolickými abnormalitami, nazývané kongenitální fenylketonurie (PKU). Abnormálně zvýšená koncentrace fenylalaninu může vést k toxicitě a způsobit hypoplazii mozku, mentální retardaci, poruchy vědomí a dokonce záchvaty. Tito pacienti s PKU musí být léčeni mléčnou dietou, která obsahuje nízké množství fenylalaninu, aby se snížily koncentrace fenylalaninu. V současné době v medicíně, přestože existuje jasná strategie lékařské péče o kojence s vrozenou PKU, stále neexistuje jasná strategie lékařské péče pro dospělé pacienty.

Účel výzkumu: Zkoumat, zda pacienti s vysokou koncentrací fenylalaninu v krvi na jednotce intenzivní péče mohou snížit koncentraci fenylalaninu v krvi dietou bez fenylalaninu, aby bylo možné vyvinout personalizovanou vysoce kvalitní a specifickou léčbu.

Metody:

Naším cílem je mít kompletní studii u 30 pacientů (na základě naší předchozí studie, abychom získali 30 pacientů s vysokým obsahem fenylalaninu, potřebujeme 100 pacientů na JIP pro screening)

Intervenční protokol bude krmit mléko bez fenylalaninu po dobu 3 dnů po zařazení. Mléko je nakupováno od společnosti ABBOTT. Obsah celé výživy pro denní potřebu je také personalizován na základě výpočtu našich dietologů. Po dokončení studie se dieta vrátí k normální stravě pro všechny pacienty.

Koncové body studie: ukončené 3denní studijní období

Odběr krve a vyšetření na měření fenylalaninu (DBS) Hladina fenylalaninu nalačno bude měřena pomocí LC/MS-MS metodou suché krevní skvrny (odběr krve se odebírá bodnutím prstu) u všech zařazených pacientů následující ráno po podepsání informovaného souhlasu. Krev nanesená na filtrační karty se suší alespoň 3 hodiny při pokojové teplotě. DBS karty se před analýzami skladují při teplotě místnosti po dobu 0-6 dnů. Koncentrace fenylalaninu v DBS se měří pomocí LC-MS/MS s použitím kalibrační křivky v 0,1 N HC1. Zpráva bude obdržena jeden den po odebrání suché krevní skvrny. Jakmile výsledek měření ukáže koncentraci fenylalaninu >112 uM, je tento pacient zařazen do formální studie. Všichni zařazení pacienti budou provádět měření hladin fenylalaninu suchou krevní skvrnou každých 12 hodin po následující 4 dny, dokud nebude ukončen protokol studie.

Měření fenylalaninu pomocí UPLC:

Mezitím bude krev nalačno odebírána venepunkcí do zkumavek obsahujících EDTA ráno před screeningem, 2 a 4 dny po dietě. Odebraná krev bude použita k měření hladiny fenylalaninu pomocí UPLC (ultraúčinná kapalinová chromatografie). Vzorky plazmy (100 μl) se vysrážejí 10% kyselinou sulfosalicylovou. Po vysrážení proteinu a odstředění je derivatizace zahájena AQC v acetonitrilu. Aminokyseliny se poté analyzují pomocí systému ACQUITY UPLC, který se skládá z binárního správce rozpouštědel, správce vzorků a laditelného UV detektoru. K ovládání systému a sběru dat používáme EmpowerTM 2 Software. Separace se provádějí na koloně 2,1 x 100 mm ACQUITY BEH C18 při průtoku 0,70 ml/min. Průměrný variační koeficient v rámci testu je 2,6 % pro fenylalanin. Celkový variační koeficient je 2,7 % pro fenylalanin. Detekční limit je 3,3 μM pro fenylalanin. Lineární rozsah je 25-500 μM.

Skóre APACHE II Závažnost onemocnění se hodnotí výpočtem skóre APACHE II v první den přijetí na JIP.