Phenylalanin-fri diæt til patienter med sekundær hyperphenylalaninæmi på intensivafdeling

Baggrund:

Patienter på intensivafdelingen lider ofte af problemer såsom høj metabolisk hastighed og høj vævsnedbrydningshastighed under den alvorlige stress af kritiske sygdomme. Phenylalanin er en aminosyre i menneskekroppen og er rig på muskelvæv. Nuværende undersøgelser har dog fundet ud af, at hvis koncentrationen af ​​phenylalanin i blodet er unormalt øget, kan det tyde på, at vævet nedbrydes i store mængder. Dette fænomen kan være relateret til sygdommens sværhedsgrad. Vores nylige observationsstudie af patienter på intensivafdelingen viste, at patienter med forhøjet phenylalanin i blodet havde en firedobling i dødeligheden inden for et år.

Den mest almindelige årsag til forhøjet phenylalaninkoncentration i blodet er en sjælden sygdom, der forekommer hos spædbørn med medfødte metaboliske abnormiteter, kaldet medfødt phenylketonuri (PKU). Den unormalt forhøjede phenylalaninkoncentration kan føre til toksicitet og forårsage hjernehypoplasi, mental retardering, bevidsthedsforstyrrelser og endda anfald. Disse PKU-patienter skal behandles med mælkediæt, der indeholder lav mængde phenylalanin for at sænke phenylalaninkoncentrationerne. På nuværende tidspunkt er der i medicin, selv om der har været en klar medicinsk behandlingsstrategi for spædbørn med medfødt PKU, stadig ingen klar medicinsk behandlingsstrategi for voksne patienter.

Forskningsformål: At undersøge, om patienter med høj phenylalaninkoncentration i blodet på intensivafdelingen kan reducere phenylalaninkoncentrationen i blodet ved en diæt uden phenylalanin, således at der udvikles personligt tilpassede og specifikke behandlinger af høj kvalitet.

Metoder:

Vi sigter efter at have et komplet studie med 30 patienter (baseret på vores tidligere undersøgelse, for at rekruttere 30 patienter med høj phenylalanin, har vi brug for 100 intensive patienter til screening)

Interventionsprotokol Phenylalanin-fri mælk vil blive fodret i 3 dage efter tilmelding. Mælken er købt hos ABBOTT selskab. Indholdet af hele ernæringen til et dagligt behov er også personliggjort ud fra vores diætisters udregning. Efter afslutningen af ​​undersøgelsen vil kosten være tilbage til normal kost for alle patienter.

Studieslutpunkter: 3-dages studieperiode afsluttet

Blodprøvetagning og undersøgelse for phenylalanin-måling (DBS) Fastende phenylalanin-niveau vil blive målt ved LC/MS-MS ved hjælp af tørblodpletmetoden (blodprøven udtages ved fingerstik) hos alle inkluderede patienter næste morgen efter underskrevet informeret samtykke. Blod påført på filterkort tørres i mindst 3 timer ved stuetemperatur. DBS-kort opbevares ved stuetemperatur i 0-6 dage før analyser. Phenylalanin-koncentrationer i DBS måles med LC-MS/MS ved hjælp af en kalibreringskurve i 0,1 N HCl. Rapporten modtages en dag efter, at der er opsamlet tør blodplet. Når resultatet af målingen viser koncentrationen af ​​phenylalanin >112 uM, indskrives denne patient til formel undersøgelse. Alle tilmeldte patienter vil måle phenylalaninniveauer ved hjælp af tør blodplet hver 12. time i de følgende 4 dage, indtil undersøgelsesprotokol er afsluttet.

Phenylalaninmåling ved UPLC:

I mellemtiden vil fastende blod blive opsamlet ved venepunktur i EDTA-holdige rør om morgenen for screening, 2 og 4 dage efter diætintervention. Det opsamlede blod vil blive brugt til at måle phenylalanin-niveauet ved UPLC (ultra-performance væskekromatografi). Plasmaprøver (100μL) udfældes med 10% sulfosalicylsyre. Efter proteinfældning og centrifugering initieres derivatisering af AQC i acetonitril. Aminosyrer analyseres derefter ved hjælp af ACQUITY UPLC-systemet, der består af en binær opløsningsmiddelmanager, en prøvemanager og en Tunable UV-detektor. Vi bruger EmpowerTM 2 Software til at styre systemet og indsamle data. Separationer udføres på en 2,1 x 100 mm ACQUITY BEH C18-søjle ved en strømningshastighed på 0,70 ml/min. Den gennemsnitlige intra-assay variationskoefficient er 2,6% for phenylalanin. Den samlede variationskoefficient er 2,7 % for phenylalanin. Detektionsgrænsen er 3,3μM for phenylalanin. Det lineære område er 25-500 μM.

APACHE II-score Sygdommens sværhedsgrad vurderes ved at beregne APACHE II-score på den første dag af intensivafdelingens indlæggelse.