Spesifiset miRNA:t sepsiksessä ja nefrotoksisessa antibioottihoidossa

Sepsis määritellään yleensä henkeä uhkaavaksi ja säätelemättömäksi reaktioksi infektioon (bakteeri-, sieni- tai virusperäinen), mikä johtaa systeemiseen tulehdukseen ja elinten toimintahäiriöihin, mukaan lukien akuutti munuaisvaurio [1]. Kriittisesti sairaiden potilaiden akuutti munuaisvaurio on yleinen ja yleensä vakava tila, johon liittyy lisääntynyt potilaiden sairastuvuus ja kuolleisuus. Kriittisesti sairaat potilaat ovat alttiita akuutille munuaisvauriolle, joka johtuu itse sepsisestä ja mahdollisesti nefrotoksisesta antibioottihoidosta (vankomysiini tai aminoglykosidi-gentamysiini). Nefrotoksisuuden estämiseksi ja subterapeuttisen annostelun välttämiseksi lääkeainepitoisuuksia seerumissa yleensä seurataan ja annosta tai annosväliä muutetaan farmakokineettisen mallin mukaan. Munuaisten tubulusvaurio voi kuitenkin tapahtua, vaikka hoito olisi asetettu optimaalisesti. Uusien ehkäisevien tai terapeuttisten kohteiden (biomarkkereiden) etsimisessä septisessä/nefrotoksisessa akuutissa munuaisvauriossa, nykyinen tutkimuskohde mikroRNA:issa. Aiemmin julkaistuista kokeellisista ja ihmistutkimuksista saatujen tietojen perusteella tunnistimme spesifisiä miRNA:ita, jotka liittyvät tulehdukseen, eliniskemiaan ja munuaistoksisuuteen liittyviin biokemiallisiin reitteihin niiden tarkalla määrityksellä ja ajanmuutosten havaitsemisella seitsemän päivän aikana tutkituilla potilailla. Veri-spesifiset miRNA-tasot, jotka liittyvät munuaistiehyiden vaurioitumiseen, muuttuvat vankomysiinillä tai gentamysiinillä hoidetuilla potilailla verrattuna septisiin potilaisiin, joita hoidettiin muilla mikrobilääkkeillä.

Näytteenottomenetelmä:

Kokoverinäytteet otettiin antibioottihoidon ensimmäisenä, neljännenä ja seitsemäntenä päivänä. Ensimmäiset 24 näytettä (8 potilasta) uutettiin kahtena rinnakkaisena valittujen miRNA:iden seulomiseksi. Verinäytteet kerättiin 2,5 ml:n putkiin (Vacutainer® PAXgene, PreAnalytiX® GmbH, A Qiagen/BD Company, Sveitsi). Samanaikaisesti verinäytteet NGAL-määritystä varten kerättiin 2,6 tai 2 ml:n neutraaleihin putkiin (S-Monovette® K3 EDTA, 2,6 ml, punainen, Sartstedt AG & Co. KG, Saksa; tai Vacuette® K3 EDTA 2 ml, violetti , Greiner Bio-One GmbH, Saksa). Verinäytteet biokemiallisten (munuais- ja tulehdus) parametrien (seerumin kreatiniini, interleukiini-6, prokalsitoniini, C-reaktiivinen proteiini) varalta otettiin samanaikaisesti muiden päivittäisten rutiininomaisten biokemiallisten parametrien kanssa (S-Monovette® seerumigeeli, 4,9 ml, ruskea , Sartstedt AG & Co. KG, Saksa, University Hospital Ostrava tai Vacuette® seerumigeeli, 5,0 ml, punainen, Greiner Bio-One GmbH, Saksa, University Hospital Olomouc). Seerumin antibioottipitoisuuksia (vankomysiini ja gentamysiini) seurattiin tavanomaisen hoidon mukaisesti molemmissa yhteistyössä toimivissa sairaaloissa ilman, että tutkimukseen tarvittiin lisää verinäytteitä.