Specifické miRNA v sepsi a léčbě nefrotoxickými antibiotiky

Sepse je obecně definována jako život ohrožující a dysregulovaná reakce na infekci (bakteriální, plísňovou nebo virovou) vedoucí k systémovému zánětu a orgánové dysfunkci včetně akutního poškození ledvin [1]. Akutní poškození ledvin u kriticky nemocných pacientů je častým a obvykle závažným stavem spojeným se zvýšenou morbiditou a mortalitou pacientů. Kriticky nemocní pacienti jsou náchylní k rozvoji akutního poškození ledvin v důsledku samotné sepse a podávání potenciálně nefrotoxické antibiotické léčby (vankomycin nebo aminoglykosid-gentamicin). Aby se zabránilo nefrotoxicitě a zabránilo se subterapeutickému dávkování, jsou obvykle monitorovány sérové ​​koncentrace léčiva s úpravou dávky nebo dávkovacího intervalu podle farmakokinetického modelu. K renálnímu tubulárnímu poranění však může dojít i při optimálním nastavení léčby. Při hledání nových preventivních nebo terapeutických cílů (biomarkerů) u septického/nefrotoxického akutního poškození ledvin se současný výzkum zaměřuje na mikroRNA. Na základě dat z dříve publikovaných experimentálních a humánních studií jsme identifikovali specifické miRNA asociované s biochemickými cestami zapojenými do zánětu, orgánové ischemie a nefrotoxicity s jejich přesným stanovením a časově proměnlivou detekcí během sedmi dnů u studovaných pacientů. Hladiny miRNA specifické v krvi spojené s poškozením renálních tubulů se mění u pacientů léčených vankomycinem nebo gentamicinem ve srovnání se septickými pacienty léčenými jinými antimikrobiálními látkami.

Metoda odběru vzorků:

Vzorky plné krve byly odebrány první, čtvrtý a sedmý den léčby antibiotiky. Prvních 24 vzorků (8 pacientů) bylo extrahováno duplicitně pro screening vybraných miRNA. Vzorky krve byly odebrány do 2,5 ml zkumavek (Vacutainer® PAXgene, PreAnalytiX® GmbH, A Qiagen/BD Company, Švýcarsko). Současně byly vzorky krve pro stanovení NGAL odebírány do 2,6 nebo 2 ml neutrálních zkumavek (S-Monovette® K3 EDTA, 2,6 ml, červená, Sartstedt AG & Co. KG, Německo; nebo Vacuette® K3 EDTA 2 ml, fialová , Greiner Bio-One GmbH, Německo). Krevní vzorky pro biochemické (renální a zánětlivé) parametry (sérový kreatinin, interleukin-6, prokalcitonin, C-reaktivní protein) byly odebírány současně s dalšími každodenními rutinními biochemickými parametry (sérový gel S-Monovette®, 4,9 ml, hnědý , Sartstedt AG & Co. Koncentrace antibiotik v séru (vankomycin a gentamicin) byly monitorovány podle standardní péče v obou spolupracujících nemocnicích bez potřeby dalších vzorků krve pro studium.