Specyficzne miRNA w sepsie i leczeniu antybiotykami nefrotoksycznymi

Sepsa jest ogólnie definiowana jako zagrażająca życiu i rozregulowana reakcja na infekcję (bakteryjną, grzybiczą lub wirusową) prowadząca do ogólnoustrojowego stanu zapalnego i dysfunkcji narządów, w tym ostrego uszkodzenia nerek [1]. Ostre uszkodzenie nerek u pacjentów w stanie krytycznym jest częstym i zwykle poważnym schorzeniem związanym ze zwiększoną chorobowością i śmiertelnością pacjentów. Krytycznie chorzy pacjenci są podatni na ostre uszkodzenie nerek z powodu samej sepsy i stosowania potencjalnie nefrotoksycznego leczenia antybiotykami (wankomycyna lub aminoglikozyd-gentamycyna). Aby zapobiec nefrotoksyczności i uniknąć podawania dawek subterapeutycznych, zwykle monitoruje się stężenie leku w surowicy, dostosowując dawkę lub odstępy między kolejnymi dawkami zgodnie z modelem farmakokinetycznym. Jednak uszkodzenie kanalików nerkowych może wystąpić nawet przy optymalnym ustawieniu leczenia. W poszukiwaniu nowych celów zapobiegawczych lub terapeutycznych (biomarkerów) w septycznym/nefrotoksycznym ostrym uszkodzeniu nerek, obecne badania koncentrują się na mikroRNA. Na podstawie danych z wcześniej opublikowanych badań eksperymentalnych i ludzkich zidentyfikowaliśmy specyficzne miRNA związane ze szlakami biochemicznymi zaangażowanymi w zapalenie, niedokrwienie narządów i nefrotoksyczność z ich dokładnym określeniem i wykrywaniem zmieniającym się w czasie w ciągu siedmiu dni u badanych pacjentów. Specyficzne dla krwi poziomy miRNA związane z uszkodzeniem kanalików nerkowych zmieniają się u pacjentów leczonych wankomycyną lub gentamycyną w porównaniu z pacjentami z posocznicą leczonymi innymi środkami przeciwdrobnoustrojowymi.

Metoda próbkowania:

Krew pełną pobierano w pierwszym, czwartym i siódmym dniu antybiotykoterapii. Pierwsze 24 próbki (8 pacjentów) ekstrahowano w dwóch powtórzeniach w celu przeszukiwania wybranych miRNA. Próbki krwi zebrano do 2,5 ml probówek (Vacutainer® PAXgene, PreAnalytiX® GmbH, A Qiagen/BD Company, Szwajcaria). Równocześnie próbki krwi do oznaczenia NGAL pobierano do probówek neutralnych 2,6 lub 2 ml (S-Monovette® K3 EDTA, 2,6 ml, czerwony, Sartstedt AG & Co. KG, Niemcy lub Vacuette® K3 EDTA 2 ml, fioletowy , Greiner Bio-One GmbH, Niemcy). Próbki krwi do oznaczania parametrów biochemicznych (nerkowych i zapalnych) (kreatynina w surowicy, interleukina-6, prokalcytonina, białko C-reaktywne) pobierano jednocześnie z innymi rutynowymi parametrami biochemicznymi (surowica S-Monovette® żel, 4,9 ml, brązowa , Sartstedt AG & Co. KG, Niemcy w Szpitalu Uniwersyteckim w Ostrawie lub Vacuette® serum-żel, 5,0 ml, czerwony, Greiner Bio-One GmbH, Niemcy w Szpitalu Uniwersyteckim w Ołomuńcu). Stężenia antybiotyków w surowicy (wankomycyny i gentamycyny) monitorowano zgodnie ze standardową opieką w obu współpracujących szpitalach bez potrzeby pobierania większej liczby próbek krwi do badań.