Mahasyöpämerkkien havaitseminen ja sen pakkauksen kehittäminen (GCMDKD)

1 Varhaisten mahasyövän merkkiaineiden alustava seulonta ja vasta-ainevarmennus

(1) Potilaiden ja terveiden ihmisten rekrytointi ja näytteiden valmistelu: Tämä hanke vaatii neljä tutkimushenkilöerää, kolme erää terveitä ihmisiä, varhaisen mahasyövän ja pitkälle edenneen mahasyövän ryhmiä, joissa kussakin ryhmässä on keskimäärin 30 tapausta. Toinen erä (toinen erä) on terveitä ihmisiä ja 30 kroonista atrofista gastriittia, varhaista mahasyöpää ja 30 kroonista atrofista gastriittia. Jokaisessa pitkälle edenneen mahasyövän ryhmässä oli 100 tapausta ja kussakin maksasyövän, paksusuolensyövän ja rintasyövän 20 tapausta. Koehenkilöiltä saatuja seerumi- ja plasmanäytteitä käytetään mahdollisten mahasyövän kasvainmerkkiaineiden seulomiseen, vakiintuneiden mahasyövän kasvainmerkkiainediagnostiikkamallien ja testipakkausten toimivuuden tarkistamiseen.

1. Mahasyöpäpotilaiden rekrytointi: 30 tapausta varhaisista mahasyöpäpotilaista (T1, T2) ja pitkälle edenneistä mahasyöpäpotilaista (T3, T4) valitaan vastaavasti. Mahasyövän vaiheistus perustuu UICC:n (International Union Against Cancer) TNM-vaiheen kahdeksanteen painokseen. Koehenkilöt seulottiin tietoisen suostumuslomakkeen vaatimusten mukaisesti.
2. Terveiden ihmisten rekrytointi: Terveeksi kontrolliryhmäksi valitaan 30 vapaaehtoista ilman perussairauksia. Koehenkilöt seulottiin tietoisen suostumuslomakkeen vaatimusten mukaisesti.
3. Näytteen valmistelu: suonensisäinen keräys potilaiden ja terveiden kontrollien kokoverinäytteiden saamiseksi. Jokaisen kohteen näytetarve on 600 ul seerumia ja plasmaa.

(2) Vasta-ainesiruseulonta mahasyövän mahdollisille kasvainmarkkereille ensimmäistä kertaa Mahasyövän mahdollisten proteiinimarkkerien seulomiseksi Raybiotechin korkean suorituskyvyn kvantitatiivista vasta-ainesirua (AAH-BLG-2000) käytettiin mittaamaan 640 ensimmäinen erä koehenkilöitä (varhainen mahasyöpä, pitkälle edennyt mahasyöpä ja terveet kontrollit kukin 30). Eräänlainen ihmisen proteiini. Alustavasti seulotaan differentiaaliset proteiinit, tehdään bioinformatiikka-analyysi ja lopuksi seulotaan tutkimuksen kannalta merkitykselliset eri tavalla ilmentyneet proteiinit.

2Räätälöity vasta-ainesiru mahasyövän kasvainmarkkerien todentamiseen Jotta kandidaattikasvainmarkkerit voitaisiin edelleen varmistaa mahasyövän diagnoosia varten, edellisessä vaiheessa seulotut differentiaaliset proteiinit räätälöitiin vasta-ainesiruille. Käytä kohteen seeruminäytteitä (toinen erä) mahdollisen biomarkkerin todentamiseen. Testitulosten mukaan heikosti spesifiset proteiinit hylätään ja spesifisemmat proteiinit säilytetään.

3. Diagnostisen mallin luominen Käytä regressioanalyysiä useiden erilaisten proteiinien yhdistämiseen ja vertailuun, kvantitatiivisen analyysin suorittamiseen, standardikäyrän luomiseen, diagnostisen mallin luomiseen erittäin spesifisille differentiaalisille proteiineille ja erittäin spesifisen differentiaalisen proteiinin diagnostisen mallin käytännöllisyyden mittaamiseen.

4 Kit-kehitys Monoklonaalisia vasta-aineita tuotettiin sieppausvasta-aineiksi erilaisille korkeaspesifisille kasvainmarkkereille, ja lopuksi perustettiin mahasyövän diagnoosipakkaus, jota edistettiin kliinisessä käytännössä.

Mahasyöpädiagnostiikkasarjan perustaminen ja suorituskyvyn mittaus.

1. Luoda mahasyövän diagnostiikkapakkauksia, laadunvalvonnan vertailumateriaaleja ja muotoilla asiaankuuluvia standardeja yllä olevien tutkimustulosten perusteella.
2. Tarkkuustestaus: Laimenna itse tehdyt laadunvalvonnan vertailumateriaalit kolmeen pitoisuuteen korkeaa, keskitasoa ja matalaa, kussakin 3 rinnakkaisreikää, toista testi 10 kertaa ja laske kunkin laadunvalvonnan keskiarvo, keskihajonta ja testiarvo. referenssituote. Variaatiokertoimen (CV) arvo.
3. Herkkyyden havaitseminen: Otetaan näytteeksi nollareferenssistandardi (spesifinen eroproteiini) ja korvataan fluoresenssiarvon keskiarvo, joka on mitattu 20 kertaa plus 2 kertaa keskihajonnat, standardikäyrän yhtälöllä laskeaksesi vähimmäisilmaisutilavuuden.
4. Stabiilisuustesti: Jaa itse tehdyt sarjat kahteen ryhmään ja laita ne 4 ℃ pakastimeen 6 kuukaudeksi ja 37 ℃ 7 päiväksi. Pakkauksen fyysinen ulkonäkö, annos-vastekäyrän lineaarisuus, tarkkuus, herkkyys ja pienin havaitsemistilavuus Ja muita indikaattoreita mitataan, ja erityinen havaitsemismenetelmä on sama kuin yllä olevissa vaiheissa (2) ja (3).
5. Vertailu muihin mahasyövän havaitsemismenetelmiin: käytä itse valmistettuja havaitsemissarjoja 30 varhaisen mahasyövän seeruminäytteen havaitsemiseen, 30 pitkälle edenneen mahasyövän seeruminäytteen havaitsemiseen ja 30 terveen ihmisen seeruminäytteeseen ja analysoi testitulokset.
6. Sarjan mainostaminen ja optimointi. Satunnaisnäytteenotto suoritetaan tätä sarjaa käyttävien potilaiden kesken varhaisen kliinisen mahasyövän diagnoosin ja vastaavan ennusteen tarkkailemiseksi sekä uusintakäynnin tulosten analysoimiseksi. Jatka uusintakäynnin tulosten mukaan vastaavien kokeiden suorittamista sarjan suorituskyvyn optimoimiseksi, esimerkiksi: paranna sen tarkkuutta, herkkyyttä ja niin edelleen.