Ovatko kohdun fibroidit tromboottisia?

Kohdun fibroidit (UF) ovat hyvänlaatuisia kohdun kasvaimia, jotka tunnetaan myös nimellä leiomyoomia. Niiden arvioidaan vaikuttavan jopa 80 prosenttiin hedelmällisessä iässä olevista naisista. UF esiintyy yleisemmin afro-karibialaisilla naisilla. UF voi olla oireeton tai siihen voi liittyä erilaisia ​​oireita, mukaan lukien menorrhagia, dysmenorrea, hedelmättömyys- ja paineoireet.

Laskimotromboembolisen sairauden ja UF:n välinen yhteys on päätelty tapausraporteissa, sarjoissa ja yhdessä väestöpohjaisessa tutkimuksessa. Ongelman todellista levinneisyyttä ja koko laajuutta ei tunneta. Koska UF ovat niin yleisiä, monilla naisilla ilmeinen yhteys heijastaa tunnettuja laskimotromboembolian (VTE) riskitekijöitä, kuten trombofiliaa, tupakointia ja merkittäviä muita sairauksia, kuten syöpä. Tromboosilla ja UF:llä on myös osoitettu olevan yhteisiä riskitekijöitä, kuten liikalihavuus ja ikä. Hormonihoidot, joita käytetään usein UF-oireiden hoitoon, voivat myös lisätä laskimotromboembolian riskiä.

Kuitenkin osalla naisia, joilla on laskimotromboembolia ja UF, ei voida tunnistaa trombofiliaa tai hankittuja laskimotromboemboliaa koskevia riskitekijöitä. Useimmissa raportoiduissa tapaustutkimuksissa suuret kasvaimet aiheuttavat lantion verisuonten ulkoista kompressiota, laskimoiden staasia ja siten tromboosia. Keskustemme raportoimassa kliinisessä tapauskatsauksessa on tunnistettu naisia, joilla on tromboosi ja UF, jotka eivät aiheuta paikallista laskimostaasia eikä muita tromboosin riskitekijöitä. Tämä viittaa siihen, että tromboosin kehittymisen taustalla voi olla muita patogeenisiä mekanismeja henkilöillä, joilla on UF. Toinen keskus on myös julkaissut tapauskatsauksen, jossa samalla tunnistetaan ilmeinen yhteys UF:n ja tromboosin välillä laskimoiden staasin puuttuessa.

Hyytymän rakenne ja toiminta määräytyvät fibriinin muodostumisen aikana vallitsevien olosuhteiden mukaan. Endogeeninen trombiinin tuotanto, solukomponentit ja fibrinogeenirakenne ovat kaikki osallisena hyytymän rakenteen ja toiminnan muuttamisessa. On olemassa useita uskottavia mekanismeja, joiden kautta UF voi vaikuttaa trombiinin muodostumiseen, hyytymän muodostumiseen ja rakenteeseen synnyttääkseen tromboottisen tilan. Fibroidikasvaimet voivat erittää transformoivaa kasvutekijää ß3 (TGF-ß3), ja tämä näyttää vaikuttavan trombomoduliinin, antitrombiini III:n ja plasminogeeniaktivaattorin estäjän 1:n tuotantoon, jotka kaikki voivat muuttaa veren hemostaattista kapasiteettia ja johtaa tromboottiseen fenotyyppiin.

Vaihtoehtoisesti fibroidit voivat välittää epäsuoraa tromboottista vaikutusta indusoimalla raudanpuuteanemiaa. Raudanpuuteanemia on yhdistetty lukuisissa tapaustutkimuksissa ja sarjoissa tromboottisiin tapahtumiin, yleisimmin aivolaskimotukkoon, mutta myös keuhkoemboliaan (PE) ja syvään laskimotromboosiin (DVT). Raudanpuuteanemia voi myös aiheuttaa erytropoietiinin trombosytoosin, trombopoietiinin ja FVIII:n reaktiivisen kohoamisen, mikä johtaa lisääntyneeseen trombiinin muodostumiseen. Ehdotetussa tutkimuksessa suljemme pois osallistujat, joilla on kohtalainen tai vaikea anemia, jotta voidaan selvittää, johtuuko jokin tunnistettu tromboottinen fenotyyppi muusta mekanismista kuin anemiasta.

Protromboottinen fenotyyppi voidaan tunnistaa useilla laboratoriotutkimuksilla, joista jokainen arvioi muodostuneiden hyytymien laatua ja toimintaa. Tässä tutkimuksessa suoritamme globaaleja hemostaattisia määrityksiä, kuten aktivoidun osittaisen tromboplastisen ajan (APTT) ja protrombiiniajan (PT). Nämä testit antavat kuitenkin tietoa hemostaattisesta prosessista fibriinin alkuperäiseen muodostumispisteeseen asti ja jättävät huomiotta trombiinin muodostumismenettelyn. Tässä tutkimuksessa suoritamme trombiinin muodostustutkimuksia, plasmahyytymän hajoamista ja RNA-sekvensointia standardilaboratoriotestien (APTT, PT, FVIII:C, fibrinogeeni (Clauss-menetelmillä), verihiutaleiden määrä, maksa- ja munuaisten toimintakokeet) lisäksi.

2 MENETELMÄT Plasmahyytymän hajoamista ja trombiinin muodostumista koskevat tutkimukset suoritetaan verihiutaleiden huonossa plasmassa (PPP). Siksi verihiutaleiden ja fibrinogeenin roolissa voimme jäädyttää ja varastoida näytteet niin, että testit voidaan tehdä erässä, kun kaikki näytteet on kerätty. Tämä mahdollistaa testauksen suorittamisen homogeenisesti samoissa olosuhteissa.

2.1 Plasmahyytymien hajoaminen On näyttöä siitä, että kompaktien hyytymien muodostuminen, joiden vastustuskyky hajoamista vastaan ​​on lisääntynyt, altistaa tromboosille. Protromboottiselle hyytymän fenotyypille on tunnusomaista pieni huokoskoko, alhainen hyytymän läpäisevyys ja lisääntynyt vastustuskyky fibrinolyysille. Plasmapohjainen hyytymän muodostusmääritys mahdollistaa yksityiskohtaisen arvion fibriinin muodostumisesta ja hajoamiskyvystä. Periaatteena on, että sitratoitu, verihiutalevähäinen plasma (PPP) sekoitetaan hyytymisaktivaattorin (rekombinanttikudostekijä tai trombiini) sekä fosfolipidien ja kalsiumin kanssa fibriinin muodostumisen indusoimiseksi. Samanaikaisesti lisätään tPa:ta tai muuta plasminogeeniaktivaattoria indusoimaan hyytymän hajoamista. Määrityksessä käytetään sameusperiaatetta, koska fibriiniverkko muodostuu ensin ja sitten hajoaa kaivossa, sameus lisääntyy ja sen jälkeen vähenee. Absorbanssia rekisteröidään jatkuvasti tietyn ajanjakson (esim. 1,5 tunnin) aikana, jolloin muodostuu hyytymishajotuskäyrä (kuva 1), josta voidaan johtaa seuraavat parametrit: aika alkuperäiseen fibriinin muodostukseen (viivevaihe), maksimiabsorbanssi (fibriinin huippupitoisuus kuopassa), integraali tai hyytymän hajoamiskäyrän alla oleva alue (AUC - nettofibriinin muodostuminen) ja aika huipusta hyytymän 50 %:n hajoamiseen (50 %:n hajoamisaika).

Näillä määrityksillä havaitut protromboottiset laboratoriofenotyypit on liitetty provosoimattomaan laskimotromboemboliaan, krooniseen tromboemboliseen keuhkoverenpaineeseen ja posttromboottiseen oireyhtymään. Se on yhdistetty toistuvaan PE: hen, ja se voi ennakoida toistuvaa syvää laskimotromboosta.

2.2 Trombiinin muodostuminen Trombiinin muodostuminen on vakiintunut työkalu veren hyytymisjärjestelmän yleisen toiminnan arvioimiseksi. Koko hyytymisjärjestelmä osallistuu trombiinin muodostumiseen ja myöhempään inaktivaatioon, ja näiden toimintojen summa johtaa joko hemostaattiseen tai tromboottiseen tapahtumaan. Trombiinin muodostumisen arvioimiseen valittu menetelmä on kalibroitu automatisoitu trombografia (CAT), jossa käytetään kalsiumia sisältävää fluoresoivaa substraattia trombiinin muodostuksen laukaisemiseksi, ja ohjelmisto seuraa jatkuvasti ja kirjaa trombiinipitoisuutta ajoissa. Erikoisohjelmiston ja kalibraattorin avulla fluoresoiva signaali voidaan visualisoida trombogrammina. Tästä voidaan laskea parametreja, kuten viiveaika, aika huippu trombiinitasoon, huippu trombiinitaso ja endogeeninen trombiinipotentiaali (ETP).

2.3 RNA:n sekvensointi In vitro ja in vivo on näyttöä siitä, että verisuonivauriosta vapautuva solunulkoinen RNA edistää tromboosia lisäämällä koagulaation kontaktivaiheeseen osallistuvia proteaaseja. Tämän teorian osoittivat edelleen Kannemeier et ai. (2007), jotka osoittivat, että RNAaasin antaminen viivästytti veritulpan muodostumista ja verisuonten tukkeutumista. Ekstrasellulaarinen RNA voidaan kvantifioida suoraan menetelmällä, joka tunnetaan nimellä RNA-sekvensointi. NanoString Technologies, Inc. on kehittänyt kestävämmän, toistettavamman ja helppokäyttöisemmän tekniikan nimeltä "nCounter". Rutiininomaiseen RNA-sekvensointiin verrattuna nCounter voi kvantifioida pienempiä määriä lähtö-RNA:ta (1 ng vs. 100 ng kokonais-RNA:ta). Näytteet analysoidaan NanoString Laboratoryssa, koska nCounter on patentoitu alusta.