Kylmän indusoituvan RNA:ta sitovan proteiinin seerumin ja kudostason arviointi potilailla, joilla on Lichen Planus
Lichen planus (LP) on krooninen tulehduksellinen mukokutaaninen sairaus, jonka etiologiaa ei tunneta.
LP:n patogeneesiä ei täysin ymmärretä, mutta sitä pidetään T-soluvälitteisenä autoimmuunisairautena. Kylmällä indusoituva RNA:ta sitova proteiini (CIRP tai CIRBP) kuuluu glysiiniä sisältävään RNA:ta sitovaan proteiiniperheeseen. Viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että CIRP toimii kasvaimen promoottorina vaikuttamalla solujen eri proliferaatiotasoihin. vaurioihin liittyvät molekyyliproteiinit ja sytokiinit korostettiin monien sairauksien, mukaan lukien psoriaasi, hiustenlähtö areata, vitiligo, nivelreuma, muut autoimmuunisairaudet sekä useat syöpätyypit, patogeneesissä. Tämän tutkimuksen tavoitteena on verrata seerumin ja kudoksen CIRP-tasoja potilailla, joilla on LP ja terveillä kontrolleilla.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Ehdot
Yksityiskohtainen kuvaus
Tämän tutkimuksen tavoitteet ovat:
- Seerumin ja kudosten CIRP-tasojen arviointi potilailla, joilla on LP.
- Vertaa seerumin ja kudosten CIRP-tasoja potilailla, joilla on LP ja terveillä kontrolleilla.
CIRP-tasojen vertailu LP-vakavuuden mukaan. Poikkileikkaustutkimus tehdään 40:llä LP-potilaalla ja 40-vuotiailla terveillä verrokeilla. LP-diagnoosi tehdään kliinisesti ja varmistetaan dermoskopialla.
Tutkimusmenetelmät:
CIRP-lausekkeen arviointi:
Jokaiselle tämän tutkimuksen osallistujalle otetaan sekä verinäyte että ihobiopsia samassa istunnossa, minkä jälkeen jokainen näyte käsitellään erikseen ja sokeasti kliinisen patologian ja histologian osastoilla seuraavasti:
- Verinäytteet:
Jokaisesta kahdesta tutkitusta ryhmästä otetaan kolme millilitraa laskimoverinäytettä vapaassa antikoagulanttiputkessa, mikä mahdollistaa veren hyytymisen. Sen jälkeen, kun putki on jätetty huoneenlämpötilaan 30 minuuttia koaguloitumiseen asti, näytteet sentrifugoidaan (3000 rpm 15 minuutin ajan) ja saatu seerumi säilytetään -80 °C:ssa testaukseen asti (22). Seerumin CIRP-tasot mitataan käyttämällä entsyymi-immunosorbenttianalyysi (ELISA) -kittiä.
• Ihobiopsiat: Jokaiselta potilaalta ja kontrollilta otetaan yksi ihobiopsia 3 mm:n lyönnillä. Nämä biopsiat otetaan paikallispuudutuksessa LP-leesioista ja samoista alueista, jotka vastaavat vertailussa. Kaikki biopsiat toimitetaan Sohagin lääketieteellisen tiedekunnan histologian osastolle. Ne kiinnitetään 10 % neutraaliin puskuroituun formaliiniin, dehydratoidaan nousevassa etanolissa, jonka jälkeen ne upotetaan ksyleeniin ja kyllästetään parafiiniin. Jokaisesta lohkosta otetaan useita 5 mikronin (5um) paksuisia leikkeitä. Yksi objektilasi värjätään hematoksyliinillä ja eosiinilla (H&E) rutiininomaista histopatologista tutkimusta varten. Muut leikkeet asennetaan positiivisesti varautuneille objektilaseille ja säilytetään huoneenlämpötilassa immunohistokemiallisesti värjäytymistä varten.
H&E-värjättyjen leikkeiden histopatologinen arviointi:
H&E:llä värjätyt leikkeet arvioidaan valomikroskoopilla LP-diagnoosin vahvistamiseksi ja epidermaalisten ja ihomuutosten arvioimiseksi.
- Immunohistokemiallinen (IHC) värjäysmenetelmä Immunovärjäysmenetelmänä käytetään streptavidiini-biotiini-amplifioitua järjestelmää. Parafiiniin upotetut kudosleikkeet poistetaan parafiinista ksyleenissä, hydratoidaan uudelleen asteittaisessa etanolisarjassa ja inkuboidaan 3 % vetyperoksidin kanssa. Objektilasit huuhdellaan fosfaattipuskuroidussa suolaliuoksessa (PBS) ja altistetaan sitten lämmön aiheuttamalle epitooppihaulle sitraattipuskuriliuoksessa (Ph 6) 20 minuutin ajan. Jäähdytyksen jälkeen objektilaseja inkuboidaan yön yli huoneenlämpötilassa hiiren monoklonaalisen anti-CIRP-vasta-aineen kanssa (0,1 ml konsentroitu ja laimennettu PBS:llä laimennoksessa 1:75). Immunoreaktiivisuuden havaitseminen suoritetaan käyttämällä Universal Labeled Streptavidin-Biotin -järjestelmää, piparjuuriperoksidaasia. Lopuksi reaktio visualisoidaan sopivalla substraatti/kromogeeni (diaminobentsidiini) reagenssilla. Värjäysmenettely sisältää negatiiviset kontrollit, jotka on saatu korvaamalla primaariset vasta-aineet fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella (16).
- CIRP-immunovärjäyksen tulkinta:
CIRP-immunovärjäys arvioidaan erikseen ja sokeasti LP-leesio- ja kontrollitapauksissa. Epidermaaliset ja ihosolut määritetään positiivisiksi DAB-reaktiolla havaitun ruskehtavan värin perusteella joko sytoplasmassa tai ytimissä ≥ 1 värjätyssä solussa (25).
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Arvioitu)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskeluyhteys
- Nimi: Aya A Elsayed, Msc
- Puhelinnumero: Egypt 00201060094631
- Sähköposti: aya_shando@yahoo.com
Tutki yhteystietojen varmuuskopiointi
- Nimi: Aya A Alshandawely, Msc
- Puhelinnumero: Egypt 00201061691091
- Sähköposti: aya_shando@yahoo.com
Opiskelupaikat
-
-
-
Sohag, Egypti, 82511
- Rekrytointi
- Aya Ahmed Elsayed
-
Ottaa yhteyttä:
- Aya A Elsayed, Msc
- Puhelinnumero: Egypt 00201060094631
- Sähköposti: aya_shando@yahoo.com
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
- Aikuinen
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Molemmista sukupuolista olevat 18–60-vuotiaat potilaat, joilla on kliinisesti ja dermoskooppisesti vahvistettu LP ja jotka eivät ole saaneet mitään paikallista tai systeemistä hoitoa LP:n takia viimeisen kolmen kuukauden aikana.
Poissulkemiskriteerit:
1 . Raskaus ja imetys. 2. Potilaat, joilla on infektioita tai sepsis. 3. Potilaat, joilla on muita ihosairauksia, joihin liittyy kohonneita CIRP-tasoja (esim. psoriasis, vitiligo tai alopecia areata).
4. Potilaat, joilla on systeeminen sairaus (sydän-, munuais-, maksa- tai hengityselinten sairaus), pahanlaatuinen syöpä, joilla on aiemmin ollut sidekudossairauksia tai jotka saavat immunosuppressiivista hoitoa.
5. Potilaat, jotka saivat paikallista tai systeemistä LP-hoitoa 3 kuukautta ennen tutkimusta.
6. Potilaat, joilla on suun, kynsien tai päänahan LP.
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
|---|
|
Lichen Planus -tapaukset
40 tapausta, joissa on lichen planus, joilta otetaan ihobiopsia ja verinäytteitä kylmän indusoituvan RNA:ta sitovan proteiinin tason arvioimiseksi sekä kudoksissa että seerumissa.
|
|
Terve kontrolliryhmä
40 tervettä kontrollia, keneltä otetaan ihobiopsia ja verinäytteitä, jotta voidaan arvioida kylmällä indusoituvan RNA:ta sitovan proteiinin seerumi- ja kudostasoja ja verrata niitä aktiivisiin tapauksiin.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Seerumin ja kudoksen kylmä-indusoituvan RNA:ta sitovan proteiinin tasojen arviointi
Aikaikkuna: noin vuoden
|
Ihobiopsiat ja verinäytteet otetaan CIRBP-tasojen arvioimiseksi
|
noin vuoden
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Opintojen puheenjohtaja: Mohammed A Abu El-Hamd, MD, Sohag University
- Opintojohtaja: Soha H Aboeldahab, MD, Sohag University
- Opintojohtaja: Rasha I Mohamed, MD, Sohag University
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Arvioitu)
Ensisijainen valmistuminen (Arvioitu)
Opintojen valmistuminen (Arvioitu)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- Soh-Med-24-01-02MD
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .