Systeemiset biomarkkerit säteilyn aiheuttaman neurokognitiivisen heikkenemisen ennustamiseen (BIO-RIN)

Vaatimuksena olisi (noin 13 ml) perifeerinen verinäyte ennen sädehoidon aloittamista (Aina kun saatavilla on preoperatiivisia verinäytteitä kerätään). Tämän perusnäytteen ohella verinäyte otetaan myös viikoittain fraktioidun säteilyn aikana (3 ml ääreisverta viikoittain 6-7 viikon ajan) ja sen jälkeen 1 kuukausi säteilytyksen päättymisen jälkeen ja säännöllisesti säännöllisin väliajoin (6-12 kuukauden välein) seurantakäyntien aikana (noin 13 ml verta). Biomarkkerit ja tulehduspaneelit testataan multipleksointisarjoilla. Hermotulehduksen sarjaveren merkkiaineet (mukaan lukien IL-6, IL-1β, IL-4, IL-10, IL-11, IL-12, TNF-α, IFN-ϒ, GM-CSF, YKL-40, TGB-β , CCL8, ApoJ, ApoE tai ApoA proteiini, jossa on muita hermosolumerkkejä, kuten Aβ-42, Aβ-40, BDNF, pNF-H, tau), DNA-vauriot, kuten p53:a sitova proteiini 1, gammahistoniproteiini H2A-perheestä (g-H2AX), soluaktivaatio ja vauriot, kuten verisuonten endoteelikasvutekijä (VEGF), vaskulaarinen solu adheesiomolekyyli Solujenvälinen adheesiomolekyyli 1 (ICAM-1). Plasmanäytteet käsitellään käyttämällä Flow sytometer-pohjaista helmimääritystä. Tämä menetelmä soveltuu parhaiten tulehduksellisten paneelien havaitsemiseen, koska se on ratkaiseva immunologiassa ja kliinisessä tutkimuksessa sen kyvyn vuoksi arvioida useita sytokiinejä samanaikaisesti rajoitetuista näytemääristä, mikä tarjoaa kattavan profiilin immuunivasteista erilaisissa olosuhteissa, kuten tulehduksissa. Tämä tarjoaa meille korkean herkkyyden, spesifisyyden ja tehokkuuden, kun keräämme rajoitetun määrän näytteitä. Tämän menetelmän tiedetään olevan tehokas työkalu biomarkkerien löytämiseen, sairauksien seurantaan ja monimutkaisten immuunivasteiden ymmärtämiseen. Tässä määrityksessä sytokiinien multipleksointi helmirivimenetelmillä sisältää useiden sytokiinien samanaikaisen havaitsemisen ja kvantifioinnin yhdessä näytteessä. Tämän tekniikan suorittamiseksi mikropallot tai helmet päällystetään sieppausvasta-aineilla, jotka ovat spesifisiä eri sytokiineille. Näitä helmiä inkuboidaan sitten näytteen kanssa, joka sisältää kiinnostavia sytokiineja, jolloin jokainen sytokiini voi sitoutua vastaavaan sieppausvasta-aineeseensa helmen pinnalla. Havaitseminen saavutetaan lisäämällä fluoresoivasti leimattuja detektiovasta-aineita, jotka sitoutuvat siepattuihin sytokiineihin, mikä mahdollistaa fluoresenssin intensiteetin perusteella tapahtuvan kvantifioinnin käyttämällä virtaussytometriä tai vastaavaa instrumenttia. Kattava neurokognitiivinen arviointi suoritetaan käyttämällä ikään sopivaa Weschlerin älykkyysasteikkoa tai NIMHANS Neuropsychology -akkua, ACE 3, MOCA, FAB. Globaalit pisteet ja muut aliverkkotunnukset, kuten sanallinen osamäärä (VQ) ja suorituskykyosamäärä (PQ), saadaan tavallisen käytännön mukaisesti. Neurokognitiiviset testit suoritetaan ennen sädehoitoa (perustaso), 6 kuukautta, 1 vuosi sädehoidon päättymisen jälkeen ja sen jälkeen vuosittain. Potilaita hoidetaan (sädehoito, kemoterapia) normaalin käytännön mukaisesti ja niitä seurataan 3–6 kuukauden välein hoidon päättymisen jälkeen vakioprotokollan mukaisesti sekä säännöllistä kuvantamista.