Systémové biomarkery pro predikci radiačně indukovaného neurokognitivního poklesu (BIO-RIN)

Požadavek by byl (přibližně 13 ml) vzorku periferní krve před zahájením radioterapie (kdykoli bude k dispozici předoperační odběr vzorků krve). Spolu s tímto základním vzorkem bude také odebírán vzorek krve týdně v průběhu frakcionovaného ozařování (3 ml periferní krve týdně po dobu 6–7 týdnů) a poté 1 měsíc po dokončení ozařování a pravidelně v pravidelných intervalech (každých 6–12 měsíců). při kontrolních návštěvách (cca 13ml krve). Biomarkery a zánětlivé panely budou testovány pomocí multiplexních souprav. Sériové krevní markery neurozánětu (včetně IL-6, IL-1β, IL-4, IL-10, IL-11, IL-12, TNF-α, IFN-ϒ, GM-CSF, YKL-40, TGB-β , CCL8, ApoJ, ApoE nebo ApoA protein s dalšími neuronovými značkami jako Ap-42, Ap-40, BDNF, pNF-H, tau), poškození DNA jako p53-vazebný protein 1, gama histonový protein z rodiny H2A (g-H2AX), buněčná aktivace a poškození jako vaskulární endoteliální růstový faktor (VEGF), vaskulární buněčná adhezní molekula Mezibuněčná adheze molekula 1 (ICAM-1). Vzorky plazmy budou zpracovány pomocí perličkového testu založeného na průtokovém cytometru. Tato metoda je nejvhodnější pro naši detekci zánětlivých panelů, protože je její klíčová v imunologii a klinickém výzkumu pro její schopnost hodnotit více cytokinů současně z omezených objemů vzorků, což poskytuje komplexní profil imunitních odpovědí v různých stavech, jako je zánět. To nám nabídne vysokou citlivost, specificitu a účinnost s omezeným počtem vzorků, které budeme shromažďovat. Tato metoda je známá jako výkonný nástroj pro objevování biomarkerů, monitorování onemocnění a pochopení komplexních imunitních reakcí. V tomto testu zahrnuje multiplexování cytokinů pomocí metod seskupení kuliček současnou detekci a kvantifikaci více cytokinů v jediném vzorku. K provedení této techniky budou mikrokuličky nebo kuličky potaženy záchytnými protilátkami specifickými pro různé cytokiny. Tyto kuličky pak budou inkubovány se vzorkem obsahujícím požadované cytokiny, což umožní každému cytokinu vázat se na jeho odpovídající záchytnou protilátku na povrchu kuliček. Detekce bude dosaženo přidáním fluorescenčně značených detekčních protilátek, které se navážou na zachycené cytokiny, a umožní tak kvantifikaci na základě intenzity fluorescence pomocí průtokového cytometru nebo podobného přístroje. Komplexní neurokognitivní hodnocení bude provedeno pomocí Weschlerovy inteligenční škály odpovídající věku nebo NIMHANS Neuropsychologické baterie, ACE 3, MOCA, FAB. Globální skóre a další subdomény jako verbální kvocient (VQ) a výkonnostní kvocient (PQ) budou získány podle standardní praxe. Neurokognitivní testy budou prováděny před radioterapií (základní stav), 6 měsíců, 1 rok po ukončení radioterapie a poté každoročně. Pacienti podstoupí léčbu (ozařování, chemoterapii) podle standardní praxe a budou sledováni každých 3-6 měsíců po ukončení léčby podle standardních protokolů spolu s periodickým snímkováním.