Biomarcatori sistemici per prevedere il declino neurocognitivo indotto dalle radiazioni (BIO-RIN)

Il fabbisogno sarebbe (circa 13 ml) di campione di sangue periferico prima di iniziare la radioterapia (quando disponibili verranno raccolti campioni di sangue preoperatorio). Insieme a questo campione di base, verrà raccolto anche un campione di sangue settimanalmente durante il corso della radiazione frazionata (3 ml di sangue periferico settimanalmente per 6-7 settimane) e successivamente, 1 mese dopo il completamento della radioterapia e periodicamente a intervalli regolari (ogni 6-12 mesi) durante le visite di controllo (circa 13 ml di sangue). I biomarcatori e i pannelli infiammatori verranno testati utilizzando kit di multiplexing. Marcatori ematici seriali di neuroinfiammazione (inclusi IL-6, IL-1β, IL-4, IL-10, IL-11, IL-12, TNF-α, IFN-ϒ, GM-CSF, YKL-40, TGB-β , CCL8, ApoJ, ApoE o proteina ApoA con marcatori neuronali aggiuntivi come Aβ-42, Aβ-40, BDNF, pNF-H, tau), danni al DNA come la proteina legante p53 1, proteina gamma istonica della famiglia H2A (g-H2AX), attivazione cellulare e danni come il fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF), molecola di adesione cellulare vascolare, molecola di adesione intercellulare 1 (ICAM-1) ). I campioni di plasma verranno elaborati utilizzando il test delle sfere basato sul citometro a flusso. Questo metodo è più adatto per il rilevamento del nostro pannello infiammatorio poiché è cruciale nell'immunologia e nella ricerca clinica per la sua capacità di valutare più citochine contemporaneamente da volumi di campione limitati, fornendo un profilo completo delle risposte immunitarie in varie condizioni come l'infiammazione. Questo ci offrirà elevata sensibilità, specificità ed efficienza con il numero limitato di campioni che raccoglieremo. Questo metodo è noto per essere un potente strumento per la scoperta di biomarcatori, il monitoraggio delle malattie e la comprensione delle risposte immunitarie complesse. In questo test il multiplexing di citochine tramite metodi di array di sfere prevede il rilevamento e la quantificazione simultanei di più citochine in un singolo campione. Per eseguire questa tecnica, microsfere o sfere saranno rivestite con anticorpi di cattura specifici per diverse citochine. Queste sfere verranno quindi incubate con il campione contenente le citochine di interesse, consentendo a ciascuna citochina di legarsi al corrispondente anticorpo di cattura sulla superficie delle sfere. Il rilevamento sarà ottenuto aggiungendo anticorpi di rilevamento marcati con fluorescenza che si legheranno alle citochine catturate, consentendo così la quantificazione basata sull'intensità della fluorescenza utilizzando un citometro a flusso o uno strumento simile. Verrà condotta una valutazione neurocognitiva completa utilizzando la scala di intelligenza di Weschler adeguata all'età o la batteria di neuropsicologia NIMHANS, verranno condotti ACE 3, MOCA, FAB. I punteggi globali e altri sottodomini come il quoziente verbale (VQ) e il quoziente di prestazione (PQ) saranno ottenuti secondo la pratica standard. I test neurocognitivi verranno eseguiti prima della radioterapia (basale), 6 mesi, 1 anno dopo il completamento della radioterapia e successivamente ogni anno. I pazienti saranno sottoposti a trattamento (radioterapia, chemioterapia) secondo la pratica standard e seguiti ogni 3-6 mesi dopo il completamento del trattamento secondo i protocolli standard insieme all'imaging periodico.