Biomarkery ogólnoustrojowe do przewidywania spadku funkcji neurokognitywnych wywołanego promieniowaniem (BIO-RIN)

Wymagane będzie (około 13 ml) próbki krwi obwodowej przed rozpoczęciem radioterapii (w miarę możliwości pobierane będą próbki krwi przedoperacyjnej). Oprócz tej próbki podstawowej, co tydzień w trakcie radioterapii frakcjonowanej (3 ml krwi obwodowej tygodniowo przez 6-7 tygodni) oraz później, 1 miesiąc po zakończeniu radioterapii oraz okresowo w regularnych odstępach czasu (co 6-12 miesięcy), pobierana będzie również próbka krwi podczas wizyt kontrolnych (około 13ml krwi). Biomarkery i panele zapalne zostaną przetestowane przy użyciu zestawów multipleksujących. Seryjne markery zapalenia układu nerwowego (w tym IL-6, IL-1β, IL-4, IL-10, IL-11, IL-12, TNF-α, IFN-ϒ, GM-CSF, YKL-40, TGB-β , CCL8, ApoJ, ApoE lub białko ApoA z dodatkowymi znacznikami neuronowymi, takimi jak Aβ-42, Aβ-40, BDNF, pNF-H, tau), uszkodzenia DNA, takie jak białko wiążące p53 1, białko histonowe gamma z rodziny H2A (g-H2AX), aktywacja i uszkodzenie komórek, takie jak czynnik wzrostu śródbłonka naczyniowego (VEGF), cząsteczka adhezyjna komórek naczyniowych Adhezja międzykomórkowa cząsteczka 1 (ICAM-1). Próbki osocza zostaną poddane obróbce przy użyciu testu kulkowego opartego na cytometrze przepływowym. Metoda ta najlepiej nadaje się do wykrywania naszego panelu zapalnego, ponieważ ma kluczowe znaczenie w immunologii i badaniach klinicznych ze względu na jej zdolność do jednoczesnej oceny wielu cytokin na podstawie ograniczonych objętości próbek, zapewniając kompleksowy profil odpowiedzi immunologicznych w różnych stanach, takich jak zapalenie. Zapewni to wysoką czułość, swoistość i skuteczność przy ograniczonej liczbie próbek, które będziemy zbierać. Metoda ta jest uważana za potężne narzędzie do odkrywania biomarkerów, monitorowania chorób i zrozumienia złożonych odpowiedzi immunologicznych. W tym teście multipleksowanie cytokin za pomocą metod układu perełek obejmuje jednoczesne wykrywanie i oznaczanie ilościowe wielu cytokin w pojedynczej próbce. Aby wykonać tę technikę, mikrosfery lub kulki zostaną pokryte przeciwciałami wychwytującymi specyficznymi dla różnych cytokin. Perełki te będą następnie inkubowane z próbką zawierającą interesujące cytokiny, umożliwiając każdej cytokinie związanie się z odpowiadającym jej przeciwciałem wychwytującym na powierzchni kulki. Wykrywanie zostanie osiągnięte poprzez dodanie znakowanych fluorescencyjnie przeciwciał wykrywających, które będą wiązać się z wychwyconymi cytokinami, umożliwiając w ten sposób ocenę ilościową na podstawie intensywności fluorescencji przy użyciu cytometru przepływowego lub podobnego instrumentu. Przeprowadzona zostanie kompleksowa ocena neurokognitywna z wykorzystaniem dostosowanej do wieku skali inteligencji Weschlera lub baterii NIMHANS Neuropsychology, ACE 3, MOCA, FAB. Wyniki globalne i inne poddomeny, takie jak iloraz werbalny (VQ) i iloraz wydajności (PQ), zostaną uzyskane zgodnie ze standardową praktyką. Testy neurokognitywne będą wykonywane przed radioterapią (wyjściowo), 6 miesięcy, 1 rok po zakończeniu radioterapii, a następnie co roku. Pacjenci będą poddawani leczeniu (naświetlaniu, chemioterapii) zgodnie ze standardową praktyką i kontrolom co 3-6 miesięcy po zakończeniu leczenia zgodnie ze standardowymi protokołami wraz z okresowymi badaniami obrazowymi.