Biomarcadores sistêmicos para prever declínio neurocognitivo induzido por radiação (BIO-RIN)

A exigência seria (aproximadamente 13ml) de amostra de sangue periférico antes de iniciar a radioterapia (sempre que disponível, serão coletadas amostras de sangue pré-operatórias). Junto com esta amostra de linha de base, uma amostra de sangue também será coletada semanalmente durante o curso da radiação fracionada (3ml de sangue periférico semanalmente durante 6-7 semanas) e posteriormente, 1 mês após o término da radiação e periodicamente em intervalos regulares (a cada 6-12 meses) durante as consultas de acompanhamento (aproximadamente 13ml de sangue). Os biomarcadores e painéis inflamatórios serão testados em kits de multiplexação. Marcadores sanguíneos seriados de neuroinflamação (incluindo IL-6, IL-1β, IL-4, IL-10, IL-11, IL-12, TNF-α, IFN-ϒ, GM-CSF, YKL-40, TGB-β , proteína CCL8, ApoJ, ApoE ou ApoA com marcas neuronais adicionais como Aβ-42, Aβ-40, BDNF, pNF-H, tau), danos ao DNA como proteína de ligação a p53 1, proteína gama histona da família H2A (g-H2AX), ativação celular e danos como fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), molécula de adesão celular vascular Molécula de adesão intercelular 1 (ICAM-1). As amostras de plasma serão processadas usando ensaio de esferas baseado em citômetro de fluxo. Este método é mais adequado para a detecção do nosso painel inflamatório, pois é crucial em imunologia e pesquisa clínica por sua capacidade de avaliar múltiplas citocinas simultaneamente a partir de volumes limitados de amostras, fornecendo um perfil abrangente de respostas imunes em diversas condições, como inflamação. Isso nos oferecerá alta sensibilidade, especificidade e eficiência com o número limitado de amostras que iremos coletar. Este método é conhecido por ser uma ferramenta poderosa para descoberta de biomarcadores, monitoramento de doenças e compreensão de respostas imunológicas complexas. Neste ensaio, a multiplexação de citocinas através de métodos de arranjo de esferas envolve a detecção e quantificação simultânea de múltiplas citocinas em uma única amostra. Para realizar esta técnica, microesferas ou esferas serão revestidas com anticorpos de captura específicos para diferentes citocinas. Estas esferas serão então incubadas com a amostra contendo citocinas de interesse, permitindo que cada citocina se ligue ao seu anticorpo de captura correspondente na superfície da esfera. A detecção será alcançada adicionando anticorpos de detecção marcados com fluorescência que se ligarão às citocinas capturadas, permitindo assim a quantificação com base na intensidade de fluorescência usando um citômetro de fluxo ou instrumento similar. A avaliação neurocognitiva abrangente será conduzida usando a escala de inteligência de Weschler apropriada para a idade ou bateria de neuropsicologia NIMHANS, ACE 3, MOCA, FAB será conduzida. As pontuações globais e outros subdomínios como quociente verbal (VQ) e quociente de desempenho (PQ) serão obtidos de acordo com a prática padrão. Os testes neurocognitivos serão realizados pré-radioterapia (linha de base), 6 meses, 1 ano após o término da radioterapia e posteriormente anualmente. Os pacientes serão submetidos a tratamento (radiação, quimioterapia) de acordo com a prática padrão e acompanhados a cada 3-6 meses após a conclusão do tratamento de acordo com os protocolos padrão, juntamente com imagens periódicas.