Essai de phase I/II de la gemcitabine en perfusion en association avec le carboplatine dans le carcinome non à petites cellules de Chemonaive

Objectifs d'étude:

1. comparer le taux de réponse du carboplatine et de la gemcitabine en perfusion à débit constant au taux de réponse de la gemcitabine administrée en perfusion standard de 30 minutes
2. pour comparer l'expérience de toxicité dans les deux bras
3. Comparer le délai de progression dans les deux bras de l'étude et la survie globale

4. Comparer la qualité de vie dans les deux bras de l'étude à l'aide de l'EORTC QLQ-C30 et du QLQ-LC13.

   Critère d'intégration

   • NSCLC histologiquement ou cytologiquement confirmé.
   • Stade IIIB inadapté aux radiations radicalaires (par ex. avec épanchement malin prouvé cytologiquement) ou maladie de stade IV telle que définie par les critères de l'AJCC (voir annexe 1).
   • Statut de performance de Karnofsky 70 % ou supérieur (voir annexe 2).
   • Présence d'au moins une lésion indicatrice bidimensionnelle ou unidimensionnelle mesurable, non-SNC, définie par une étude radiologique ou un examen physique.
   • Aucune chimiothérapie antérieure pour une maladie avancée. Une chimiothérapie néoadjuvante ou adjuvante antérieure, ou une chimiothérapie administrée en même temps qu'une radiothérapie pour une maladie non métastatique, est autorisée si la dernière dose a été administrée 6 mois ou plus avant l'entrée dans l'étude.
   • Les patients atteints d'une maladie récurrente après une chirurgie primaire et/ou une radiothérapie seront éligibles.
   • Pour les patients ayant déjà subi une radiothérapie, la ou les lésions indicatrices ne doivent pas se trouver dans le champ de rayonnement précédent. La dernière dose de radiothérapie doit avoir lieu au moins 3 semaines avant l'entrée dans l'étude. La radiothérapie totale reçue ne doit pas dépasser 30 % de la moelle osseuse.
   • Critères de laboratoire de dépistage :

   Numération leucocytaire > 3500/microl Neutrophiles > 2000/microl Numération plaquettaire > 100 000/microl Hémoglobine > 9 g/dl (transfusion autorisée)

   Créatinine sérique < 133 micromol/l, ou clairance de la créatinine > 30 ml/min, selon la formule de Cockcroft (voir rubrique 5.1.1)

   Bilirubine < 1,5 x limite supérieure de la normale ALT/AST < 2 x limite supérieure de la normale en l'absence de métastases hépatiques < 5 x limite supérieure de la normale en cas de métastases hépatiques

   • Âgé de 18 ans et plus.
   • Espérance de vie > 3 mois.
   • Consentement éclairé écrit.

   4.2 Critères d'exclusion

   Les conditions suivantes rendront les patients inéligibles pour participer à cette étude :

   • Patients avec seulement une maladie évaluable.
   • Infection active incontrôlée.
   • Femmes enceintes ou allaitantes.
   • Femmes en âge de procréer qui ne veulent pas éviter une grossesse, pendant la durée de l'étude.
   • Présence de conditions médicales sous-jacentes qui, de l'avis des enquêteurs, rendraient le patient inapte au traitement.
   • Tumeurs malignes concomitantes ou tumeurs malignes antérieures autres que le NSCLC au cours des 5 dernières années, à l'exception d'un carcinome basocellulaire ou épidermoïde de la peau, d'un carcinome in situ du col de l'utérus ou d'un cancer de la prostate de bas grade de stade A correctement traité.
   • Patients atteints de métastases du SNC et/ou leptoméningées ; à moins d'être asymptomatique et de ne pas recevoir de corticothérapie.

   4.3 Critères d'inclusion et d'exclusion des patients en phase I

   Les critères d'exclusion sont les mêmes que ci-dessus.

   Les critères d'inclusion sont les mêmes que ci-dessus à l'exception des groupes de patients suivants, qui sont autorisés dans l'étude de phase I :

   • Patients atteints d'une maladie évaluable uniquement (sans lésions mesurables).
   • Patients avec une (et une seule) ligne de chimiothérapie pour le NSCLC avancé, à l'exclusion des patients ayant reçu au préalable du platine et/ou de la gemcitabine.
   • Patients présentant des lésions indicatrices dans le champ de rayonnement précédent.

   Mesurabilité des lésions indicatrices

   • Mesurable : La lésion peut être mesurée avec précision dans au moins une dimension (diamètre le plus long à enregistrer) comme > 20 mm avec des techniques conventionnelles ou comme > 10 mm avec un scanner spiralé.
   • Non mesurables : toutes les autres lésions, y compris les petites lésions (diamètre le plus long < 20 mm avec les techniques conventionnelles ou < 10 mm avec le scanner spiralé) et les lésions réellement non mesurables. Les lésions considérées comme véritablement non mesurables sont les suivantes : lésions osseuses, maladie leptoméningée, ascite, pleurale/cutanée/pulmonaire, masses abdominales non confirmées et suivies par des techniques d'imagerie et lésions kystiques.
   • Lésions cibles : Toutes les lésions mesurables jusqu'à un maximum de 5 lésions par organe et 10 lésions au total représentatives de tous les organes impliqués doivent être identifiées comme lésions cibles et être enregistrées et mesurées au départ. Les lésions cibles doivent être sélectionnées en fonction de leur taille (lésion avec le diamètre le plus long) et de leur aptitude à des mesures précises (soit par des techniques d'imagerie, soit cliniquement). Une somme du diamètre le plus long (LD) pour toutes les lésions cibles sera calculée et rapportée comme la somme de base LD. La somme de base LD est utilisée comme référence pour caractériser la réponse tumorale objective. S'il y a > 10 lésions mesurables, celles qui ne sont pas sélectionnées comme lésions cibles seront considérées avec la maladie non mesurable comme des lésions non cibles.
   • Lésions non cibles : toutes les lésions non mesurables (ou sites de la maladie) plus toutes les lésions mesurables au-delà des 10 listes de lésions cibles. Les mesures ne sont pas nécessaires, mais ces lésions doivent être notées au départ et doivent être suivies comme « présentes » ou « absentes ».
   • Toute mesure tumorale reposant uniquement sur un examen physique doit être vérifiée par un deuxième médecin.
   • La même méthode d'imagerie diagnostique doit être utilisée tout au long de l'étude pour évaluer les lésions.

5. PLAN DE TRAITEMENT

   5.1 Étude de phase I

   5.1.1 Carboplatine

   La dose initiale de carboplatine est administrée à dose fixe à une ASC cible de 5 sur 1 heure le jour 1 dans les deux bras de l'étude. Le carboplatine sera administré avant la gemcitabine chez tous les patients. La dose est répétée tous les 21 jours et sera calculée selon la formule de Calvert :

   Dose de carboplatine (mg) = [débit de filtration glomérulaire (DFG) calculé + 25] x 5

   Le GFR sera calculé selon la formule de Cockroft-Gault :

   GFR (ml/min) = (140 - âge) x poids corporel (en kg) / 0,81 x créatinine sérique (micromol/l)

   Pour les femmes, le facteur de correction est de 0,85 (x GFR calculé)

   5.1.2 Gemcitabine en perfusion

   La gemcitabine en perfusion est administrée à un débit constant de 10 mg/m2 par minute chez tous les patients aux jours 1 et 8, le cycle est répété tous les 21 jours. L'augmentation de la dose est obtenue en augmentant la durée de la perfusion. La dose totale de gemcitabine est reconstituée dans 500 ml de solution saline normale et perfusée par voie veineuse périphérique ou centrale.

   5.2.1 Cours de traitement

   Avant de commencer le traitement, les patients éligibles seront randomisés pour recevoir de la gemcitabine administrée soit en perfusion courte standard de 30 minutes, soit en perfusion prolongée à débit constant sur la durée déterminée dans l'étude de phase I. Tous les patients des deux bras recevront du carboplatine à une dose d'AUC de 5 sur 1 heure.

   Bras standard

   Carboplatine ASC de 5 sur 1 heure, jour 1, suivie de Gemcitabine 1000 mg/m2 sur 30 min, jours 1 et 8 Le cycle est répété tous les 21 jours

   Bras d'étude

   Carboplatine ASC de 5 sur 1 heure, jour 1, suivie de Gemcitabine 10 mg/m2/min à MTD, jours 1 et 8 Le cycle est répété tous les 21 jours

   Traitement de soutien

   • Tous les patients doivent recevoir des prémédications pour prévenir les nausées et les vomissements conformément à la politique locale.
   • Aucun facteur de croissance prophylactique n'est autorisé.
   • Le facteur de croissance n'est autorisé que dans le cadre de sauvetage, par exemple. neutropénie prolongée de grade 4 pendant plus de 7 jours, ou pour une neutropénie fébrile.

   5.2.2 Dosage au cycle 2 et aux cycles suivants

   Le prochain cycle de traitement commencera comme prévu, à condition que

   • Il n'y a aucune preuve de progression tumorale

   • Neutrophiles ~ 2 x 109/L
   • Plaquettes ~ 100 000 x 109/l
   • Absence de toxicité non hématologique de grade 2 ou supérieur

   5.2.3 Modifications posologiques

   5.2.3.1 Règles générales

   • Aucune augmentation de dose intra-patient n'est autorisée.
   • Tout patient nécessitant une réduction de dose ne sera éligible à aucune augmentation de dose pour le reste de l'étude.
   • Le traitement peut être retardé jusqu'au jour 35 pour laisser suffisamment de temps au patient pour se remettre de la toxicité liée au traitement. Tout patient qui ne peut pas passer au cycle suivant au jour 35 sera retiré de l'étude.

   5.2.3.2 Modifications de dose en fonction de la toxicité hématologique

   Ajustement basé sur la numération au jour 8 Plaquettes (x 109/l) NAN (x 109/l) Action > 75 et > 1,0 Procéder avec une dose au jour 8 > 75 et 0,5 - 1,0 Procéder avec une dose réduite 50 - 75 et ~ 0,5 Procéder avec une dose réduite dose < 50 et/ou < 0,5 Omettre la dose Lorsque la dose du jour 8 est réduite, la même dose réduite sera utilisée pour le cycle suivant.

   Lorsque la dose du jour 8 est omise, le cycle est terminé et le cycle suivant sera programmé le jour 22, avec une réduction de dose.

   Ajustement posologique en fonction du nadir Nombre Plaquettes (x 109/l) NAN (x 109/l) Action ~ 25 sans saignement et ~ 0,5 ou < 0,5 pendant < 7 jours Aucun changement < 25 ou < 50 avec saignement et/ou < 0,5 pendant > 7 jours Réduction de dose (voir ci-dessous) Tout et < 0,5 et fièvre Réduction de dose Récurrence de l'un des éléments ci-dessus après 2 réductions de dose Hors étude

   Ajustement basé sur la numération au jour 22 Plaquettes (x 109/l) NAN (x 109/l) Action

   ~ 100 et > 2,0 Procéder au cycle suivant < 100 et/ou < 2,0 Retarder 1 semaine Retard maximum de 2 semaines (le cycle suivant doit commencer au jour 35 pour rester dans l'étude)

   Schéma de réduction de dose Première réduction Deuxième réduction Troisième réduction Carboplatine ASC 4,5 ASC 4,0 Hors étude Gemcitabine (bras standard) 750 mg/m2 (1000 mg/m2 x 75 %) 500 mg/m2 (1000 mg/m2 x 50 %) Hors étude Perfusion Gemcitabine 75 % de la durée de la phase II 50 % de la durée de la perfusion précédente Hors étude

   5.2.3.3 Modifications de dose pour toxicité non hématologique

   Toute toxicité non hématologique de grade 3 ou 4, à l'exception des nausées et des vomissements, de la fatigue et de la transaminite réversible, exclura le patient de l'étude.

   La toxicité non hématologique doit être inférieure au grade 2 avant de passer au cycle suivant. S'ils sont supérieurs au grade 2, le traitement est retardé d'une semaine. Le traitement peut être retardé de 2 semaines maximum.

   5.2.4 Durée du traitement

   Les patients répondeurs recevront jusqu'à six cycles de chimiothérapie.

   Après la fin ou l'arrêt du traitement, les patients peuvent continuer à recevoir un traitement supplémentaire à la discrétion de leur médecin.

   Évaluations de dépistage

   Les examens de dépistage suivants doivent être effectués dans les 28 jours suivant le jour 1 du cycle 1 :

   • Stadification complète et documentation de l'état de la tumeur - radiographie pulmonaire de base, tomodensitométrie du thorax, scintigraphie de l'abdomen, du cerveau et des os si indiqué cliniquement.

   Les évaluations de dépistage et les investigations suivantes doivent être effectuées dans les 14 jours suivant la première dose de traitement et comprennent les éléments suivants :

   • Consentement

   • Antécédents médicaux complets, y compris les détails des symptômes, les traitements antérieurs, toute toxicité résiduelle, les conditions médicales concomitantes et les médicaments

   • Les examens physiques, y compris la documentation de toutes les lésions palpables, les signes vitaux, le poids corporel et la taille, et le KPS.

   • Documentation des lésions indicatrices pour inclure la date de l'évaluation, la description du site de la lésion, les dimensions et le type d'étude diagnostique pour suivre la lésion. La même méthode de diagnostic doit être utilisée tout au long de l'étude pour évaluer une lésion.

   Les tests suivants doivent être effectués dans les 7 jours suivant la première dose de traitement et comprennent les éléments suivants :

   • Numération sanguine complète
   • Électrolytes sériques et enzymes hépatiques, calcium et magnésium totaux
   • Test de grossesse sérique, le cas échéant
   • Analyse d'urine sur bandelette - si la bandelette est positive pour les protéines ou le sang, un examen microscopique complet est requis

   8.3 Évaluation pendant le traitement

   Avant le jour 1 de chaque cycle

   • Antécédents et examen physique

   • Évaluer et enregistrer les toxicités du cours précédent. Attribuez des degrés de toxicité appropriés (voir l'annexe 4).

   • Notez tous les médicaments pris depuis le dernier cycle.

   • Mesure du poids pour recalculer la surface corporelle et la clairance de la créatinine

   • Évaluation des symptômes de la maladie (le questionnaire sur la qualité de vie doit être remis et rempli par le patient avant l'évaluation par l'investigateur).

   • Évaluation de l'état des performances
   • Formule sanguine complète, électrolytes et enzymes hépatiques (si les taux au jour 15 sont anormaux).
   • Analyse de bandelette urinaire, si le résultat de base est anormal
   • Les mesures cliniques de la tumeur doivent être obtenues avant chaque cycle de traitement
   • Les mesures radiographiques de la tumeur doivent être obtenues tous les 2 cycles de traitement.
   • Modifier la dose du cycle suivant si nécessaire (voir rubrique 5.2.3).

   Évaluation du jour 8

   • Numération sanguine complète

   Évaluation du jour 15

   • Numération sanguine complète, électrolytes et enzymes hépatiques

   8.4 Évaluation de la réponse

   Les patients seront évaluables pour la réponse après 2 cycles de traitement. Les mesures cliniques de la tumeur doivent être effectuées avant chaque cycle de traitement. Les mesures radiographiques de la tumeur doivent être obtenues tous les 2 cycles de traitement.

   Si un patient répond aux critères de réponse (voir section 7) pour la RC, la RP ou la SD pour la première fois, une autre évaluation clinique et radiographique de la tumeur sera effectuée 4 semaines ou plus plus tard pour documenter que la réponse a duré au moins 4 semaines.

   L'évaluation clinique de la tumeur après chaque cycle et la réponse tumorale radiographique après tous les 2 cycles se poursuivront jusqu'à la fin du traitement ou le retrait du patient.

   8.5 Suivi post-traitement

   Les patients répondeurs seront revus tous les 2 mois après la fin de la chimiothérapie. L'évaluation clinique de la tumeur sera effectuée tous les 2 mois. Une évaluation radiographique de la tumeur sera effectuée tous les 4 mois. Celles-ci se poursuivront jusqu'à ce que la progression de la maladie soit documentée.

   Les patients qui n'ont jamais eu de réponse et les patients dont la maladie a progressé après une réponse précédemment documentée seront suivis tous les 3 mois pour les données de survie.

9. FIN DU TRAITEMENT ET ARRÊT

Un patient sera considéré comme ayant terminé le traitement si :

• Le patient a terminé 6 cycles de traitement.
• Le patient a une RC confirmée ou une RP confirmée et a reçu au moins 4 cycles de traitement et l'investigateur ne pense pas qu'un traitement supplémentaire soit indiqué.
• Le patient a maintenu un statut SD pendant au moins 8 semaines de traitement et a reçu au moins 2 cycles de traitement.
• Le patient a une MP après avoir terminé au moins un cycle complet de traitement.
• Un patient est retiré de l'étude en raison d'une toxicité inacceptable.

Les patients peuvent être retirés du traitement pour les raisons suivantes :

• Expérience indésirable, y compris maladie intercurrente ou toxicité inacceptable.
• Si le médecin traitant pense qu'un changement de traitement serait dans le meilleur intérêt du patient.
• Violation du protocole (y compris non-conformité).
• Retrait du patient à sa demande, pour des raisons autres que celles ci-dessus.
• Perdu de vue.

Tous les patients seront suivis pour l'état de la maladie et la survie jusqu'au décès. dix. ÉVALUATION DE LA QUALITÉ DE VIE (QV)

Il est essentiel d'expliquer au patient que l'évaluation de la qualité de vie est une partie importante de l'essai et qu'il faut répondre à toutes les sections même si le patient estime qu'elles ne sont pas pertinentes. Il convient de souligner que le fait de remplir ces formulaires permet aux médecins d'en savoir plus sur les effets du traitement sur le bien-être des patients.

Une personne de contact nommée autre que le clinicien responsable prenant en charge le patient dans le cadre de l'essai, doit être désignée pour prendre la responsabilité de l'administration, de la collecte et de la vérification des questionnaires EORTC QLQ-C30 et QLQ-LC13 remplis. Le questionnaire doit être rempli avant la consultation avec le clinicien, conformément aux directives de l'EORTC pour l'évaluation de la qualité de vie. Ils doivent être vérifiés pour s'assurer que toutes les questions ont été répondues ; si nécessaire, revenez immédiatement vers le patient et demandez-lui de compléter les éléments manquants. Si une évaluation est manquée en raison d'un échec administratif, le patient doit être contacté par téléphone ou par courrier et un arrangement doit être pris pour que le questionnaire soit rempli dans la semaine suivant l'évaluation prévue.

Le questionnaire peut être rempli par le patient s'il est capable de lire et de comprendre la langue du questionnaire. Sinon, la personne désignée pour administrer la QoL doit lire les questions telles qu'elles sont écrites, dans la langue que le patient comprend, et enregistrer la réponse à chaque question sans préjuger de sa réponse. Le mode de livraison doit être noté dans le questionnaire.

11. PROCÉDURE DE RANDOMISATION

Les participants à l'étude seront répartis au hasard pour recevoir soit de la gemcitabine administrée en perfusion conventionnelle de 30 minutes, soit une perfusion prolongée, toutes deux en association avec du carboplatine.

11.1 Stratification

La randomisation stratifiée sera effectuée en utilisant la méthode de minimisation basée sur les facteurs suivants :

(i) Centre (National University Hospital, Sydney Cancer Centre, Johns Hopkins-NUH International Medical Center) (ii) Indice de performance de Karnofsky (90 - 100 % contre 70 - 80 %) (iii) Stade de la maladie (IIIB contre IV)

11.2 Inscription

Les patients seront inscrits à l'essai par un appel téléphonique à l'unité de recherche sur les essais cliniques et l'épidémiologie (CTERU) du Conseil national de la recherche médicale (NMRC), Singapour (+65 220-1292) entre 8 h 30 et 17 h 30 du lundi au vendredi, et de 8 h 30 à 12h30 le samedi (heure de Singapour), ou par fax (+65 220-1485), en précisant que le patient doit être inscrit à l'essai CTRG L08 ou SQLU02.

Un consentement écrit éclairé pour participer à l'étude doit être obtenu avant la randomisation. Tous les critères d'éligibilité et le formulaire de consentement seront vérifiés, et les facteurs de stratification indiqués avant l'attribution du traitement. Le patient sera randomisé pour recevoir de la gemcitabine en perfusion longue (L) ou de la gemcitabine en perfusion courte de 30 minutes (S), et un numéro d'essai lui sera attribué. La conception impliquera une répartition égale des patients entre les deux traitements. Une télécopie de confirmation sera envoyée à l'investigateur.

12. CONSIDÉRATIONS STATISTIQUES

Le calcul de la taille de l'échantillon est effectué sur la base du critère de la théorie de la sélection statistique tel que détaillé dans Simon et al (62) et Gibbons et al (63). En supposant une probabilité de 90 % de sélectionner correctement le meilleur traitement et en anticipant un taux de réponse de base de 40 %, puis pour détecter une supériorité de 15 % du meilleur traitement sur l'autre, une taille d'essai de 37 patients par bras de traitement serait nécessaire. L'objectif total de recrutement serait donc de 74 patients.

13. ANALYSES STATISTIQUES

L'analyse statistique de tous les critères d'évaluation de l'étude sera effectuée sur la base de l'intention de traiter. En cas de perdu de vue, les patients seront toujours inclus dans l'analyse pour la durée de leur observation. La comparabilité inhérente des résultats dans cette conception randomisée de phase II utilisant la théorie de la sélection statistique garantit que les deux traitements peuvent être classés de manière fiable lorsque de grandes différences sont obtenues.

La meilleure réponse sera utilisée dans l'analyse de la réponse tumorale objective. Dans le cas d'un événement indésirable, où plusieurs événements du même type se sont produits chez un patient, seul le grade maximal sera documenté pour l'analyse. Les taux de réponse tumorale et les toxicités entre les groupes de traitement seront comparés de manière descriptive à l'aide d'estimations de proportions.

La durée de réponse et le délai de réponse pour les patients répondeurs seront évalués à l'aide de statistiques descriptives appropriées. L'évaluation de la survie sans progression et de la survie globale sera réalisée selon la technique de Kaplan-Meier au recul d'un an. En cas de survie sans progression, les patients dont la maladie n'a pas progressé seront censurés à la dernière date connue pour être en vie. De même, l'analyse de la survie globale censure les patients perdus de vue ou qui sont restés en vie à la dernière date connue pour être en vie.

Pour chaque dimension de la qualité de vie, l'évolution des scores dans le temps sera comparée entre les bras de traitement au moyen d'une représentation graphique appropriée ou de statistiques descriptives.

Aucune analyse intermédiaire n'est prévue pour cet essai randomisé de phase II.

14. CONSIDÉRATIONS ÉTHIQUES

14.1 CISR/Comité d'éthique

Avant le début de l'étude, le protocole sera soumis pour examen et approbation par l'hôpital et le comité de recherche et d'éthique du ministère de la Santé ou un groupe équivalent. L'approbation du protocole et le consentement éclairé doivent être obtenus.

14.2 Informations patient

Le médecin responsable informera le patient sur le contexte et les connaissances actuelles du traitement à l'étude avec une référence particulière à l'activité et à la toxicité connues. Le patient sera informé du caractère expérimental de ce traitement et en particulier du processus de randomisation impliqué dans cette étude. Le patient sera informé de son droit de se retirer de l'étude à tout moment sans aucune pénalité quant à la poursuite des soins dans cet établissement et par les mêmes médecins qu'il aura choisis. Avant l'inscription, tous les patients signeront un formulaire de consentement écrit et éclairé.

14.3 Consentement éclairé

Le consentement éclairé doit répondre aux exigences de la dernière révision de la Déclaration d'Helsinki et de toutes les réglementations et directives applicables telles que les bonnes pratiques cliniques (Singapour).

L'étude sera complètement expliquée à chaque candidat potentiel et le sujet doit donner son consentement en signant et en datant le formulaire de consentement.

Le consentement doit être obtenu avant que toute procédure requise par le protocole ne soit effectuée, y compris toute procédure ne faisant pas partie des soins normaux au patient.

Niveaux plasmatiques de dFdC et de dFdU

Dix millilitres de sang seront prélevés à 0 heure (ligne de base), 10 minutes, 30 minutes, 10 minutes avant la fin de la perfusion et 30 minutes, 1 heure, 2 heures après la fin de la perfusion. Le sang sera prélevé dans des tubes de 10 ml (bouchon vert) contenant de l'héparine et 5 micromoles de tétrahydrouridine. Les tubes sont ensuite centrifugés à 3300 tr/min pendant 15 minutes et le plasma surnageant est ensuite transféré dans des tubes simples (bouchons rouges) pour un stockage immédiat à -80°C. Les échantillons seront étiquetés avec le nom du patient, le numéro d'identification, la date, l'heure exacte de l'échantillon et le numéro de protocole. Un formulaire pharmacocinétique accompagnera les échantillons de plasma au laboratoire de pharmacologie du département de pharmacologie de l'Université nationale de Singapour, c/o Prof Lee How Sung.

Les niveaux de DFdC et de dFdU dans le plasma seront mesurés en utilisant une HPLC en phase inverse, comme décrit par Grunewald (22). Brièvement, 20 microl à 50 microl de plasma sont injectés sur une colonne analytique C18 mBondapak (Waters Associates, Inc.). Les composants seront séparés avec une phase mobile constituée d'un gradient linéaire de 30 minutes commençant par la solution A à 100 % (acétate d'ammonium 0,5 M, pH = 6,8) et se terminant par la solution B à 60 % (50 % de méthanol dans de l'eau déminéralisée). Le débit est de 1,5 ml/min. Les longueurs d'onde de détection sont respectivement de 275 nm et 262 nm pour dFdC et dFdU.

16.2 Niveaux intracellulaires de dFdCTP

Des échantillons de sang seront prélevés pour doser le dFdCTP intracellulaire. Seuls 3 échantillons par patient, obtenus 10 minutes après le début et 10 minutes avant la fin de la perfusion de gemcitabine, et un en milieu de perfusion, seront dosés pour le dFdCTP.

Le plasma est d'abord séparé du sang par centrifugation à 3300 rpm pendant 20 minutes. Les cellules mononucléaires sont ensuite isolées par centrifugation en gradient de densité Ficoll-Hypaque et les désoxyribonucléosides triphosphates sont extraits avec 0,4 NHClO4, et le matériau insoluble dans l'acide est éliminé par centrifugation. Le surnageant est ensuite soigneusement neutralisé à pH 7 avec de l'hydroxyde de potassium, et le KClO4 précipité est ensuite éliminé par centrifugation. Une méthode de chromatographie liquide à haute performance échangeuse d'ions est ensuite utilisée pour séparer et quantifier le dFdCTP.

17. ADMINISTRATION DE L'ÉTUDE

17.1 Responsabilité en matière de médicaments

Des stocks de gemcitabine seront fournis par Eli Lilly à des fins d'essai, et tous ces flacons seront comptabilisés à la pharmacie du site.

17.2 Tenue des dossiers des patients

Les formulaires de rapport clinique du CTRG seront utilisés pour enregistrer les données de cette étude. Tous les formulaires de rapport clinique du patient seront faxés au bureau CTRG (+65 777-5545). Une copie du formulaire de rapport d'admissibilité de chaque patient, du formulaire de rapport de randomisation (pour la phase II), du calendrier de l'étude, des formulaires de consentement, des rapports de laboratoire et radiologiques et de l'évaluation de la qualité de vie sera conservée au bureau du CTRG. Tous les dossiers seront conservés pendant une période de 6 ans après la date de clôture de l'étude conformément aux directives GCP de Singapour