Ensaio Fase I/II de Gemcitabina Infusional em Combinação com Carboplatina em Carcinoma de Células Não Pequenas Chemonaive

Objetivos do estudo:

1. comparar a taxa de resposta de carboplatina e gencitabina em infusão de taxa constante com a taxa de resposta de gencitabina administrada na infusão padrão de 30 minutos
2. para comparar a experiência de toxicidade em ambos os braços
3. Para comparar o tempo de progressão em ambos os braços do estudo e a sobrevida global

4. Comparar a qualidade de vida em ambos os braços do estudo usando o EORTC QLQ-C30 e o QLQ-LC13.

   Critério de inclusão

   • NSCLC confirmado histologicamente ou citologicamente.
   • Estágio IIIB inadequado para radiação radical (ex. com derrame maligno comprovado citologicamente) ou doença em estágio IV, conforme definido pelos critérios AJCC (consulte o apêndice 1).
   • Status de desempenho de Karnofsky 70% ou superior (consulte o apêndice 2).
   • Presença de pelo menos uma lesão indicadora bidimensional ou unidimensionalmente mensurável, fora do SNC, definida por estudo radiológico ou exame físico.
   • Sem quimioterapia anterior para doença avançada. Quimioterapia neoadjuvante ou adjuvante anterior, ou quimioterapia administrada concomitantemente com radioterapia para doença não metastática, é permitida se a última dose foi administrada 6 meses ou mais antes da entrada no estudo.
   • Pacientes com doença recorrente após cirurgia primária e/ou radioterapia serão elegíveis.
   • Para pacientes com radioterapia anterior, a(s) lesão(ões) indicador(es) não deve(m) estar dentro do campo de radiação anterior. A última dose de radioterapia deve ser pelo menos 3 semanas antes da entrada no estudo. A radioterapia total recebida não deve ser superior a 30% da medula óssea.
   • Critérios laboratoriais de triagem:

   Contagem de leucócitos > 3.500/microl Neutrófilos > 2.000/microl Contagem de plaquetas > 100.000/microl Hemoglobina > 9 g/dl (transfusão permitida)

   Creatinina sérica < 133 micromol/l, ou depuração da creatinina > 30 ml/min, com base na fórmula de Cockcroft (ver secção 5.1.1)

   Bilirrubina < 1,5 x limite superior do normal ALT/AST < 2 x limite superior do normal se metástases hepáticas estiverem ausentes < 5 x limite superior do normal se metástases hepáticas estiverem presentes

   • Com idade igual ou superior a 18 anos.
   • Expectativa de vida > 3 meses.
   • Consentimento informado por escrito.

   4.2 Critérios de exclusão

   As seguintes condições tornarão os pacientes inelegíveis para participar deste estudo:

   • Pacientes com apenas doença avaliável.
   • Infecção ativa descontrolada.
   • Mulheres grávidas ou lactantes.
   • Mulheres com potencial para engravidar que não desejam evitar a gravidez, durante o estudo.
   • Presença de quaisquer condições médicas subjacentes que, na opinião dos investigadores, tornariam o paciente inadequado para o tratamento.
   • Malignidades concomitantes ou malignidades prévias, exceto NSCLC, nos últimos 5 anos, com exceção de carcinoma basocelular ou escamoso da pele adequadamente tratado, carcinoma in situ do colo do útero ou câncer de próstata de baixo grau em estágio A.
   • Pacientes com metástases no SNC e/ou leptomeníngeas; a menos que assintomático e não recebendo terapia com corticosteróides.

   4.3 Critérios de inclusão e exclusão para pacientes fase I

   Os critérios de exclusão são os mesmos acima.

   Os critérios de inclusão são os mesmos acima, exceto para os seguintes grupos de pacientes, que são permitidos no estudo de fase I:

   • Pacientes apenas com doença avaliável (sem lesões mensuráveis).
   • Pacientes com uma (e apenas uma) linha de quimioterapia para NSCLC avançado, excluindo pacientes que receberam platina e/ou gencitabina anteriormente.
   • Pacientes com lesões indicadoras em campo de radiação anterior.

   Mensurabilidade de lesões indicadoras

   • Mensurável: A lesão pode ser medida com precisão em pelo menos uma dimensão (maior diâmetro a ser registrado) como > 20 mm com técnicas convencionais ou > 10 mm com tomografia computadorizada espiral.
   • Não mensuráveis: Todas as outras lesões, incluindo lesões pequenas (maior diâmetro <20 mm com técnicas convencionais ou < 10 mm com tomografia computadorizada espiral) e lesões verdadeiramente não mensuráveis. As lesões consideradas verdadeiramente não mensuráveis ​​incluem: lesões ósseas, doença leptomeníngea, ascite, pleural/cutis/pulmonis, massas abdominais não confirmadas e acompanhadas por técnicas de imagem e lesões císticas.
   • Lesões-alvo: Todas as lesões mensuráveis ​​até um máximo de 5 lesões por órgão e 10 lesões no total representativas de todos os órgãos envolvidos devem ser identificadas como lesões-alvo e registradas e medidas na linha de base. As lesões-alvo devem ser selecionadas com base em seu tamanho (lesão com o maior diâmetro) e sua adequação para medições precisas (seja por técnicas de imagem ou clinicamente). Uma soma do maior diâmetro (LD) para todas as lesões-alvo será calculada e relatada como a soma da linha de base LD. A soma da linha de base LD é usada como referência para caracterizar a resposta objetiva do tumor. Se houver > 10 lesões mensuráveis, aquelas não selecionadas como lesões-alvo serão consideradas juntamente com doenças não mensuráveis ​​como lesões não-alvo.
   • Lesões não alvo: Todas as lesões não mensuráveis ​​(ou locais de doença) mais quaisquer lesões mensuráveis ​​além das 10 listadas como lesões alvo. As medições não são necessárias, mas essas lesões devem ser observadas no início do estudo e devem ser seguidas como "presentes" ou "ausentes".
   • Qualquer medição do tumor baseada apenas no exame físico deve ser verificada por um segundo médico.
   • O mesmo método de diagnóstico por imagem deve ser usado durante todo o estudo para avaliar as lesões.

5. PLANO DE TRATAMENTO

   5.1 Estudo da Fase I

   5.1.1 Carboplatina

   A dose inicial de carboplatina é administrada em dose fixa com uma AUC alvo de 5 durante 1 hora no dia 1 em ambos os braços do estudo. A carboplatina será administrada antes da gencitabina em todos os pacientes. A dose é repetida a cada 21 dias e será calculada pela fórmula de Calvert:

   Dose de carboplatina (mg) = [taxa de filtração glomerular calculada (TFG) + 25] x 5

   A TFG será calculada de acordo com a fórmula de Cockroft-Gault:

   TFG (ml/min) = (140 - idade) x peso corporal (em kg) / 0,81 x creatinina sérica (micromol/l)

   Para mulheres, o fator de correção é 0,85 (x GFR calculado)

   5.1.2 Gencitabina infusional

   A gencitabina por infusão é administrada a uma taxa constante de 10 mg/m2 por minuto em todos os pacientes nos dias 1 e 8, o ciclo é repetido a cada 21 dias. O escalonamento da dose é obtido aumentando a duração da infusão. A dose total de gemcitabina é reconstituída em 500 ml de solução salina normal e infundida através de uma linha venosa periférica ou central.

   5.2.1 Cursos de tratamento

   Antes de iniciar o tratamento, os pacientes elegíveis serão randomizados para receber gencitabina administrada na infusão padrão curta de 30 minutos ou infusão prolongada de taxa constante durante a duração determinada no estudo de fase I. Todos os pacientes em ambos os braços receberão carboplatina em uma dose de AUC de 5 durante 1 hora.

   braço padrão

   Carboplatina AUC de 5 durante 1 hora, dia 1, seguido de gencitabina 1000 mg/m2 durante 30 min, dia 1 e 8 O ciclo é repetido a cada 21 dias

   braço de estudo

   Carboplatina AUC de 5 durante 1 hora, dia 1, seguido de gencitabina 10 mg/m2/min em MTD, dia 1 e 8 O ciclo é repetido a cada 21 dias

   Tratamento de suporte

   • Todos os pacientes devem receber pré-medicação para prevenir náuseas e vômitos de acordo com a política local.
   • Nenhum fator de crescimento profilático é permitido.
   • O fator de crescimento é permitido apenas no cenário de resgate, por exemplo. neutropenia prolongada de grau 4 por mais de 7 dias, ou para neutropenia febril.

   5.2.2 Dosagem no ciclo 2 e ciclos subsequentes

   O próximo ciclo de tratamento começará dentro do cronograma, fornecendo

   • Não há evidência de progressão do tumor

   • Neutrófilos ~ 2 x 109/L
   • Plaquetas ~ 100.000 x 109/l
   • Ausência de toxicidade não hematológica de grau 2 ou superior

   5.2.3 Modificações de dose

   5.2.3.1 Regras gerais

   • Nenhum escalonamento de dose intra-paciente é permitido.
   • Qualquer paciente que necessite de uma redução de dose não será elegível para qualquer escalonamento de dose para o restante do estudo.
   • O tratamento pode ser adiado até ao dia 35 para permitir ao doente tempo suficiente para a recuperação da toxicidade relacionada com o tratamento. Qualquer paciente que não puder prosseguir para o próximo ciclo no dia 35 será descontinuado do estudo.

   5.2.3.2 Modificações de dose com base na toxicidade hematológica

   Ajuste baseado na contagem de plaquetas no dia 8 (x 109/l) ANC (x 109/l) Ação > 75 e > 1,0 Continuar com a dose do dia 8 > 75 e 0,5 - 1,0 Continuar com dose reduzida 50 - 75 e ~ 0,5 Continuar com dose reduzida dose < 50 e/ou < 0,5 Omitir dose Quando a dose do dia 8 for reduzida, a mesma dose reduzida será usada no ciclo seguinte.

   Quando a dose do dia 8 é omitida, o ciclo é concluído, e o próximo ciclo será agendado para o dia 22, com redução da dose.

   Ajuste de dose com base na contagem nadir de plaquetas (x 109/l) CAN (x 109/l) Ação ~ 25 sem sangramento e ~ 0,5 ou < 0,5 por < 7 dias Sem alteração < 25 ou < 50 com sangramento e/ou < 0,5 por > 7 dias Redução de dose (ver abaixo) Qualquer e < 0,5 e febre Redução de dose Recorrência de qualquer um dos itens acima após 2 reduções de dose Fora do estudo

   Ajuste com base na contagem de plaquetas do dia 22 (x 109/l) ANC (x 109/l) Ação

   ~ 100 e > 2,0 Continuar com o próximo ciclo < 100 e/ou < 2,0 Atraso 1 semana Atraso máximo de 2 semanas (o próximo ciclo deve começar no dia 35 para permanecer no estudo)

   Esquema de redução de dose Primeira redução Segunda redução Terceira redução Carboplatina AUC 4,5 AUC 4,0 Fora do estudo Gencitabina (braço padrão) 750 mg/m2 (1000 mg/m2 x 75%) 500 mg/m2 (1000 mg/m2 x 50%) Fora do estudo Infusão Gemcitabina 75% da duração da Fase II 50% da duração da infusão anterior Fora do estudo

   5.2.3.3 Modificações de dose para toxicidade não hematológica

   Qualquer toxicidade não hematológica de grau 3 ou 4, exceto náuseas e vômitos e fadiga e transaminite reversível, retirará o paciente do estudo.

   A toxicidade não hematológica deve ser inferior a grau 2 antes de prosseguir para o próximo ciclo. Se forem superiores ao grau 2, o tratamento é adiado por 1 semana. O tratamento pode ser adiado por no máximo 2 semanas.

   5.2.4 Duração do tratamento

   Os pacientes que responderem receberão até seis ciclos de quimioterapia.

   Após a conclusão ou retirada do tratamento, os pacientes podem continuar a receber tratamento adicional a critério de seu médico.

   Avaliações de triagem

   As seguintes investigações de triagem devem ser realizadas dentro de 28 dias do dia 1 do ciclo 1:

   • Estadiamento completo e documentação do estado do tumor - radiografia de tórax basal, TC de tórax, abdome, cérebro e cintilografia óssea, se clinicamente indicado.

   As seguintes avaliações e investigações de triagem devem ser realizadas dentro de 14 dias após a primeira dose da terapia e incluem o seguinte:

   • Consentimento

   • Histórico médico completo, incluindo detalhes dos sintomas, tratamentos anteriores, qualquer toxicidade residual, condições médicas concomitantes e medicamentos

   • Exames físicos, incluindo documentação de todas as lesões palpáveis, sinais vitais, peso corporal e altura e KPS.

   • Documentação da(s) lesão(ões) indicadora(s) para incluir a data da avaliação, descrição do local da lesão, dimensões e tipo de estudo diagnóstico para acompanhar a lesão. O mesmo método diagnóstico deve ser usado ao longo do estudo para avaliar uma lesão.

   Os seguintes testes devem ser realizados dentro de 7 dias após a primeira dose da terapia e incluem o seguinte:

   • hemograma completo
   • Eletrólitos séricos e enzimas hepáticas, cálcio e magnésio totais
   • Teste de gravidez sérico, se aplicável
   • Exame de urina com fita reagente - se a fita reagente for positiva para proteína ou sangue, é necessário um exame microscópico completo

   8.3 Avaliação durante o tratamento

   Antes do dia 1 de cada ciclo

   • Histórico e exame físico

   • Avalie e registre as toxicidades do curso anterior. Atribua graus de toxicidade apropriados (consulte o Apêndice 4).

   • Registre todos os medicamentos tomados desde o último ciclo.

   • Medição de peso para recálculo da área de superfície corporal e depuração de creatinina

   • Avaliação dos sintomas da doença (o questionário de qualidade de vida deve ser aplicado e preenchido pelo paciente antes da avaliação pelo investigador).

   • Avaliação do estado de desempenho
   • Hemograma completo, eletrólitos e enzimas hepáticas (se os níveis do dia 15 estiverem anormais).
   • Análise de vareta de urina, se o resultado da linha de base for anormal
   • Medições clínicas do tumor devem ser obtidas antes de cada ciclo de tratamento
   • As medições radiográficas do tumor devem ser obtidas a cada 2 ciclos de tratamento.
   • Modifique a dose do próximo ciclo se necessário (ver secção 5.2.3).

   Avaliação do dia 8

   • Hemograma completo

   Avaliação do dia 15

   • Hemograma completo, eletrólitos e enzimas hepáticas

   8.4 Avaliação da resposta

   Os pacientes serão avaliados quanto à resposta após 2 ciclos de terapia. As medições clínicas do tumor devem ser realizadas antes de cada ciclo de tratamento. As medições radiográficas do tumor devem ser obtidas a cada 2 ciclos de tratamento.

   Se um paciente atender aos critérios de resposta (consulte a seção 7) para CR, PR ou SD pela primeira vez, outra avaliação clínica e radiográfica do tumor será realizada 4 ou mais semanas depois para documentar que a resposta durou pelo menos 4 semanas.

   A avaliação clínica do tumor após cada ciclo e a resposta radiográfica do tumor após cada 2 ciclos continuarão até a conclusão do tratamento ou retirada do paciente.

   8.5 Acompanhamento pós-tratamento

   Os pacientes que responderam serão revisados ​​a cada 2 meses após a conclusão da quimioterapia. A avaliação clínica do tumor será realizada 2 meses. A avaliação radiográfica do tumor será feita a cada 4 meses. Estes continuarão até que a progressão da doença seja documentada.

   Os pacientes que nunca tiveram uma resposta e os pacientes com progressão da doença após uma resposta previamente documentada serão acompanhados a cada 3 meses para dados de sobrevivência.

9. CONCLUSÃO E RETIRADA DO TRATAMENTO

Um paciente será considerado como concluindo o tratamento se:

• O paciente completou 6 ciclos de terapia.
• O paciente tem um CR confirmado ou PR confirmado e recebeu pelo menos 4 ciclos de terapia e o investigador não sente que a terapia adicional é indicada.
• O paciente manteve um estado SD por pelo menos 8 semanas de tratamento e recebeu pelo menos 2 ciclos de tratamento.
• O paciente tem DP após completar pelo menos um curso completo de tratamento.
• Um paciente é removido do estudo devido a toxicidade inaceitável.

Os pacientes podem ser retirados do tratamento pelos seguintes motivos:

• Experiência adversa, incluindo doença intercorrente ou toxicidade inaceitável.
• Se o médico assistente achar que uma mudança de terapia seria melhor para o paciente.
• Violação do protocolo (incluindo não conformidade).
• Retirada do paciente a seu pedido, por outros motivos que não os acima.
• Perdido para seguir.

Todos os pacientes serão acompanhados quanto ao estado da doença e sobrevida até a morte. 10. AVALIAÇÃO DA QUALIDADE DE VIDA (QoL)

É essencial explicar ao paciente que a avaliação da qualidade de vida é uma parte importante do estudo e que todas as seções devem ser respondidas, mesmo que o paciente as considere irrelevantes. Ressalta-se que o preenchimento desses formulários auxilia o médico a conhecer melhor os efeitos do tratamento no bem-estar do paciente.

Uma pessoa de contato nomeada que não seja o clínico responsável que gerencia o paciente no contexto do estudo deve ser nomeada para assumir a responsabilidade pela administração, coleta e verificação do questionário EORTC QLQ-C30 e QLQ-LC13 preenchido. O questionário deve ser respondido antes da consulta com o clínico, de acordo com as diretrizes da EORTC para avaliação da qualidade de vida. Eles devem ser verificados para garantir que todas as perguntas foram respondidas; se necessário, volte imediatamente ao paciente e peça-lhe que preencha os itens que faltam. Se uma avaliação for perdida devido a falha administrativa, o paciente deve ser contatado por telefone ou carta e deve ser feito um acordo para que o questionário seja respondido dentro de uma semana da avaliação agendada.

O questionário pode ser preenchido pelo paciente se ele/ela for capaz de ler e entender o idioma do questionário. Caso contrário, a pessoa designada para administrar a QoL deve ler as perguntas como estão escritas, no idioma que o paciente entende, e registrar a resposta de cada pergunta sem prejudicar sua resposta. O tipo de parto deve ser anotado no questionário.

11. PROCEDIMENTO DE RANDOMIZAÇÃO

Os participantes do estudo serão designados aleatoriamente para receber gencitabina administrada na infusão convencional de 30 minutos ou infusão prolongada, ambas em combinação com carboplatina.

11.1 Estratificação

A randomização estratificada será realizada usando o método de minimização com base nos seguintes fatores:

(i) Centro (National University Hospital, Sydney Cancer Centre, Johns Hopkins-NUH International Medical Centre) (ii) Karnofsky performance status (90 - 100% vs 70 - 80%) (iii) Estágio da doença (IIIB vs IV)

11.2 Registro

Os pacientes entrarão no estudo por telefonema para a Unidade de Pesquisa Clínica e Epidemiologia do Conselho Nacional de Pesquisa Médica (NMRC), Cingapura (+65 220-1292) entre 8h30 e 17h30, de segunda a sexta-feira, e das 8h30 às 17h30, de segunda a sexta-feira. 12:30 horas de sábado (horário de Cingapura), ou por Fax (+65 220-1485), informando que o paciente deve ser inserido no estudo CTRG L08 ou SQLU02.

O consentimento informado por escrito para a entrada no estudo deve ser obtido antes da randomização. Todos os critérios de elegibilidade e formulário de consentimento serão verificados e os fatores de estratificação declarados antes da alocação do tratamento. O paciente será randomizado para infusão longa de gencitabina (L) ou gencitabina de infusão curta de 30 minutos (S) e receberá um número de ensaio. O projeto envolverá alocação igual de pacientes para os dois tratamentos. O fax de confirmação será enviado ao investigador.

12. CONSIDERAÇÕES ESTATÍSTICAS

O cálculo do tamanho da amostra é realizado com base no critério da teoria estatística de seleção conforme detalhado em Simon et al (62) e Gibbons et al (63). Assumindo uma probabilidade de 90% de selecionar corretamente o melhor tratamento e antecipando uma taxa de resposta inicial de 40%, então, para detectar uma superioridade de 15% do melhor tratamento sobre o outro, seria necessário um tamanho de ensaio de 37 pacientes por braço de tratamento. A meta total de acúmulo seria, portanto, de 74 pacientes.

13. ANÁLISES ESTATÍSTICAS

A análise estatística de todos os desfechos do estudo será realizada com base na intenção de tratar. No caso de perda de acompanhamento, os pacientes ainda serão incluídos na análise durante o tempo em que forem observados. A comparabilidade inerente dos resultados neste projeto randomizado de fase II usando a teoria de seleção estatística garante que os dois tratamentos possam ser classificados de forma confiável quando grandes diferenças são obtidas.

A melhor resposta será utilizada na análise da resposta objetiva do tumor. No caso de evento adverso, onde vários eventos do mesmo tipo ocorreram em um paciente, apenas o grau máximo será documentado para análise. As taxas de resposta tumoral e toxicidades entre os grupos de tratamento serão comparadas descritivamente usando estimativas de proporções.

A duração da resposta e o tempo de resposta para pacientes responsivos serão avaliados usando estatísticas descritivas apropriadas. A avaliação da sobrevida livre de progressão e global será realizada pela técnica de Kaplan-Meier no seguimento de 1 ano. No caso de sobrevida livre de progressão, os pacientes cuja doença não progrediu serão censurados na última data conhecida como vivos. Da mesma forma, a análise da sobrevida global censura os pacientes que perderam o acompanhamento ou que permaneceram vivos na última data conhecida como vivos.

Para cada dimensão de QoL, as mudanças nas pontuações ao longo do tempo serão comparadas entre os braços de tratamento por meio de representação gráfica apropriada ou estatísticas descritivas.

Nenhuma análise intermediária está planejada para este estudo randomizado de fase II.

14. CONSIDERAÇÕES ÉTICAS

14.1 CEP/Comitê de Ética

Antes do início do estudo, o protocolo será submetido à revisão e aprovação do hospital e do comitê de ética e pesquisa do Ministério da Saúde ou grupo equivalente. A aprovação do protocolo e o consentimento informado devem ser obtidos.

14.2 Informações do paciente

O médico responsável informará o paciente sobre os antecedentes e conhecimentos atuais do tratamento em estudo, com referência especial à atividade e toxicidade conhecidas. O paciente será informado sobre a natureza investigativa deste tratamento e, em particular, o processo de randomização envolvido neste estudo. O paciente será informado de seu direito de desistir do estudo a qualquer momento sem qualquer penalidade em relação à continuação do atendimento nesta instituição e pelos mesmos médicos que ele escolher. Antes da inclusão, todos os pacientes assinarão um formulário de consentimento informado por escrito.

14.3 Consentimento informado

O consentimento informado deve atender aos requisitos da última revisão da Declaração de Helsinque e a quaisquer regulamentos e diretrizes aplicáveis, como as Boas Práticas Clínicas (Cingapura).

O estudo será completamente explicado a cada candidato em potencial e o sujeito deve dar consentimento assinando e datando o formulário de consentimento.

O consentimento deve ser obtido antes da realização de qualquer procedimento exigido pelo protocolo, incluindo quaisquer procedimentos que não façam parte do atendimento normal ao paciente.

Níveis plasmáticos de dFdC e dFdU

Dez mililitros de sangue serão colhidos em 0 horas (linha de base), 10 minutos, 30 minutos, 10 minutos antes do final da infusão e 30 minutos, 1 hora, 2 horas após o final da infusão. O sangue será coletado em tubos de 10 ml (tampa verde) contendo heparina e 5 micromol de tetrahidrouridina. Os tubos são então centrifugados a 3300 rpm por 15 minutos e o plasma sobrenadante é então transferido para tubos simples (tampa vermelha) para armazenamento imediato a -80oC. As amostras serão rotuladas com o nome do paciente, número de identificação, data, hora exata da amostra e número do protocolo. Um formulário farmacocinético acompanhará as amostras de plasma ao laboratório de Farmacologia do Departamento de Farmacologia da Universidade Nacional de Cingapura, a/c Prof. Lee How Sung.

Os níveis de DFdC e dFdU no plasma serão medidos usando HPLC de fase reversa, conforme descrito por Grunewald (22). Resumidamente, 20 microl a 50 microl de plasma são injetados em uma coluna analítica C18 mBondapak (Waters Associates, Inc.). Os componentes serão separados com uma fase móvel que consiste em um gradiente linear de 30 minutos começando com 100% da solução A (acetato de amônio 0,5M, pH = 6,8) e terminando com 60% da solução B (50% de metanol em água deionizada). A taxa de fluxo é de 1,5 ml/min. Os comprimentos de onda de detecção são 275 nm e 262 nm para dFdC e dFdU, respectivamente.

16.2 Níveis intracelulares de dFdCTP

Amostras de sangue serão coletadas para análise de dFdCTP intracelular. Apenas 3 amostras por paciente, obtidas 10 minutos após o início e 10 minutos antes do final da infusão de gencitabina, e uma no meio da infusão, serão testadas para dFdCTP.

O plasma é primeiro separado do sangue por centrifugação a 3300 rpm por 20 minutos. As células mononucleares são então isoladas por centrifugação em gradiente de densidade Ficoll-Hypaque e os desoxirribonucleosídeos trifosfatos são extraídos com 0,4 NHClO4, e o material insolúvel em ácido é removido por centrifugação. O sobrenadante é então cuidadosamente neutralizado para pH 7 com hidróxido de potássio, e o KClO4 precipitado é então removido por centrifugação. Um método de cromatografia líquida de alta eficiência de troca iônica é então usado para separar e quantificar o dFdCTP.

17. ADMINISTRAÇÃO DO ESTUDO

17.1 Responsabilidade sobre drogas

Os estoques de gencitabina serão fornecidos pela Eli Lilly para fins de teste, e todos esses frascos serão contabilizados na farmácia local.

17.2 Manutenção de registros de pacientes

Os formulários de relatório clínico CTRG serão usados ​​para registrar dados para este estudo. Todos os formulários de relatório clínico do paciente serão enviados por fax para o CTRG Office (+65 777-5545). Uma cópia do formulário de relatório de elegibilidade de cada paciente, formulário de relatório de randomização (para a fase II), cronograma do estudo, formulários de consentimento, relatórios laboratoriais e radiológicos e avaliação de qualidade de vida será mantida no escritório do CTRG. Todos os registros serão mantidos por um período de 6 anos após a data de encerramento do estudo de acordo com as diretrizes do GCP de Cingapura