Transplantation de cellules souches dans les lésions oculaires de la maladie de Behcet

Expérimental: UN

Maladie de Behçet avec lésions oculaires

Biologique: Transplantation autologue de cellules souches

Prélèvement de moelle osseuse autologue (20 ml) à partir de la crête iliaque. Séparation des cellules mononucléaires à l'aide de ficoll hypaque et culture dans 10 % de sérum de veau fœtal et de milieu d'aigle modifié par Dulbecco. Après étape confluente, détachement des cellules avec de la trypsine/EDTA et repiquage. Passages répétés jusqu'à l'obtention du numéro de cellule requis. Les cellules confluentes du dernier passage sont lavées avec une solution de tyrode et incubées avec M199 pendant 60 minutes. Les cellules sont séparées en utilisant de la trypsine/EDTA et lavées 3 fois avec M199 et HSA à 1 %. Le précipité sera dilué avec du M199 hépariné pour faire une solution avec 6 x 106 cellules/ml. L'échantillon sera testé pour la viabilité et la détection de CD45, CD34, CD90, CD44, CD13, CD105 et CD166 avant l'injection. Le nombre de cellules à injecter sera compris entre 3 et 5 millions de cellules, dans un volume maximum de 0,3 ml. Les cellules seront injectées dans le vitré à 3,5 millimètres du limbe avec une aiguille à insuline de calibre 26.

1- Acuité visuelle par ETDRS (Early Treatment of Diabetic Retinopathy Study). 2- Etat rétinien et œdème rétinien par Photographie Couleur, Electrorétinographie Multifocale, et OCT (Tomographie Cohérente Optique).