Renouvellement des lymphocytes spécifiques de l'antigène après immunisation avec le vaccin contre la fièvre jaune 17D

En général, les réponses des lymphocytes T aux infections virales se produisent en trois étapes distinctes : expansion, contraction et mémoire. Au cours de l'expansion, les cellules T CD8 + spécifiques de l'antigène prolifèrent pour augmenter en nombre et acquièrent la capacité de tuer les cellules infectées par le virus, c'est-à-dire de devenir des «effecteurs». Une fois le virus éliminé, 90 à 95 % des effecteurs meurent. Le petit pool de cellules restantes se différencie progressivement pour devenir des cellules mémoire et assurer une protection à vie. Le taux de division cellulaire est distinct dans la génération d'effecteurs et le maintien des cellules mémoire. Ces concepts ont été principalement dérivés d'études sur la souris. Le chiffre d'affaires des lymphocytes T CD8 + humains n'est pas complètement compris en raison du manque d'outils et de techniques appropriés adaptés aux études humaines.

Dans ce protocole, les chercheurs veulent comprendre la durée de vie et la courbe de décroissance des lymphocytes T CD8+ effecteurs et le taux de renouvellement homéostatique des lymphocytes T CD8+ mémoire (sous-ensembles CD28+/-) après immunisation 17D contre le YFV à l'aide d'une méthode innovante développée par le Dr Marc Hellerstein. (à l'Université de Californie, Berkeley) pour mesurer la réplication de l'ADN et la prolifération cellulaire chez l'homme à l'aide d'un isotope stable naturel appelé deutérium (2H). Cette technique a été utilisée pour suivre le renouvellement d'un certain nombre de types de cellules humaines in vivo. Les chercheurs de cette étude prévoient d'utiliser le marquage 2H pour suivre les lymphocytes T CD8+ spécifiques du YFV chez les vaccinés humains (participants positifs HLA-A2 uniquement). La disponibilité d'un épitope des lymphocytes T (A2-NS4B214), un composant majeur de la réponse des lymphocytes T CD8+ spécifiques du YFV humain, permet l'analyse longitudinale des lymphocytes T CD8+ spécifiques du virus. La caractéristique unique de cette étude est qu'elle permet de suivre la différenciation des lymphocytes T CD8 + spécifiques du YFV chez l'homme. Ainsi, les chercheurs peuvent surmonter les limites inhérentes dues à l'hétérogénéité dans les études transversales qui impliquent des lymphocytes T CD8+ en vrac.

Nous prévoyons d'inscrire 50 volontaires adultes en bonne santé (âgés de 18 à 45 ans) pour les projets 1 et 2 afin d'étudier les réponses des lymphocytes T CD8 mémoire. Tous les sujets recevront le vaccin YFV-17D approuvé par la FDA (à la dose et à la voie d'administration approuvées par la FDA). L'expression de CD28 sera déterminée pour voir si elle est couplée à la génération et/ou au maintien de lymphocytes T CD8 mémoire spécifiques au YFV. Les différences phénotypiques entre les lymphocytes T CD8 spécifiques CD28+ et CD28-_YFV seront étudiées afin de déterminer les différences de longévité. Les profils d'expression génique des lymphocytes T CD28+ et CD28 spécifiques du YFV seront déterminés. L'influence de l'IL-7 et de l'IL-15 sur la survie des lymphocytes T CD8 spécifiques du YFV sera étudiée. Ces informations seront obtenues à partir de cellules spécifiques du YFV isolées aux jours 0, 14, 28 et 3 à 6 mois, 1 à 2 ans et > 5 ans après la vaccination.

L'étude sera menée à la Hope Clinic du Emory Vaccine Center. Les personnes qui prévoient de se rendre dans des zones endémiques de fièvre jaune et qui ont besoin du vaccin à des fins de voyage ainsi que les non-voyageurs seront recrutés dans l'étude. Les participants potentiels peuvent être recrutés à partir de la Emory Travel Well Clinic ou de la santé des employés du CDC ou du campus de l'Université Emory ou de la population générale du métro d'Atlanta en utilisant des publicités radio et imprimées, des envois électroniques, des publications sur Internet, des dépliants et des affiches. L'approbation de l'IRB de l'Université Emory sera obtenue avant le début de l'étude.

Il y aura une visite de sélection pour déterminer l'éligibilité à l'étude. Les formulaires de consentement éclairé signés seront obtenus avant le début des procédures d'étude. Les critères d'inclusion et d'exclusion ainsi qu'un bref historique et un examen physique seront effectués. De plus, les participants seront invités à subir une phlébotomie pour déterminer le type HLA. Les participants positifs pour l'allèle HLA A202 seront invités à participer à cette étude. On estime que 25 % de la population américaine caucasienne sera positive pour cet allèle. Les participants dont le test est négatif pour cet allèle se verront proposer d'autres essais de vaccins en cours à la clinique Emory Hope et leur participation à ce protocole prendra fin.

Avant l'administration du vaccin contre la fièvre jaune, le rapport bénéfice/risque des événements indésirables liés au vaccin par rapport au risque de contracter la fièvre jaune est déterminé. Les personnes en bonne santé qui n'ont pas été précédemment vaccinées avec le vaccin YFV seront incluses dans l'étude. Des volontaires féminins et masculins seront recrutés.

Nous prévoyons de recruter 50 volontaires sains âgés de 18 à 45 ans. Afin d'atteindre ces objectifs d'inscription, nous devrons peut-être sélectionner 200 sujets. Tous les sujets recevront le vaccin YFV-17D approuvé par la FDA (à la dose et par la voie d'administration approuvées par la FDA) une fois le jour 0 de la visite d'étude. Des échantillons de sang seront obtenus des volontaires le jour 0 et à des moments prévus après la vaccination. Le volume total de sang prélevé ne dépassera pas la limite de la Croix-Rouge de 473 ml en 56 jours.

Les volontaires de l'étude seront maintenus sur un apport quotidien de 100 ml à 150 ml de 2H2O, dans le but de maintenir un enrichissement en eau corporelle de 1,5 à 2 % (en supposant un renouvellement total de l'eau corporelle d'environ 3,5 litres par jour chez des sujets sains et ambulatoires). Des échantillons de plasma et de salive seront obtenus au cours du protocole d'administration de 2H2O pour la mesure de l'enrichissement corporel en 2H2O.