Omsetning av antigenspesifikke lymfocytter etter immunisering med 17D gulfebervaksine

Generelt forekommer T-celleresponser på virusinfeksjoner i tre forskjellige stadier: ekspansjon, sammentrekning og hukommelse. Under ekspansjon prolifererer antigenspesifikke CD8+ T-celler for å øke i antall, samt tilegne seg evnen til å drepe virusinfiserte celler, dvs. bli "effektorer". Når viruset er fjernet, dør 90-95 % av effektorene. Den lille poolen av gjenværende celler differensierer gradvis for å bli minneceller og gi livslang beskyttelse. Hastigheten av celledeling er distinkt i generering av effektorer og vedlikehold av minneceller. Disse konseptene er først og fremst avledet fra musestudier. Human CD8+ T-celleomsetning er ikke fullstendig forstått på grunn av mangelen på passende verktøy og teknikker som er egnet for studier på mennesker.

I denne protokollen ønsker forskerne å forstå levetiden og forfallskurven til effektor CD8+ T-celler og hastigheten på homeostatisk omsetning av minne CD8+ (CD28+/- undergrupper) T-celler etter 17D YFV-immunisering ved bruk av en innovativ metode utviklet av Dr. Marc Hellersteins gruppe (ved University of California, Berkeley) for måling av DNA-replikasjon og celleproliferasjon hos mennesker ved bruk av en naturlig forekommende stabil isotop kalt deuterium (2H). Denne teknikken har blitt brukt til å spore omsetningen til en rekke humane celletyper in vivo. Forskerne i denne studien planlegger å bruke 2H-merking for å spore YFV-spesifikke CD8+ T-celler i humane vaksinerte (kun HLA-A2-positive deltakere). Tilgjengeligheten av en T-celleepitop (A2-NS4B214), en hovedkomponent i den humane YFV-spesifikke CD8+ T-celleresponsen, tillater longitudinell analyse av virusspesifikke CD8+ T-celler. Det unike med denne studien er at den tillater sporing av differensiering av YFV-spesifikke CD8+ T-celler hos mennesker. Dermed kan forskerne overvinne de iboende begrensningene på grunn av heterogenitet i tverrsnittsstudier som involverer bulk CD8+ T-celler.

Vi planlegger å melde 50 friske, voksne frivillige (18-45 år) til prosjekt 1 og 2 for å studere minne CD8 T-celleresponser. Alle forsøkspersoner vil motta FDA-godkjent YFV-17D-vaksine (ved FDA-godkjent dose og administrasjonsvei). CD28-ekspresjon vil bli bestemt for å se om den er koblet til generering og/eller vedlikehold av YFV-spesifikke minne CD8 T-celler. Fenotypiske forskjeller mellom CD28+ og CD28-_YFV-spesifikke CD8 T-celler vil bli studert for å bestemme forskjeller i levetid. Genekspresjonsprofiler for CD28+ og CD28 YFV-spesifikke CD8 T-celler vil bli bestemt. Påvirkningen av IL-7 og IL-15 på overlevelse av YFV-spesifikke CD8 T-celler vil bli studert. Denne informasjonen vil bli hentet fra YFV-spesifikke celler isolert på dag 0, 14, 28 og 3 til 6 måneder, 1-2 år og >5 år etter vaksinasjon.

Studien vil bli utført ved Hope Clinic of Emory Vaccine Center. Personer som planlegger å reise til endemiske områder med gul feber og som trenger vaksinen for reiseformål, så vel som ikke-reisende vil bli rekruttert til studien. Potensielle deltakere kan rekrutteres fra Emory Travel Well Clinic eller CDC-ansattes helse eller Emory University campus eller den generelle befolkningen i metrostasjonen Atlanta ved å bruke radio- og trykte annonser, elektroniske utsendelser, Internett-oppslag, flyers og plakater. IRB-godkjenning fra Emory University vil bli innhentet før oppstart av studien.

Det vil bli et screeningbesøk for å avgjøre om du er kvalifisert for studien. Signerte skjemaer for informert samtykke vil bli innhentet før igangsetting av studieprosedyrer. Inklusjons- og eksklusjonskriteriene og en kort anamnese og fysisk undersøkelse vil bli utført. I tillegg vil deltakerne bli bedt om å gjennomgå flebotomi for å bestemme HLA-typen. Deltakere som er positive for HLA A202-allelen, vil bli bedt om å delta i denne studien. Det er anslått at 25 % av den kaukasiske amerikanske befolkningen vil være positive for denne allelen. Deltakere som tester negativt for denne allelen vil bli tilbudt andre vaksineforsøk som gjennomføres ved Emory Hope-klinikken, og deres deltakelse i denne protokollen vil avsluttes.

Før administrasjon av gulfebervaksinen, bestemmes risiko-nytte-forholdet mellom de vaksinerelaterte bivirkningene versus risikoen for å få gulfeber. Friske personer som ikke tidligere er vaksinert med YFV-vaksine vil bli inkludert i studien. Både kvinnelige og mannlige frivillige vil bli rekruttert.

Vi planlegger å melde inn 50 friske frivillige mellom 18 og 45 år. For å nå disse påmeldingsmålene, kan det hende vi må screene 200 fag. Alle forsøkspersoner vil motta FDA-godkjent YFV-17D-vaksine (ved FDA-godkjent dose og administrasjonsvei) én gang på dag 0 av studiebesøket. Blodprøver vil bli tatt fra de frivillige på dag 0, og på planlagte tidspunkter etter vaksinasjon. Det totale blodvolumet vil ikke overstige Røde Kors-grensen på 473 ml på 56 dager.

Studiefrivillige vil opprettholdes på et 100ml - 150ml daglig inntak av 2H2O, med et mål om å opprettholde 1,5-2% kroppsvannanrikning (forutsatt en total kroppsvannomsetning på ~3,5 liter per dag hos friske, ambulerende forsøkspersoner). Plasma- og spyttprøver vil bli tatt under 2H2O-administrasjonsprotokollen for måling av kroppens 2H2O-anrikning.