Omsætning af antigenspecifikke lymfocytter efter immunisering med 17D gul febervaccinen

Generelt forekommer T-celleresponser på virale infektioner i tre forskellige stadier: ekspansion, kontraktion og hukommelse. Under ekspansion prolifererer antigen-specifikke CD8+ T-celler for at stige i antal samt erhverve evnen til at dræbe virusinficerede celler, dvs. blive 'effektorer'. Når virussen er fjernet, dør 90-95% af effektorerne. Den lille pulje af tilbageværende celler differentierer sig gradvist og bliver til hukommelsesceller og giver livslang beskyttelse. Celledelingshastigheden er tydelig i genereringen af ​​effektorer og vedligeholdelse af hukommelsesceller. Disse begreber er primært afledt af museundersøgelser. Human CD8+ T-celleomsætning er ikke fuldstændigt forstået på grund af manglen på passende værktøjer og teknikker, der er egnede til humane undersøgelser.

I denne protokol ønsker forskerne at forstå levetiden og henfaldskurven for effektor CD8+ T-celler og hastigheden af ​​homøostatisk omsætning af hukommelse CD8+ (CD28+/- undergrupper) T-celler efter 17D YFV immunisering ved hjælp af en innovativ metode udviklet af Dr. Marc Hellersteins gruppe (ved University of California, Berkeley) til måling af DNA-replikation og celleproliferation hos mennesker ved hjælp af en naturligt forekommende stabil isotop kaldet deuterium (2H). Denne teknik er blevet brugt til at spore omsætningen af ​​en række humane celletyper in vivo. Forskerne i denne undersøgelse planlægger at bruge 2H-mærkning til at spore YFV-specifikke CD8+ T-celler i humane vaccinerede (kun HLA-A2-positive deltagere). Tilgængeligheden af ​​en T-celleepitop (A2-NS4B214), en hovedkomponent af den humane YFV-specifikke CD8+ T-celle-respons, muliggør longitudinel analyse af virusspecifikke CD8+ T-celler. Det unikke ved denne undersøgelse er, at det giver mulighed for sporing af differentiering af YFV-specifikke CD8+ T-celler hos mennesker. Således kan forskerne overvinde de iboende begrænsninger på grund af heterogenitet i tværsnitsundersøgelser, der involverer bulk CD8+ T-celler.

Vi planlægger at tilmelde 50 raske, voksne frivillige (18-45 år) til projekt 1 og 2 for at studere hukommelses-CD8 T-celleresponser. Alle forsøgspersoner vil modtage den FDA-godkendte YFV-17D-vaccine (ved den FDA-godkendte dosis og administrationsvej). CD28-ekspression vil blive bestemt for at se, om den er koblet til generering og/eller vedligeholdelse af YFV-specifikke hukommelse CD8 T-celler. Fænotypiske forskelle mellem CD28+ og CD28-_YFV-specifikke CD8 T-celler vil blive undersøgt for at bestemme forskelle i levetid. Genekspressionsprofiler for CD28+ og CD28 YFV-specifikke CD8 T-celler vil blive bestemt. Indflydelsen af ​​IL-7 og IL-15 på overlevelse af YFV-specifikke CD8 T-celler vil blive undersøgt. Denne information vil blive opnået fra YFV-specifikke celler isoleret på dag 0, 14, 28 og 3 til 6 måneder, 1-2 år og >5 år efter vaccination.

Undersøgelsen vil blive udført på Hope Clinic of Emory Vaccine Center. Personer, der planlægger at rejse til endemiske områder med gul feber, og som har brug for vaccinen til rejseformål, såvel som ikke-rejsende, vil blive rekrutteret til undersøgelsen. Potentielle deltagere kan rekrutteres fra Emory Travel Well Clinic eller CDC medarbejdersundhed eller Emory University campus eller den generelle befolkning i metro Atlanta ved hjælp af radio- og trykte reklamer, elektroniske forsendelser, internetopslag, flyers og plakater. IRB-godkendelse fra Emory University vil blive opnået før påbegyndelsen af ​​undersøgelsen.

Der vil være et screeningsbesøg for at afgøre egnetheden til undersøgelsen. Underskrevne informerede samtykkeformularer vil blive indhentet før påbegyndelse af undersøgelsesprocedurer. Inklusions- og eksklusionskriterierne og en kort anamnese og fysisk undersøgelse vil blive udført. Derudover vil deltagerne blive bedt om at gennemgå flebotomi for at bestemme HLA-typen. Deltagere, der er positive for HLA A202-allelen, vil blive bedt om at deltage i denne undersøgelse. Det anslås, at 25% af den kaukasiske amerikanske befolkning vil være positive for denne allel. Deltagere, der tester negativt for denne allel, vil blive tilbudt andre vaccineforsøg, der udføres på Emory Hope-klinikken, og deres deltagelse i denne protokol ophører.

Forud for administration af gul feber-vaccinen bestemmes risiko-benefit-forholdet mellem de vaccinerelaterede bivirkninger versus risikoen for at få gul feber. Raske personer, som ikke tidligere er blevet vaccineret med YFV-vaccine, vil blive inkluderet i undersøgelsen. Både kvindelige og mandlige frivillige vil blive rekrutteret.

Vi planlægger at tilmelde 50 raske frivillige mellem 18 og 45 år. For at nå disse tilmeldingsmål skal vi muligvis screene 200 emner. Alle forsøgspersoner vil modtage den FDA-godkendte YFV-17D-vaccine (ved den FDA-godkendte dosis og administrationsvej) én gang på dag 0 af studiebesøget. Blodprøver vil blive taget fra de frivillige på dag 0 og på planlagte tidspunkter efter vaccination. Det samlede volumen af ​​udtaget blod vil ikke overstige Røde Kors-grænsen på 473 ml på 56 dage.

De frivillige forsøgspersoner vil blive fastholdt på et 100ml - 150ml dagligt indtag af 2H2O med et mål om at opretholde 1,5-2% kropsvandberigelse (forudsat en samlet kropsvandomsætning på ~3,5 liter pr. dag hos raske, ambulante forsøgspersoner). Plasma- og spytprøver vil blive opnået under 2H2O-administrationsprotokollen til måling af kroppens 2H2O-berigelse.