Az antigénspecifikus limfociták forgalma a 17D ​​sárgaláz vakcinával végzett immunizálás után

Általánosságban elmondható, hogy a vírusfertőzésekre adott T-sejt-válasz három különböző szakaszban fordul elő: expanzió, összehúzódás és memória. A terjeszkedés során az antigén-specifikus CD8+ T-sejtek szaporodnak, hogy számuk növekedjen, valamint képesek lesznek elpusztítani a vírussal fertőzött sejteket, azaz „effektorokká” válnak. Amint a vírus kiürült, az effektorok 90-95%-a meghal. A megmaradt sejtek kis halmaza fokozatosan differenciálódik, memóriasejtekké válik, és élethosszig tartó védelmet nyújt. A sejtosztódás sebessége különbözik az effektorok létrehozásában és a memóriasejtek fenntartásában. Ezek a fogalmak elsősorban egérvizsgálatokból származnak. A humán CD8+ T-sejt-forgalom nem teljesen ismert, mivel hiányoznak a humán vizsgálatokhoz megfelelő eszközök és technikák.

Ebben a protokollban a kutatók az effektor CD8+ T-sejtek élettartamát és bomlási görbéjét, valamint a memória CD8+ (CD28+/- alcsoportok) T-sejtek homeosztatikus forgalmának sebességét szeretnék megérteni 17D YFV immunizálás után Dr. Marc Hellerstein által kifejlesztett innovatív módszerrel. csoport (a Berkeley-i Kaliforniai Egyetemen) a DNS-replikáció és a sejtburjánzás mérésére emberekben a természetben előforduló stabil izotóp, az úgynevezett deutérium (2H) felhasználásával. Ezt a technikát számos emberi sejttípus in vivo forgalmának nyomon követésére használták. A tanulmány kutatói azt tervezik, hogy 2H jelölést alkalmaznak az YFV-specifikus CD8+ T-sejtek nyomon követésére humán vakcinázottakban (csak a HLA-A2 pozitív résztvevők esetében). A T-sejt-epitóp (A2-NS4B214), amely a humán YFV-specifikus CD8+ T-sejtes válasz fő összetevője, elérhetősége lehetővé teszi a vírusspecifikus CD8+ T-sejtek longitudinális elemzését. Ennek a vizsgálatnak az egyedülálló tulajdonsága, hogy lehetővé teszi az YFV-specifikus CD8+ T-sejtek differenciálódásának követését emberben. Így a kutatók leküzdhetik a heterogenitásból adódó korlátokat a tömeges CD8+ T-sejteket bevonó keresztmetszeti vizsgálatok során.

Terveink szerint 50 egészséges, felnőtt önkéntes (18-45 éves) bevonását tervezzük az 1. és 2. projektbe, hogy tanulmányozzák a memória CD8 T-sejt válaszait. Minden alany megkapja az FDA által jóváhagyott YFV-17D vakcinát (az FDA által jóváhagyott dózisban és beadási módban). A CD28 expresszióját meghatározzuk, hogy kiderüljön, kapcsolódik-e az YFV-specifikus memória CD8 T-sejtek generálásához és/vagy fenntartásához. A CD28+ és a CD28-_YFV-specifikus CD8 T-sejtek közötti fenotípusos különbségeket vizsgáljuk, hogy meghatározzuk a hosszú élettartam különbségeit. Meghatározzuk a CD28+ és CD28 YFV-specifikus CD8 T-sejtek génexpressziós profilját. Vizsgálni fogjuk az IL-7 és IL-15 hatását az YFV-specifikus CD8 T-sejtek túlélésére. Ezt az információt a 0. napon, 14., 28. és 3-6 hónapon belül, 1-2 évvel és >5 évvel a vakcinázás után izolált YFV-specifikus sejtekből nyerjük.

A vizsgálatot a Hope Clinic of Emory Vaccine Centerben végzik. A vizsgálatba bevonják azokat a személyeket is, akik sárgaláz endémiás területekre terveznek utazni, és akiknek utazási célból szükségük van a vakcinára, valamint a nem utazókat. A potenciális résztvevőket az Emory Travel Well Clinic vagy a CDC alkalmazottak egészségügyi intézményéből, az Emory University campusáról vagy az Atlanta metró általános lakosságából toborozhatják rádiós és nyomtatott hirdetések, elektronikus levelek, internetes bejegyzések, szórólapok és plakátok segítségével. A vizsgálat megkezdése előtt be kell szerezni az Emory Egyetem IRB jóváhagyását.

Szűrőlátogatásra kerül sor a vizsgálatra való alkalmasság megállapítására. A tanulmányi eljárások megkezdése előtt aláírt, tájékozott hozzájárulási űrlapokat kell beszerezni. Elvégzik a felvételi és kizárási kritériumokat, valamint egy rövid anamnézist és fizikális vizsgálatot. Ezenkívül a résztvevőket phlebotomián kell átesnie a HLA típusának meghatározásához. Azokat a résztvevőket, akik pozitívak a HLA A202 allélra, felkérjük, hogy vegyenek részt ebben a vizsgálatban. Becslések szerint az USA kaukázusi lakosságának 25%-a lesz pozitív erre az allélra. Azoknak a résztvevőknek, akiknél ez az allél negatív lett, más vakcinakísérleteket ajánlanak fel, amelyeket az Emory Hope klinikán végeznek, és részvételük ebben a protokollban megszűnik.

A sárgaláz elleni vakcina beadása előtt meg kell határozni az oltással összefüggő nemkívánatos események kockázat-haszon arányát a sárgaláz-fertőzés kockázatához képest. Egészséges egyéneket is bevonnak a vizsgálatba, akiket korábban nem oltottak be YFV vakcinával. Női és férfi önkénteseket egyaránt toboroznak.

Terveink szerint 50 egészséges, 18 és 45 év közötti önkéntest veszünk fel. E beiratkozási célok elérése érdekében előfordulhat, hogy 200 tárgyat kell átvizsgálnunk. Minden alany megkapja az FDA által jóváhagyott YFV-17D vakcinát (az FDA által jóváhagyott dózisban és beadási módban) a vizsgálati látogatás 0. napján egyszer. Vérmintákat vesznek az önkéntesektől a 0. napon és az oltás utáni ütemezett időpontokban. A levett vér teljes mennyisége nem haladja meg a Vöröskereszt 473 ml-es határát 56 nap alatt.

A vizsgálatban részt vevő önkéntesek napi 100-150 ml 2H2O-bevitelt kapnak, azzal a céllal, hogy a test vízdúsítása 1,5-2%-kal maradjon fenn (feltételezve, hogy a test teljes vízforgalma kb. 3,5 liter naponta egészséges, járóbeteg alanyoknál). A plazma- és nyálmintákat a 2H2O beadási protokoll során veszik a test 2H2O-dúsításának mérésére.