Omzet van antigeenspecifieke lymfocyten na immunisatie met het 17D-gelekoortsvaccin

Over het algemeen vinden T-celreacties op virale infecties plaats in drie verschillende stadia: expansie, contractie en geheugen. Tijdens expansie prolifereren antigeen-specifieke CD8+ T-cellen om in aantal toe te nemen en krijgen ze het vermogen om met virus geïnfecteerde cellen te doden, d.w.z. worden 'effectoren'. Zodra het virus is verdwenen, sterft 90-95% van de effectoren. De kleine pool van resterende cellen differentieert geleidelijk om geheugencellen te worden en levenslange bescherming te bieden. De snelheid van celdeling verschilt in het genereren van effectoren en het onderhoud van geheugencellen. Deze concepten zijn voornamelijk ontleend aan muizenstudies. Menselijke CD8 + T-celvernieuwing wordt niet volledig begrepen vanwege het gebrek aan geschikte hulpmiddelen en technieken die geschikt zijn voor studies bij mensen.

In dit protocol willen de onderzoekers de levensduur en vervalcurve van effector CD8 + T-cellen en de snelheid van homeostatische omzet van geheugen CD8 + (CD28 +/- subsets) T-cellen na 17D ​​YFV-immunisatie begrijpen met behulp van een innovatieve methode ontwikkeld door Dr. Marc Hellerstein's groep (aan de University of California, Berkeley) voor het meten van DNA-replicatie en celproliferatie bij mensen met behulp van een natuurlijk voorkomende stabiele isotoop genaamd deuterium (2H). Deze techniek is gebruikt om de omzet van een aantal menselijke celtypen in vivo te volgen. De onderzoekers van deze studie zijn van plan om 2H-labeling te gebruiken om YFV-specifieke CD8+ T-cellen te volgen in menselijke gevaccineerden (alleen HLA-A2-positieve deelnemers). De beschikbaarheid van een T-celepitoop (A2-NS4B214), een belangrijk onderdeel van de humane YFV-specifieke CD8+ T-celrespons, maakt longitudinale analyse van virusspecifieke CD8+ T-cellen mogelijk. Het unieke aan deze studie is dat het de differentiatie van YFV-specifieke CD8+ T-cellen bij mensen mogelijk maakt. Zo kunnen de onderzoekers de inherente beperkingen als gevolg van heterogeniteit overwinnen in dwarsdoorsnedestudies waarbij bulk CD8 + T-cellen betrokken zijn.

We zijn van plan om 50 gezonde, volwassen vrijwilligers (18-45 jaar oud) in te schrijven voor Project 1 en 2 om geheugen-CD8 T-celresponsen te bestuderen. Alle proefpersonen zullen het door de FDA goedgekeurde YFV-17D-vaccin krijgen (in de door de FDA goedgekeurde dosis en toedieningsweg). CD28-expressie zal worden bepaald om te zien of deze is gekoppeld aan het genereren en/of onderhouden van YFV-specifieke geheugen-CD8-T-cellen. Fenotypische verschillen tussen CD28+ en CD28-_YFV-specifieke CD8 T-cellen zullen bestudeerd worden om verschillen in levensduur te bepalen. Genexpressieprofielen van CD28+ en CD28 YFV-specifieke CD8 T-cellen zullen worden bepaald. De invloed van IL-7 en IL-15 op de overleving van YFV-specifieke CD8 T-cellen zal bestudeerd worden. Deze informatie zal worden verkregen uit YFV-specifieke cellen die zijn geïsoleerd op dag 0, 14, 28 en 3 tot 6 maanden, 1-2 jaar en >5 jaar na vaccinatie.

De studie zal worden uitgevoerd in de Hope Clinic van het Emory Vaccine Center. Personen die van plan zijn om naar gelekoorts-endemische gebieden te reizen en die het vaccin nodig hebben voor reisdoeleinden, evenals niet-reizigers, zullen voor het onderzoek worden gerekruteerd. Potentiële deelnemers kunnen worden geworven uit de Emory Travel Well Clinic of de CDC-medewerkersgezondheid of de Emory University-campus of de algemene bevolking van metro Atlanta met behulp van radio- en gedrukte advertenties, elektronische mailings, internetberichten, flyers en posters. IRB-goedkeuring van Emory University zal worden verkregen voorafgaand aan de start van het onderzoek.

Er zal een screeningbezoek plaatsvinden om te bepalen of u in aanmerking komt voor de studie. Ondertekende geïnformeerde toestemmingsformulieren zullen worden verkregen voorafgaand aan de start van de onderzoeksprocedures. De in- en exclusiecriteria en een korte anamnese en lichamelijk onderzoek zullen worden uitgevoerd. Bovendien wordt deelnemers gevraagd een aderlaten te ondergaan om het HLA-type te bepalen. Deelnemers die positief zijn voor het HLA A202-allel, zullen worden gevraagd om deel te nemen aan dit onderzoek. Geschat wordt dat 25% van de blanke Amerikaanse bevolking positief zal zijn voor dit allel. Deelnemers die negatief testen op dit allel, krijgen andere vaccinonderzoeken aangeboden die worden uitgevoerd in de Emory Hope-kliniek en hun deelname aan dit protocol wordt beëindigd.

Voorafgaand aan de toediening van het gelekoortsvaccin wordt de risico-batenverhouding van de vaccingerelateerde bijwerkingen versus het risico op gele koorts bepaald. Gezonde personen die niet eerder met het YFV-vaccin zijn gevaccineerd, zullen in het onderzoek worden opgenomen. Er worden zowel vrouwelijke als mannelijke vrijwilligers geworven.

We zijn van plan om 50 gezonde vrijwilligers tussen de 18 en 45 jaar in te schrijven. Om aan deze inschrijvingsdoelen te voldoen, moeten we mogelijk 200 proefpersonen screenen. Alle proefpersonen zullen eenmaal op dag 0 van het studiebezoek het door de FDA goedgekeurde YFV-17D-vaccin krijgen (in de door de FDA goedgekeurde dosis en toedieningsweg). Op dag 0 en op geplande tijdstippen na vaccinatie zullen bloedmonsters van de vrijwilligers worden afgenomen. Het totale afgenomen bloedvolume zal de limiet van het Rode Kruis van 473 ml in 56 dagen niet overschrijden.

De studievrijwilligers zullen worden gehouden op een dagelijkse inname van 100 ml - 150 ml 2H2O, met als doel een verrijking van 1,5-2% lichaamsvocht te behouden (uitgaande van een totale lichaamsvochtomzet van ~3,5 liter per dag bij gezonde, ambulante proefpersonen). Tijdens het 2H2O-toedieningsprotocol worden plasma- en speekselmonsters genomen om de 2H2O-verrijking van het lichaam te meten.