Omsättning av antigenspecifika lymfocyter efter immunisering med 17D gula febervaccinet

Generellt förekommer T-cellssvar på virusinfektioner i tre distinkta stadier: expansion, sammandragning och minne. Under expansion prolifererar antigenspecifika CD8+ T-celler för att öka i antal samt förvärva förmågan att döda virusinfekterade celler, dvs bli "effektorer". När viruset väl är borta dör 90-95 % av effektorerna. Den lilla poolen av kvarvarande celler differentierar sig gradvis för att bli minnesceller och ge livslångt skydd. Hastigheten för celldelning är distinkt i genereringen av effektorer och minnescellsunderhåll. Dessa koncept har i första hand härletts från musstudier. Human CD8+ T-cellomsättning är inte helt klarlagd på grund av bristen på lämpliga verktyg och tekniker som är lämpliga för mänskliga studier.

I detta protokoll vill forskarna förstå livslängden och sönderfallskurvan för effektor CD8+ T-celler och hastigheten för homeostatisk omsättning av minnes CD8+ (CD28+/- subset) T-celler efter 17D YFV-immunisering med en innovativ metod utvecklad av Dr. Marc Hellersteins grupp (vid University of California, Berkeley) för att mäta DNA-replikation och cellproliferation hos människor med hjälp av en naturligt förekommande stabil isotop som kallas deuterium (2H). Denna teknik har använts för att spåra omsättningen av ett antal mänskliga celltyper in vivo. Forskarna i denna studie planerar att använda 2H-märkning för att spåra YFV-specifika CD8+ T-celler i humana vaccinerade (endast HLA-A2-positiva deltagare). Tillgängligheten av en T-cellsepitop (A2-NS4B214), en huvudkomponent i det humana YFV-specifika CD8+ T-cellsvaret, möjliggör longitudinell analys av virusspecifika CD8+ T-celler. Det unika med denna studie är att den möjliggör spårning av differentiering av YFV-specifika CD8+ T-celler hos människor. Således kan forskarna övervinna de inneboende begränsningarna på grund av heterogenitet i tvärsnittsstudier som involverar bulk CD8+ T-celler.

Vi planerar att anmäla 50 friska, vuxna frivilliga (18-45 år) till projekt 1 och 2 för att studera minnes CD8 T-cellsvar. Alla försökspersoner kommer att få det FDA-godkända YFV-17D-vaccinet (vid FDA-godkänd dos och administreringsväg). CD28-uttryck kommer att bestämmas för att se om det är kopplat till generering och/eller underhåll av YFV-specifika minnes-CD8 T-celler. Fenotypiska skillnader mellan CD28+ och CD28-_YFV-specifika CD8 T-celler kommer att studeras för att fastställa skillnader i livslängd. Genuttrycksprofiler för CD28+ och CD28 YFV-specifika CD8 T-celler kommer att bestämmas. Inverkan av IL-7 och IL-15 på överlevnaden av YFV-specifika CD8 T-celler kommer att studeras. Denna information kommer att erhållas från YFV-specifika celler isolerade dag 0, 14, 28 och 3 till 6 månader, 1-2 år och >5 år efter vaccination.

Studien kommer att genomföras vid Hope Clinic of Emory Vaccine Center. Individer som planerar att resa till gula febern endemiska områden och som behöver vaccinet för reseändamål såväl som icke-resenärer kommer att rekryteras till studien. Potentiella deltagare kan rekryteras från Emory Travel Well Clinic eller CDC:s anställdas hälsa eller Emory University campus eller den allmänna befolkningen i tunnelbanan Atlanta med hjälp av radio- och tryckta annonser, elektroniska utskick, internetinlägg, flygblad och affischer. IRB-godkännande från Emory University kommer att erhållas innan studien påbörjas.

Det kommer att göras ett screeningbesök för att fastställa om studien är behörig. Undertecknade formulär för informerat samtycke kommer att erhållas innan studieprocedurer påbörjas. Inklusions- och uteslutningskriterierna och en kort historia och fysisk undersökning kommer att utföras. Dessutom kommer deltagarna att bli ombedda att genomgå flebotomi för att bestämma HLA-typen. Deltagare som är positiva för HLA A202-allelen kommer att uppmanas att delta i denna studie. Det uppskattas att 25 % av den kaukasiska befolkningen i USA kommer att vara positiva för denna allel. Deltagare som testar negativt för denna allel kommer att erbjudas andra vaccinförsök som genomförs på Emory Hope-kliniken och deras deltagande i detta protokoll kommer att upphöra.

Före administrering av gula febern-vaccinet bestäms risk-nytta-förhållandet mellan de vaccinrelaterade biverkningarna och risken att insjukna i gula febern. Friska individer som inte tidigare vaccinerats med YFV-vaccin kommer att inkluderas i studien. Både kvinnliga och manliga volontärer kommer att rekryteras.

Vi planerar att registrera 50 friska frivilliga mellan 18 och 45 år. För att uppfylla dessa registreringsmål kan vi behöva screena 200 ämnen. Alla försökspersoner kommer att få det FDA-godkända YFV-17D-vaccinet (vid FDA-godkänd dos och administreringssätt) en gång på dag 0 av studiebesöket. Blodprover kommer att erhållas från frivilliga på dag 0 och på schemalagda tidpunkter efter vaccination. Den totala blodvolymen kommer inte att överskrida Röda Korsets gräns på 473 ml på 56 dagar.

Studiefrivilliga kommer att hållas på ett 100ml - 150ml dagligt intag av 2H2O, med ett mål att bibehålla 1,5-2% kroppsvattenberikning (förutsatt att en total kroppsvattenomsättning på ~3,5 liter per dag hos friska, ambulerande försökspersoner). Plasma- och salivprover kommer att tas under 2H2O-administrationsprotokollet för mätning av kroppens 2H2O-anrikning.