Recambio de linfocitos específicos de antígeno después de la inmunización con la vacuna contra la fiebre amarilla 17D

En general, las respuestas de las células T a las infecciones virales ocurren en tres etapas distintas: expansión, contracción y memoria. Durante la expansión, las células T CD8+ específicas de antígeno proliferan para aumentar en número y adquieren la capacidad de matar células infectadas por virus, es decir, se convierten en "efectores". Una vez que se elimina el virus, el 90-95% de los efectores mueren. El pequeño grupo de células restantes se diferencia gradualmente para convertirse en células de memoria y brindar protección de por vida. La tasa de división celular es distinta en la generación de efectores y el mantenimiento de las células de memoria. Estos conceptos se han derivado principalmente de estudios con ratones. El recambio de células T CD8+ humanas no se comprende por completo debido a la falta de herramientas y técnicas adecuadas para estudios en humanos.

En este protocolo, los investigadores quieren comprender la vida útil y la curva de descomposición de las células T CD8+ efectoras y la tasa de renovación homeostática de las células T CD8+ de memoria (CD28+/- subconjuntos) después de la inmunización con 17D YFV utilizando un método innovador desarrollado por el Dr. Marc Hellerstein. (en la Universidad de California, Berkeley) para medir la replicación del ADN y la proliferación celular en humanos usando un isótopo estable natural llamado deuterio (2H). Esta técnica se ha utilizado para rastrear el recambio de varios tipos de células humanas in vivo. Los investigadores de este estudio planean usar el marcaje 2H para rastrear las células T CD8+ específicas de YFV en vacunas humanas (solo participantes positivos para HLA-A2). La disponibilidad de un epítopo de células T (A2-NS4B214), un componente principal de la respuesta de células T CD8+ específicas de YFV humano, permite el análisis longitudinal de células T CD8+ específicas de virus. La característica única de este estudio es que permite el seguimiento de la diferenciación de células T CD8+ específicas de YFV en humanos. Por lo tanto, los investigadores pueden superar las limitaciones inherentes debido a la heterogeneidad en los estudios transversales que involucran células T CD8+ a granel.

Planeamos inscribir a 50 voluntarios adultos sanos (de 18 a 45 años de edad) para los Proyectos 1 y 2 para estudiar las respuestas de las células T CD8 de memoria. Todos los sujetos recibirán la vacuna YFV-17D aprobada por la FDA (en la dosis y vía de administración aprobadas por la FDA). Se determinará la expresión de CD28 para ver si está acoplada a la generación y/o mantenimiento de células T CD8 de memoria específicas de YFV. Se estudiarán las diferencias fenotípicas entre las células T CD8 específicas de CD28+ y CD28-_YFV para determinar las diferencias en la longevidad. Se determinarán los perfiles de expresión génica de las células T CD8 CD28+ y CD28 YFV específicas. Se estudiará la influencia de IL-7 e IL-15 en la supervivencia de las células T CD8 específicas de YFV. Esta información se obtendrá de células específicas de YFV aisladas en el día 0, 14, 28 y 3 a 6 meses, 1-2 años y > 5 años después de la vacunación.

El estudio se llevará a cabo en Hope Clinic of Emory Vaccine Center. Las personas que planean viajar a áreas endémicas de fiebre amarilla y que requieren la vacuna para fines de viaje, así como las personas que no viajan, serán reclutadas para el estudio. Los participantes potenciales pueden ser reclutados de la Emory Travel Well Clinic o de la salud de los empleados de los CDC o del campus de la Universidad de Emory o de la población general del área metropolitana de Atlanta mediante anuncios impresos y de radio, correos electrónicos, publicaciones en Internet, volantes y carteles. Se obtendrá la aprobación del IRB de la Universidad de Emory antes del inicio del estudio.

Habrá una visita de selección para determinar la elegibilidad para el estudio. Se obtendrán formularios de consentimiento informado firmados antes del inicio de los procedimientos del estudio. Se realizarán los criterios de inclusión y exclusión y una breve anamnesis y exploración física. Además, se les pedirá a los participantes que se sometan a una flebotomía para determinar el tipo de HLA. A los participantes que sean positivos para el alelo HLA A202 se les pedirá que participen en este estudio. Se estima que el 25% de la población caucásica de EE. UU. será positiva para este alelo. A los participantes que den negativo para este alelo se les ofrecerán otros ensayos de vacunas que se están realizando en la clínica Emory Hope y finalizará su participación en este protocolo.

Previo a la administración de la vacuna contra la fiebre amarilla, se determina la relación riesgo-beneficio de los eventos adversos relacionados con la vacuna versus el riesgo de contraer fiebre amarilla. Se incluirán en el estudio personas sanas que no hayan sido vacunadas previamente con la vacuna YFV. Se reclutarán tanto mujeres como hombres voluntarios.

Planeamos inscribir a 50 voluntarios sanos entre 18 y 45 años de edad. Para cumplir con estos objetivos de inscripción, es posible que necesitemos evaluar 200 sujetos. Todos los sujetos recibirán la vacuna YFV-17D aprobada por la FDA (en la dosis y vía de administración aprobadas por la FDA) una vez el día 0 de la visita del estudio. Se obtendrán muestras de sangre de los voluntarios el día 0 y en puntos de tiempo programados después de la vacunación. El volumen total de sangre extraída no excederá el límite de la Cruz Roja de 473 ml en 56 días.

Los voluntarios del estudio se mantendrán con una ingesta diaria de 100ml - 150ml de 2H2O, con el objetivo de mantener un enriquecimiento de agua corporal del 1,5-2% (suponiendo una renovación total del agua corporal de ~3,5 litros por día en sujetos ambulatorios sanos). Las muestras de plasma y saliva se obtendrán durante el protocolo de administración de 2H2O para medir el enriquecimiento corporal de 2H2O.