17D 黄热病疫苗免疫后抗原特异性淋巴细胞的更新

一般来说，T 细胞对病毒感染的反应发生在三个不同的阶段：扩张、收缩和记忆。 在扩增过程中，抗原特异性 CD8+ T 细胞增殖以增加数量并获得杀死病毒感染细胞的能力，即成为“效应细胞”。 一旦病毒被清除，90-95% 的效应器就会死亡。 剩下的一小部分细胞逐渐分化成为记忆细胞并提供终生保护。 细胞分裂的速率在效应器的产生和记忆细胞的维持方面是不同的。 这些概念主要来自小鼠研究。 由于缺乏适用于人类研究的适当工具和技术，人类 CD8+ T 细胞的周转率尚未完全了解。

在此协议中，研究人员希望使用 Marc Hellerstein 博士开发的创新方法了解 17 天 YFV 免疫后效应 CD8+ T 细胞的寿命和衰减曲线以及记忆 CD8+（CD28+/- 子集）T 细胞的稳态周转率小组（在加州大学伯克利分校）使用一种称为氘 (2H) 的天然稳定同位素来测量人类的 DNA 复制和细胞增殖。 该技术已被用于跟踪体内多种人类细胞类型的更新。 本研究的研究人员计划使用 2H 标记来追踪人类疫苗接种者（仅限 HLA-A2 阳性参与者）中 YFV 特异性 CD8+ T 细胞。 T 细胞表位 (A2-NS4B214)（人类 YFV 特异性 CD8+ T 细胞反应的主要组成部分）的可用性允许对病毒特异性 CD8+ T 细胞进行纵向分析。 这项研究的独特之处在于它允许跟踪人类 YFV 特异性 CD8+ T 细胞的分化。 因此，研究人员可以克服在涉及大量 CD8+ T 细胞的横断面研究中由于异质性导致的固有局限性。

我们计划为项目 1 和 2 招募 50 名健康的成年志愿者（18-45 岁）来研究记忆 CD8 T 细胞反应。 所有受试者都将接受 FDA 批准的 YFV-17D 疫苗（以 FDA 批准的剂量和给药途径）。 将确定 CD28 表达以查看它是否与 YFV 特异性记忆 CD8 T 细胞的产生和/或维持相关。 将研究 CD28+ 和 CD28-_YFV 特异性 CD8 T 细胞之间的表型差异，以确定寿命差异。 将确定 CD28+ 和 CD28 YFV 特异性 CD8 T 细胞的基因表达谱。 将研究 IL-7 和 IL-15 对 YFV 特异性 CD8 T 细胞存活的影响。 该信息将从接种疫苗后第 0、14、28 和 3 至 6 个月、1-2 年和 >5 年时分离的 YFV 特异性细胞获得。

该研究将在埃默里疫苗中心的希望诊所进行。 计划前往黄热病流行地区并需要疫苗进行旅行的个人以及非旅行者将被招募到研究中。 可以使用广播和印刷广告、电子邮件、互联网帖子、传单和海报从埃默里旅行健康诊所或疾病预防控制中心员工健康中心或埃默里大学校园或亚特兰大都会区的普通人群中招募潜在参与者。 埃默里大学的 IRB 批准将在研究开始之前获得。

将进行筛选访问以确定研究的资格。 在研究程序开始之前将获得签署的知情同意书。 将执行纳入和排除标准以及简要病史和体格检查。 此外，将要求参与者进行静脉切开术以确定 HLA 类型。 HLA A202 等位基因呈阳性的参与者将被要求参与这项研究。 据估计，25% 的美国高加索人对该等位基因呈阳性。 该等位基因检测呈阴性的参与者将接受在埃默里霍普诊所进行的其他疫苗试验，他们将终止参与本协议。

在接种黄热病疫苗之前，确定疫苗相关不良事件与感染黄热病风险的风险收益比。 之前未接种过 YFV 疫苗的健康个体将被纳入研究。 将招募女性和男性志愿者。

我们计划招募 50 名 18 至 45 岁之间的健康志愿者。 为了达到这些招生目标，我们可能需要筛选 200 名受试者。 所有受试者将在研究访问的第 0 天接受一次 FDA 批准的 YFV-17D 疫苗（以 FDA 批准的剂量和给药途径）。 将在第 0 天和疫苗接种后的预定时间点从志愿者那里获取血液样本。 56天内抽取的血液总量不会超过红十字会规定的473毫升。

研究志愿者将每天摄入 100 毫升至 150 毫升的 2H2O，目标是保持 1.5-2% 的体内水分富集（假设健康的门诊受试者体内总水分周转量为每天约 3.5 升）。 血浆和唾液样本将在 2H2O 给药方案期间获得，用于测量身体 2H2O 富集。