Revitalização de Linfócitos Específicos de Antígenos Após Imunização com a Vacina de Febre Amarela 17D

Em geral, as respostas das células T às infecções virais ocorrem em três estágios distintos: expansão, contração e memória. Durante a expansão, as células T CD8+ específicas do antígeno proliferam para aumentar em número, bem como adquirir a capacidade de matar células infectadas por vírus, ou seja, tornam-se 'efetores'. Uma vez eliminado o vírus, 90-95% dos efetores morrem. O pequeno pool de células restantes se diferencia gradualmente para se tornar células de memória e fornecer proteção ao longo da vida. A taxa de divisão celular é distinta na geração de efetores e na manutenção das células de memória. Esses conceitos foram derivados principalmente de estudos com camundongos. A rotatividade de células T CD8+ humanas não é completamente compreendida devido à falta de ferramentas e técnicas apropriadas para estudos em humanos.

Neste protocolo, os pesquisadores querem entender a vida útil e a curva de declínio das células T CD8+ efetoras e a taxa de renovação homeostática das células T CD8+ (subconjuntos CD28+/-) de memória após a imunização 17D YFV usando um método inovador desenvolvido pelo Dr. Marc Hellerstein grupo (na Universidade da Califórnia, Berkeley) para medir a replicação do DNA e a proliferação celular em humanos usando um isótopo estável de ocorrência natural chamado deutério (2H). Esta técnica tem sido usada para rastrear o volume de negócios de vários tipos de células humanas in vivo. Os pesquisadores deste estudo planejam usar a marcação 2H para rastrear células T CD8+ específicas de YFV em vacinados humanos (somente participantes positivos para HLA-A2). A disponibilidade de um epítopo de células T (A2-NS4B214), um componente principal da resposta de células T CD8+ específicas de YFV humano, permite a análise longitudinal de células T CD8+ específicas de vírus. A característica única deste estudo é que ele permite o rastreamento da diferenciação de células T CD8+ específicas de YFV em humanos. Assim, os pesquisadores podem superar as limitações inerentes devido à heterogeneidade em estudos transversais que envolvem células T CD8+ em massa.

Planejamos inscrever 50 voluntários adultos saudáveis ​​(18-45 de idade) para os Projetos 1 e 2 para estudar as respostas das células T CD8 de memória. Todos os indivíduos receberão a vacina YFV-17D aprovada pela FDA (na dose e via de administração aprovadas pela FDA). A expressão de CD28 será determinada para ver se está acoplada à geração e/ou manutenção de células T CD8 de memória específicas de YFV. Diferenças fenotípicas entre CD28+ e células CD28-_YFV específicas serão estudadas para determinar diferenças na longevidade. Serão determinados os perfis de expressão gênica de células T CD8 específicas de CD28+ e CD28 YFV. A influência de IL-7 e IL-15 na sobrevida de células T CD8 específicas para YFV será estudada. Esta informação será obtida de células específicas de YFV isoladas no Dia 0, 14, 28 e 3 a 6 meses, 1-2 anos e > 5 anos após a vacinação.

O estudo será conduzido na Hope Clinic do Emory Vaccine Center. Indivíduos que planejam viajar para áreas endêmicas de febre amarela e que precisam da vacina para fins de viagem, bem como não viajantes, serão recrutados para o estudo. Os participantes em potencial podem ser recrutados na Emory Travel Well Clinic ou na saúde dos funcionários do CDC ou no campus da Emory University ou na população em geral da região metropolitana de Atlanta usando anúncios impressos e de rádio, correspondência eletrônica, postagens na Internet, folhetos e pôsteres. A aprovação do IRB da Emory University será obtida antes do início do estudo.

Haverá uma visita de triagem para determinar a elegibilidade para o estudo. Formulários de consentimento informado assinados serão obtidos antes do início dos procedimentos do estudo. Serão realizados os critérios de inclusão e exclusão e breve anamnese e exame físico. Além disso, os participantes serão submetidos a flebotomia para determinar o tipo de HLA. Os participantes positivos para o alelo HLA A202 serão convidados a participar deste estudo. Estima-se que 25% da população caucasiana dos EUA será positiva para esse alelo. Os participantes com teste negativo para esse alelo receberão outros testes de vacinas que estão sendo conduzidos na clínica Emory Hope e sua participação neste protocolo será encerrada.

Antes da administração da vacina contra febre amarela, é determinada a relação risco-benefício dos eventos adversos relacionados à vacina versus o risco de contrair febre amarela. Indivíduos saudáveis ​​que não foram previamente vacinados com a vacina YFV serão incluídos no estudo. Serão recrutados voluntários femininos e masculinos.

Planejamos inscrever 50 voluntários saudáveis ​​entre 18 e 45 anos de idade. Para atender a essas metas de inscrição, talvez seja necessário selecionar 200 indivíduos. Todos os indivíduos receberão a vacina YFV-17D aprovada pela FDA (na dose e via de administração aprovadas pela FDA) uma vez no dia 0 da visita do estudo. Amostras de sangue serão obtidas dos voluntários no Dia 0 e em pontos de tempo programados após a vacinação. O volume total de sangue coletado não excederá o limite da Cruz Vermelha de 473 ml em 56 dias.

Os voluntários do estudo serão mantidos com uma ingestão diária de 100ml - 150ml de 2H2O, com o objetivo de manter 1,5-2% de enriquecimento de água corporal (assumindo a renovação total da água corporal de ~3,5 litros por dia em indivíduos saudáveis ​​e ambulatoriais). Amostras de plasma e saliva serão obtidas durante o protocolo de administração de 2H2O para medição do enriquecimento corporal de 2H2O.