Obrat antigenně specifických lymfocytů po imunizaci 17D vakcínou proti žluté zimnici

Obecně se reakce T buněk na virové infekce vyskytují ve třech odlišných fázích: expanze, kontrakce a paměť. Během expanze antigen-specifické CD8+ T buňky proliferují, aby se zvýšil jejich počet a také získaly schopnost zabíjet buňky infikované virem, tj. stát se „efektory“. Jakmile je virus odstraněn, 90-95% efektorů zemře. Malá zásoba zbývajících buněk se postupně diferencuje, aby se stala paměťovými buňkami a poskytují celoživotní ochranu. Rychlost buněčného dělení je odlišná při vytváření efektorů a udržování paměťových buněk. Tyto koncepty byly primárně odvozeny ze studií na myších. Obrat lidských CD8+ T buněk není zcela pochopen kvůli nedostatku vhodných nástrojů a technik vhodných pro studie na lidech.

V tomto protokolu chtějí vědci porozumět délce života a křivce rozpadu efektorových CD8+ T buněk a rychlosti homeostatického obratu paměťových CD8+ (CD28+/- podskupin) T buněk po 17D YFV imunizaci pomocí inovativní metody vyvinuté Dr. Marcem Hellersteinem skupina (na University of California, Berkeley) pro měření replikace DNA a buněčné proliferace u lidí pomocí přirozeně se vyskytujícího stabilního izotopu zvaného deuterium (2H). Tato technika byla použita ke sledování obratu řady typů lidských buněk in vivo. Výzkumníci této studie plánují použít 2H značení ke sledování YFV specifických CD8+ T buněk u lidských očkovaných (pouze HLA-A2 pozitivní účastníci). Dostupnost T buněčného epitopu (A2-NS4B214), hlavní složky lidské YFV specifické CD8+ T buněčné odpovědi, umožňuje longitudinální analýzu virově specifických CD8+ T buněk. Jedinečným rysem této studie je, že umožňuje sledování diferenciace YFV specifických CD8+ T buněk u lidí. Vědci tak mohou překonat přirozená omezení způsobená heterogenitou v průřezových studiích, které zahrnují hromadné CD8+ T buňky.

Plánujeme zapsat 50 zdravých dospělých dobrovolníků (18-45 let) do projektů 1 a 2, aby studovali odpovědi paměťových CD8 T buněk. Všechny subjekty obdrží FDA schválenou vakcínu YFV-17D (v dávce a způsobu podání schválené FDA). Bude stanovena exprese CD28, aby se zjistilo, zda je spojena s generováním a/nebo udržováním YFV-specifických paměťových CD8 T buněk. Budou studovány fenotypové rozdíly mezi CD28+ a CD28-_YFV-specifickými CD8 T buňkami, aby se určily rozdíly v dlouhověkosti. Budou stanoveny profily genové exprese CD28+ a CD28 YFV-specifických CD8 T buněk. Bude studován vliv IL-7 a IL-15 na přežití YFV-specifických CD8 T buněk. Tyto informace budou získány z buněk specifických pro YFV izolovaných v den 0, 14, 28 a 3 až 6 měsíců, 1-2 roky a >5 let po očkování.

Studie bude provedena na Hope Clinic of Emory Vaccine Center. Do studie budou přijati jedinci, kteří plánují cestovat do endemických oblastí žluté zimnice a kteří potřebují vakcínu pro účely cestování, stejně jako necestující. Potenciální účastníci mohou být rekrutováni z Emory Travel Well Clinic nebo CDC zdraví zaměstnanců nebo kampusu Emory University nebo obecné populace metra Atlanta pomocí rádiových a tištěných reklam, elektronické pošty, internetových příspěvků, letáků a plakátů. Před zahájením studie bude získán souhlas IRB od Emory University.

Proběhne screeningová návštěva, která určí způsobilost pro studii. Před zahájením studijních postupů budou získány podepsané formuláře informovaného souhlasu. Budou provedena kritéria pro zařazení a vyloučení a stručná anamnéza a fyzikální vyšetření. Kromě toho budou účastníci požádáni, aby podstoupili flebotomii k určení typu HLA. Účastníci, kteří jsou pozitivní na alelu HLA A202, budou požádáni o účast v této studii. Odhaduje se, že 25 % kavkazské populace USA bude pozitivních na tuto alelu. Účastníkům s negativním testem na tuto alelu budou nabídnuty další testy vakcín, které probíhají na klinice Emory Hope, a jejich účast v tomto protokolu bude ukončena.

Před aplikací vakcíny proti žluté zimnici se stanoví poměr rizika a přínosu nežádoucích účinků vakcíny oproti riziku nákazy žlutou zimnicí. Do studie budou zařazeni zdraví jedinci, kteří dosud nebyli očkováni vakcínou YFV. Budou přijati dobrovolníci i muži.

Plánujeme přihlásit 50 zdravých dobrovolníků ve věku 18 až 45 let. Abychom dosáhli těchto cílů pro zápis, možná budeme muset prověřit 200 subjektů. Všechny subjekty obdrží FDA schválenou vakcínu YFV-17D (v dávce a způsobu podání schválené FDA) jednou v den 0 studijní návštěvy. Vzorky krve budou odebrány od dobrovolníků v den 0 a v plánovaných časových bodech po vakcinaci. Celkový objem odebrané krve nepřekročí limit Červeného kříže 473 ml za 56 dní.

Dobrovolníci studie budou udržováni na denním příjmu 100 ml - 150 ml 2H2O s cílem udržet 1,5-2% obohacení tělesné vody (za předpokladu celkového obratu tělesné vody ~3,5 litrů za den u zdravých ambulantních subjektů). Vzorky plazmy a slin budou odebrány během protokolu podávání 2H2O pro měření obohacení těla 2H2O.