Chargement d'antigène en une seule étape et activation du TLR des cellules dendritiques chez les patients atteints de mélanome

1. Justification L'immunothérapie appliquant des cellules dendritiques (DC) générées ex vivo et chargées d'antigène tumoral a maintenant été introduite avec succès en clinique. Un nombre limité mais constant de réponses immunologiques et cliniques objectives a été observé. Jusqu'à présent, on ne sait toujours pas pourquoi certains patients répondent et d'autres non, mais il existe un consensus général sur le fait que les protocoles actuels appliqués pour générer des DC peuvent ne pas entraîner l'induction de réponses Th1 optimales. Les chercheurs et d'autres ont démontré que la maturation des DC est l'un des facteurs cruciaux, non seulement pour une migration efficace des DC, mais aussi pour induire des réponses immunitaires anti-tumorales efficaces chez les patients cancéreux. Actuellement, le « golden standard » utilisé pour faire mûrir les DC consiste en un cocktail de cytokines pro-inflammatoires (IL-1b, IL-6, TNFa) et de prostaglandine E2 (PGE2). Cependant, des données récentes sur la souris ont démontré que la maturation des DC uniquement par des cytokines pro-inflammatoires produisait des DC qui soutenaient l'expansion clonale des lymphocytes T, mais ne réussissaient pas à diriger efficacement la différenciation des lymphocytes T effecteurs. Fait intéressant, les DC mûries en présence de ligands du récepteur de type Toll (TLR) ont pu induire une fonction effectrice complète des lymphocytes T et déclencher des réponses immunitaires plus puissantes. Les chercheurs ont récemment identifié des vaccins contre les maladies infectieuses qui contiennent des ligands TLR et sont capables d'induire la maturation des DC. Cette connaissance fournit une nouvelle application pour ces agents applicables en clinique : les stimulateurs DC de qualité clinique. Un protocole de maturation de DC de qualité clinique est développé dans lequel des ligands TLR (vaccins préventifs) et PGE2 sont combinés, ce qui a entraîné la génération de DC matures qui sécrètent des niveaux élevés de la cytokine clé IL-12. De plus, ces DC matures par ligand TLR (TLR-DC) ont induit des cellules T sécrétant des niveaux au moins 20 fois plus élevés des cytokines effectrices IFNa et TNFa par rapport aux DC matures en l'absence de ligands TLR.

   Dans le groupe de Kris Thielemans et il a été montré que la capacité de stimulation des lymphocytes T des DC pulsées par des peptides peut être grandement améliorée en leur fournissant trois adjuvants moléculaires différents par électroporation avec de l'ARNm codant pour un soi-disant TriMix de ligand CD40 (CD40L) , CD70 et une forme constitutivement active de TLR4 (caTLR4). La combinaison de l'électroporation CD40L et caTLR4 imiterait la ligature CD40 et la signalisation TLR4 du DC et générerait des DC sécrétant des cytokines/chimiokines phénotypiquement matures, comme cela a été montré pour la ligature CD40 et TLR4 par l'ajout de CD40L soluble et de lipopolysaccharide. D'autre part, l'introduction de CD70 dans le DC fournirait un signal de costimulation aux lymphocytes T naïfs CD27+ en inhibant l'apoptose des lymphocytes T activés et en favorisant la prolifération des lymphocytes T.

   En conclusion, ces données in vitro démontrent que le TLR-DC et le Trimix DC sont des candidats prometteurs pour améliorer les réponses immunologiques et cliniques dans l'immunothérapie du cancer.

2. Objectifs Il s'agit d'une étude exploratoire, composée de deux parties. Dans la partie I, une augmentation de dose est effectuée et l'objectif principal est la sécurité des différentes doses de TLR-DC et de Trimix DC. Dans la partie II, la vaccination Trimix DC sera comparée à la vaccination TLR-DC et l'objectif principal de cette partie est la réponse immunologique, la toxicité et l'efficacité clinique étant des objectifs secondaires. Ces études fourniront des données importantes sur la sécurité et les effets immunologiques du TLR-DC et du Trimix DC.
3. Conception de l'étude La partie I de cette étude est une étude ouverte d'escalade de dose. La partie II de cette étude est une étude de phase II randomisée en ouvert.
4. Population d'étude Notre population d'étude se compose de patients atteints de mélanome, avec une expression prouvée des antigènes tumoraux associés au mélanome gp100 et de la tyrosinase. Les patients atteints de mélanome présentant des métastases ganglionnaires régionales chez lesquels une dissection radicale des ganglions lymphatiques est réalisée dans les 2 mois suivant l'inclusion dans cette étude (ci-après dénommé stade III) et les patients atteints de mélanome présentant des métastases à distance mesurables (ci-après dénommé stade IV) seront inclus .
5. Principaux critères d'évaluation de l'étude Les principaux objectifs de l'étude sont d'étudier la toxicité du TLR-DC et du Trimix DC par escalade de dose du nombre de DC dans la partie I, et d'étudier les réponses immunologiques lors de la vaccination contre les DC dans la partie II de l'étude.

Les réponses immunologiques sont :

1. L'activation des cellules immunitaires in vivo.
2. La réponse immunologique induite avec le TLR-DC et le Trimix DC chargés d'ARNm codant pour les antigènes tumoraux associés au mélanome (gp100 et tyrosinase).

La sécurité et l'efficacité clinique sont des objectifs secondaires.