Одноэтапная загрузка антигеном и активация TLR дендритных клеток у пациентов с меланомой

1. Обоснование Иммунотерапия с использованием дендритных клеток (ДК), полученных ex vivo и нагруженных опухолевым антигеном, в настоящее время успешно внедрена в клинику. Наблюдалось ограниченное, но постоянное количество объективных иммунологических и клинических ответов. До сих пор остается неясным, почему одни пациенты реагируют, а другие нет, но существует общее мнение, что текущие протоколы, применяемые для создания DC, могут не приводить к индукции оптимальных ответов Th1. Исследователи и другие исследователи продемонстрировали, что созревание ДК является одним из решающих факторов не только для эффективной миграции ДК, но и для индукции эффективных противоопухолевых иммунных ответов у больных раком. В настоящее время «золотой стандарт», используемый для созревания DC, состоит из коктейля провоспалительных цитокинов (IL-1b, IL-6, TNFa) и простагландина E2 (PGE2). Недавние данные на мышах продемонстрировали, однако, что созревание ДК исключительно провоспалительными цитокинами дает ДК, которые поддерживают клональную экспансию Т-клеток, но не могут эффективно направлять дифференцировку эффекторных Т-клеток. Интересно, что ДК, созревшие в присутствии лигандов Toll-подобных рецепторов (TLR), были способны индуцировать полную эффекторную функцию Т-клеток и вызывать более сильные иммунные ответы. Исследователи недавно обнаружили вакцины против инфекционных заболеваний, которые содержат лиганды TLR и способны индуцировать созревание ДК. Эти знания обеспечивают новое применение для этих клинически применимых агентов: стимуляторы постоянного тока клинического класса. Разработан протокол созревания DC клинической степени, в котором сочетаются лиганды TLR (профилактические вакцины) и PGE2, что приводит к образованию зрелых DC, которые секретируют высокие уровни ключевого цитокина IL-12. Более того, эти созревшие ДК с TLR-лигандом (TLR-ДК) индуцировали Т-клетки, секретирующие по меньшей мере в 20 раз более высокие уровни эффекторных цитокинов IFNa и TNFa по сравнению с ДК, созревшими в отсутствие лигандов TLR.

   В группе Kris Thielemans было показано, что стимулирующая способность Т-клеток ДК с пептидным импульсом может быть значительно повышена путем предоставления им трех различных молекулярных адъювантов посредством электропорации с мРНК, кодирующей так называемый TriMix лиганда CD40 (CD40L). , CD70 и конститутивно активная форма TLR4 (caTLR4). Комбинация электропорации CD40L и caTLR4 будет имитировать лигирование CD40 и передачу сигналов TLR4 DC и генерировать фенотипически зрелые, секретирующие цитокины / хемокины DC, как было показано для лигирования CD40 и TLR4 посредством добавления растворимого CD40L и липополисахарида. С другой стороны, введение CD70 в DC будет обеспечивать костимулирующий сигнал для CD27+ наивных Т-клеток путем ингибирования апоптоза активированных Т-клеток и поддержки пролиферации Т-клеток.

   В заключение, эти данные in vitro демонстрируют, что как TLR-DC, так и Trimix DC являются многообещающими кандидатами для улучшения иммунологических и клинических ответов при иммунотерапии рака.

2. Цели. Это исследовательское исследование, состоящее из двух частей. В части I выполняется повышение дозы, и основной целью является безопасность различных доз TLR-DC и Trimix DC. В части II вакцинация Trimix DC будет сравниваться с вакцинацией TLR-DC, и основной целью этой части является иммунологический ответ, а токсичность и клиническая эффективность являются второстепенными целями. Эти исследования предоставят важные данные о безопасности и иммунологическом действии TLR-DC и Trimix DC.
3. Дизайн исследования. Часть I этого исследования представляет собой открытое исследование с повышением дозы. Часть II этого исследования представляет собой открытое рандомизированное исследование фазы II.
4. Исследуемая популяция Наша исследуемая популяция состоит из пациентов с меланомой, у которых доказана экспрессия ассоциированных с меланомой опухолевых антигенов gp100 и тирозиназы. Будут включены пациенты с меланомой с метастазами в регионарные лимфатические узлы, которым проведена радикальная диссекция лимфатических узлов в течение 2 месяцев после включения в это исследование (далее именуемая как стадия III), и пациенты с меланомой с поддающимися измерению отдаленными метастазами (далее именуемые как стадия IV). .
5. Основные конечные точки исследования Основными целями исследования являются изучение токсичности TLR-DC и Trimix DC путем увеличения дозы количества DC в части I и изучение иммунологических ответов после вакцинации DC в части II исследования.

Иммунологические реакции:

1. Активация иммунных клеток in vivo.
2. Иммунологический ответ, индуцированный TLR-DC и Trimix DC, нагруженными мРНК, кодирующей опухолевые антигены, ассоциированные с меланомой (gp100 и тирозиназу).

Безопасность и клиническая эффективность являются второстепенными целями.