Enkelttrins antigenindlæsning og TLR-aktivering af dendritiske celler hos melanompatienter

1. Baggrund Immunterapi med anvendelse af ex vivo-genererede og tumorantigen-ladede dendritiske celler (DC) er nu med succes blevet introduceret i klinikken. Et begrænset, men konsistent, antal objektive immunologiske og kliniske responser er blevet observeret. Indtil videre er det stadig uklart, hvorfor nogle patienter reagerer og andre ikke, men der er en generel konsensus om, at de nuværende protokoller, der anvendes til at generere DC, muligvis ikke resulterer i induktion af optimale Th1-responser. Efterforskerne og andre har vist, at DC-modning er en af ​​de afgørende faktorer, ikke kun for effektiv DC-migrering, men også for at inducere effektive antitumor-immunresponser hos cancerpatienter. I øjeblikket består den "gyldne standard", der bruges til at modne DC, af en cocktail af pro-inflammatoriske cytokiner (IL-1b, IL-6, TNFa) og prostaglandin E2 (PGE2). Nylige musedata viste imidlertid, at modning af DC ved udelukkende pro-inflammatoriske cytokiner gav DC, der understøttede T-celle klonal ekspansion, men ikke effektivt dirigerede effektor T-celledifferentiering. Interessant nok var DC modnet i nærvær af Toll-lignende receptor (TLR)-ligander i stand til at inducere fuld T-celle-effektorfunktion og frigivet mere potente immunresponser. Efterforskerne har for nylig identificeret vacciner mod infektionssygdomme, der indeholder TLR-ligander og er i stand til at inducere DC-modning. Denne viden giver en ny anvendelse for disse klinisk anvendelige midler: DC-stimulatorer af klinisk kvalitet. En klinisk grad DC-modningsprotokol udvikles, hvor TLR-ligander (forebyggende vacciner) og PGE2 kombineres, hvilket resulterede i dannelsen af ​​moden DC, der udskiller høje niveauer af nøglecytokinet IL-12. Desuden inducerede disse TLR-ligandmodnede DC (TLR-DC) T-celler, der udskiller mindst 20 gange højere niveauer af effektorcytokinerne IFNa og TNFa sammenlignet med DC, der modnede i fravær af TLR-ligander.

   I gruppen af ​​Kris Thielemans og det blev vist, at den T-cellestimulerende kapacitet af peptid-pulseret DC kan forbedres meget ved at forsyne dem med tre forskellige molekylære adjuvanser gennem elektroporation med mRNA, der koder for en såkaldt TriMix af CD40-ligand (CD40L) , CD70 og en konstitutivt aktiv form af TLR4 (caTLR4). Kombinationen af ​​CD40L- og caTLR4-elektroporering ville efterligne CD40-ligering og TLR4-signalering af DC'en og genererer fænotypisk moden, cytokin/kemokin-udskillende DC, som det er blevet vist for CD40- og TLR4-ligering gennem tilsætning af opløseligt CD40L og lipopolysaccharid. På den anden side ville introduktionen af ​​CD70 i DC give et costimulerende signal til CD27+-naive T-celler ved at hæmme aktiveret T-celleapoptose og ved at understøtte T-celleproliferation.

   Som konklusion viser disse in vitro-data, at både TLR-DC og Trimix DC er lovende kandidater til at forbedre immunologiske og kliniske responser i cancerimmunterapi.

2. Formål Dette er en eksplorativ undersøgelse, der består af to dele. I del I udføres dosisoptrapning, og det primære formål er sikkerheden ved forskellige doser af TLR-DC og Trimix DC. I del II vil Trimix DC-vaccination blive sammenlignet med TLR-DC-vaccination, og det primære formål med denne del er det immunologiske respons, hvor toksicitet og klinisk effekt er sekundære mål. Disse undersøgelser vil give vigtige data om sikkerheden og immunologiske virkninger af TLR-DC og Trimix DC.
3. Undersøgelsesdesign Del I af denne undersøgelse er en åben-label dosiseskaleringsundersøgelse. Del II af denne undersøgelse er et åbent, randomiseret fase II-studie.
4. Undersøgelsespopulation Vores undersøgelsespopulation består af melanompatienter med dokumenteret ekspression af melanomassocierede tumorantigener gp100 og tyrosinase. Melanompatienter med regional lymfeknudemetastase, hvor der udføres en radikal lymfeknudedissektion inden for 2 måneder efter inklusion i denne undersøgelse (benævnt yderligere som trin III) og melanompatienter med målbare fjernmetastaser (videre omtalt som trin IV) vil blive inkluderet .
5. Hovedundersøgelsens endepunkter De primære formål med undersøgelsen er at undersøge toksiciteten af ​​TLR-DC og Trimix DC ved dosiseskalering af DC-tal i del I og at undersøge immunologiske responser på DC-vaccination i del II af undersøgelsen.

Immunologiske reaktioner er:

1. Aktivering af immunceller in vivo.
2. Det immunologiske respons induceret med TLR-DC og Trimix DC ladet med mRNA, der koder for melanom-associerede tumorantigener (gp100 og tyrosinase).

Sikkerhed og klinisk effekt er sekundære mål.