黑色素瘤患者树突状细胞的单步抗原加载和 TLR 激活

1. 应用离体产生和负载肿瘤抗原的树突状细胞 (DC) 的基本原理免疫疗法现已成功引入临床。 已观察到数量有限但一致的客观免疫学和临床反应。 迄今为止，尚不清楚为什么有些患者有反应而其他患者没有反应，但普遍认为目前用于产生 DC 的方案可能不会导致最佳 Th1 反应的诱导。 研究人员和其他人已经证明，DC 成熟是关键因素之一，不仅对于有效的 DC 迁移，而且在癌症患者中诱导有效的抗肿瘤免疫反应。 目前，用于成熟 DC 的“黄金标准”包括促炎细胞因子（IL-1b、IL-6、TNFa）和前列腺素 E2 (PGE2) 的混合物。 然而，最近的小鼠数据表明，仅通过促炎细胞因子使 DC 成熟产生的 DC 支持 T 细胞克隆扩增，但未能有效地指导效应 T 细胞分化。 有趣的是，在 Toll 样受体 (TLR) 配体存在下成熟的 DC 能够诱导完整的 T 细胞效应子功能并释放更有效的免疫反应。 研究人员最近发现了含有 TLR 配体并能够诱导 DC 成熟的针对传染病的疫苗。 这些知识为这些临床适用剂提供了新的应用：临床级 DC 刺激器。 开发了临床级 DC 成熟方案，其中结合了 TLR 配体（预防性疫苗）和 PGE2，从而产生分泌高水平关键细胞因子 IL-12 的成熟 DC。 此外，与在没有 TLR 配体的情况下成熟的 DC 相比，这些 TLR 配体成熟的 DC (TLR-DC) 诱导 T 细胞分泌至少 20 倍高水平的效应细胞因子 IFNa 和 TNFa。

   在 Kris Thielemans 的小组中，研究表明，通过电穿孔为它们提供三种不同的分子佐剂，可以大大增强肽脉冲 DC 的 T 细胞刺激能力，其中 mRNA 编码所谓的 CD40 配体 (CD40L) 的 TriMix 、CD70 和 TLR4 (caTLR4) 的组成型活性形式。 CD40L 和 caTLR4 电穿孔的组合将模拟 DC 的 CD40 连接和 TLR4 信号传导，并生成表型成熟的分泌细胞因子/趋化因子的 DC，如通过添加可溶性 CD40L 和脂多糖进行 CD40 和 TLR4 连接所显示的那样。 另一方面，将 CD70 引入 DC 会通过抑制活化的 T 细胞凋亡和支持 T 细胞增殖，为 CD27+ 幼稚 T 细胞提供共刺激信号。

   总之，这些体外数据表明，TLR-DC 和 Trimix DC 都是有希望改善癌症免疫治疗中的免疫学和临床反应的候选药物。

2. 目标 这是一项探索性研究，由两部分组成。 在第 I 部分中，进行了剂量递增，主要目标是不同剂量的 TLR-DC 和 Trimix DC 的安全性。 在第二部分中，Trimix DC 疫苗接种将与 TLR-DC 疫苗接种进行比较，这部分的主要目标是免疫反应，毒性和临床疗效是次要目标。 这些研究将提供有关 TLR-DC 和 Trimix DC 的安全性和免疫学作用的重要数据。
3. 研究设计 本研究的第一部分是一项开放标签剂量递增研究。 本研究的第二部分是一项开放标签随机 II 期研究。
4. 研究人群 我们的研究人群由黑色素瘤患者组成，已证实表达黑色素瘤相关肿瘤抗原 gp100 和酪氨酸酶。 将纳入本研究纳入后 2 个月内进行根治性淋巴结清扫术的区域淋巴结转移黑色素瘤患者（进一步称为 III 期）和具有可测量远处转移的黑色素瘤患者（进一步称为 IV 期） .
5. 主要研究终点 本研究的主要目标是在第 I 部分通过增加 DC 数量的剂量来研究 TLR-DC 和 Trimix DC 的毒性，并在研究的第 II 部分研究 DC 疫苗接种后的免疫反应。

免疫反应是：

1. 体内免疫细胞的激活。
2. 载有编码黑色素瘤相关肿瘤抗原（gp100 和酪氨酸酶）的 mRNA 的 TLR-DC 和 Trimix DC 诱导的免疫反应。

安全性和临床疗效是次要目标。