Enkeltrinns antigeninnlasting og TLR-aktivering av dendrittiske celler hos melanompasienter

1. Begrunnelse Immunterapi med bruk av ex vivo genererte og tumorantigen-lastede dendritiske celler (DC) er nå vellykket introdusert i klinikken. Et begrenset, men konsistent, antall objektive immunologiske og kliniske responser er observert. Så langt er det fortsatt uklart hvorfor noen pasienter reagerer og andre ikke, men det er en generell enighet om at de nåværende protokollene som brukes for å generere DC ikke kan resultere i induksjon av optimale Th1-responser. Etterforskerne og andre har vist at DC-modning er en av de avgjørende faktorene, ikke bare for effektiv DC-migrering, men også for å indusere effektive antitumorimmunresponser hos kreftpasienter. For tiden består den "gyldne standarden" som brukes til å modne DC av en cocktail av pro-inflammatoriske cytokiner (IL-1b, IL-6, TNFa) og prostaglandin E2 (PGE2). Nylige musedata viste imidlertid at modning av DC ved utelukkende pro-inflammatoriske cytokiner ga DC som støttet T-celle klonal ekspansjon, men klarte ikke effektivt å dirigere effektor T-celledifferensiering. Interessant nok var DC modnet i nærvær av Toll-lignende reseptor (TLR) ligander i stand til å indusere full T-celle effektorfunksjon og utløste mer potente immunresponser. Etterforskerne har nylig identifisert vaksiner mot infeksjonssykdommer som inneholder TLR-ligander og er i stand til å indusere DC-modning. Denne kunnskapen gir en ny anvendelse for disse klinisk anvendelige midlene: DC-stimulatorer av klinisk kvalitet. En klinisk grad DC-modningsprotokoll er utviklet der TLR-ligander (forebyggende vaksiner) og PGE2 er kombinert som resulterte i generering av moden DC som skiller ut høye nivåer av nøkkelcytokinet IL-12. Dessuten induserte disse TLR-ligandmodne DC (TLR-DC) T-celler som utskiller minst 20 ganger høyere nivåer av effektorcytokinene IFNa og TNFa sammenlignet med DC modnet i fravær av TLR-ligander.

   I gruppen til Kris Thielemans og det ble vist at den T-cellestimulerende kapasiteten til peptid-pulset DC kan økes kraftig ved å gi dem tre forskjellige molekylære adjuvanser gjennom elektroporering med mRNA som koder for en såkalt TriMix av CD40-ligand (CD40L) , CD70 og en konstitutivt aktiv form av TLR4 (caTLR4). Kombinasjonen av CD40L og caTLR4 elektroporering vil etterligne CD40-ligering og TLR4-signalering av DC og genererer fenotypisk moden, cytokin/kjemokin-utskillende DC, som har blitt vist for CD40- og TLR4-ligering gjennom tilsetning av løselig CD40L og lipopolysakkarid. På den annen side vil introduksjonen av CD70 i DC gi et kostimulerende signal til CD27+ naive T-celler ved å hemme aktivert T-celleapoptose og ved å støtte T-celleproliferasjon.

   Avslutningsvis viser disse in vitro-dataene at både TLR-DC og Trimix DC er lovende kandidater for å forbedre immunologiske og kliniske responser i kreftimmunterapi.

2. Mål Dette er en utforskende studie, som består av to deler. I del I utføres doseeskalering og hovedmålet er sikkerheten til forskjellige doser av TLR-DC og Trimix DC. I del II vil Trimix DC-vaksinasjon sammenlignes med TLR-DC-vaksinasjon og hovedmålet med denne delen er immunologisk respons, med toksisitet og klinisk effekt som sekundære mål. Disse studiene vil gi viktige data om sikkerhet og immunologiske effekter av TLR-DC og Trimix DC.
3. Studiedesign Del I av denne studien er en åpen doseeskaleringsstudie. Del II av denne studien er en åpen randomisert fase II-studie.
4. Studiepopulasjon Vår studiepopulasjon består av melanompasienter, med påvist uttrykk for melanomassosierte tumorantigener gp100 og tyrosinase. Melanompasienter med regional lymfeknutemetastase hvor en radikal lymfeknutedisseksjon utføres innen 2 måneder etter inkludering i denne studien (videre referert til som stadium III) og melanompasienter med målbare fjernmetastaser (videre referert til som stadium IV) vil bli inkludert .
5. Hovedmålene for studien Hovedmålene med studien er å undersøke toksisiteten til TLR-DC og Trimix DC ved doseøkning av DC-tall i del I, og å undersøke immunologiske responser ved DC-vaksinasjon i del II av studien.

Immunologiske responser er:

1. Aktivering av immunceller in vivo.
2. Den immunologiske responsen indusert med TLR-DC og Trimix DC lastet med mRNA som koder for melanomassosierte tumorantigener (gp100 og tyrosinase).

Sikkerhet og klinisk effekt er sekundære mål.