Yksivaiheinen antigeenilataus ja dendriittisolujen TLR-aktivointi melanoomapotilailla

1. Perustelut Immunoterapia, jossa käytetään ex vivo -tuotettuja ja kasvainantigeenilla kuormitettuja dendriittisoluja (DC), on nyt onnistuneesti otettu käyttöön klinikalla. Rajoitettu, mutta johdonmukainen määrä objektiivisia immunologisia ja kliinisiä vasteita on havaittu. Toistaiseksi on epäselvää, miksi jotkut potilaat reagoivat ja toiset eivät, mutta yleinen yksimielisyys vallitsee siitä, että nykyiset protokollat, joita käytetään DC: n muodostamiseen, eivät välttämättä johda optimaalisten Th1-vasteiden induktioon. Tutkijat ja muut ovat osoittaneet, että DC-kypsyminen on yksi ratkaisevista tekijöistä, ei vain tehokkaan DC-migraatioon, vaan myös tehokkaiden kasvainten vastaisten immuunivasteiden indusoimiseksi syöpäpotilailla. Tällä hetkellä DC:n kypsyttämiseen käytetty "kultainen standardi" koostuu tulehdusta edistävien sytokiinien (IL-1b, IL-6, TNFa) ja prostaglandiini E2:n (PGE2) cocktailista. Viimeaikaiset hiiritiedot osoittivat kuitenkin, että DC:n kypsyminen yksinomaan tulehdusta edistävien sytokiinien vaikutuksesta tuotti DC:itä, jotka tukivat T-solujen kloonilaajentumista, mutta eivät pystyneet ohjaamaan tehokkaasti efektori-T-solujen erilaistumista. Mielenkiintoista on, että Toll-tyyppisten reseptorien (TLR) läsnä ollessa kypsyneet DC-ligandit kykenivät indusoimaan täyden T-soluefektoritoiminnan ja vapauttamaan tehokkaampia immuunivasteita. Tutkijat tunnistivat äskettäin rokotteita tartuntatauteja vastaan, jotka sisältävät TLR-ligandeja ja jotka pystyvät indusoimaan DC-kypsymistä. Tämä tieto tarjoaa uuden sovelluksen näille kliinisesti sovellettaville aineille: kliinisen laadun DC-stimulaattorit. Kehitetään kliinisen asteen DC-kypsymisprotokolla, jossa TLR-ligandit (ennaltaehkäisevät rokotteet) ja PGE2 yhdistetään, mikä johti kypsien DC-solujen syntymiseen, jotka erittävät suuria määriä avainsytokiinia IL-12. Lisäksi nämä TLR-ligandi kypsyneet DC:t (TLR-DC) indusoivat T-solut, jotka erittävät vähintään 20 kertaa korkeampia tasoja efektorisytokiineja IFNa ja TNFa verrattuna DC:iin, jotka kypsyivät TLR-ligandien puuttuessa.

   Kris Thielemansin ryhmässä ja osoitettiin, että peptidipulssitetun DC:n T-solujen stimulaatiokykyä voidaan parantaa huomattavasti antamalla heille kolme erilaista molekyyliadjuvanttia elektroporaatiolla mRNA:lla, joka koodaa niin kutsuttua TriMix of CD40 ligandia (CD40L) , CD70 ja TLR4:n konstitutiivisesti aktiivinen muoto (caTLR4). CD40L- ja caTLR4-elektroporaation yhdistelmä jäljittelee DC:n CD40-ligaatiota ja TLR4-signalointia ja tuottaa fenotyyppisesti kypsiä, sytokiinia/kemokiinia erittäviä DC:itä, kuten on osoitettu CD40- ja TLR4-ligaatiolle lisäämällä liukoista CD40L:ää ja lipopolysakkaridia. Toisaalta CD70:n vieminen DC:hen antaisi kostimulatorisen signaalin CD27+-naiiveille T-soluille inhiboimalla aktivoituneita T-solujen apoptoosia ja tukemalla T-solujen lisääntymistä.

   Yhteenvetona voidaan todeta, että nämä in vitro -tiedot osoittavat, että sekä TLR-DC että Trimix DC ovat lupaavia ehdokkaita parantamaan immunologisia ja kliinisiä vasteita syövän immunoterapiassa.

2. Tavoitteet Tämä on tutkiva tutkimus, joka koostuu kahdesta osasta. Osassa I suoritetaan annoskorotus ja ensisijaisena tavoitteena on TLR-DC:n ja Trimix DC:n eri annosten turvallisuus. Osassa II Trimix DC -rokotusta verrataan TLR-DC-rokotukseen ja tämän osan ensisijaisena tavoitteena on immunologinen vaste, jolloin toksisuus ja kliininen teho ovat toissijaisia ​​tavoitteita. Nämä tutkimukset tarjoavat tärkeitä tietoja TLR-DC:n ja Trimix DC:n turvallisuudesta ja immunologisista vaikutuksista.
3. Tutkimussuunnitelma Tämän tutkimuksen osa I on avoin annoksen eskalaatiotutkimus. Tämän tutkimuksen osa II on avoin satunnaistettu vaiheen II tutkimus.
4. Tutkimuspopulaatio Tutkimuspopulaatiomme koostuu melanoomapotilaista, joilla on todistetusti melanoomaan liittyvien kasvainantigeenien gp100 ja tyrosinaasin ilmentymistä. Mukaan otetaan melanoomapotilaat, joilla on alueellisia imusolmukkeiden etäpesäkkeitä, joille tehdään radikaali imusolmukkeiden dissektio 2 kuukauden sisällä tähän tutkimukseen sisällyttämisestä (jäljempänä vaihe III), ja melanoomapotilaat, joilla on mitattavissa olevia etäpesäkkeitä (kutsutaan myös vaiheeksi IV). .
5. Tärkeimmät tutkimuksen päätepisteet Tutkimuksen ensisijaisena tavoitteena on tutkia TLR-DC:n ja Trimix DC:n toksisuutta nostamalla DC-lukujen annosta osassa I ja tutkia immunologisia vasteita DC-rokotteen yhteydessä tutkimuksen osassa II.

Immunologiset vasteet ovat:

1. Immuunisolujen aktivointi in vivo.
2. Immunologinen vaste, joka indusoitiin TLR-DC:llä ja Trimix DC:llä, jotka on ladattu mRNA:lla, joka koodaa melanoomaan liittyviä kasvainantigeenejä (gp100 ja tyrosinaasi).

Turvallisuus ja kliininen teho ovat toissijaisia ​​tavoitteita.