Carga de antígeno en un solo paso y activación de TLR de células dendríticas en pacientes con melanoma

1. Justificación La inmunoterapia que aplica células dendríticas (DC) generadas ex vivo y cargadas de antígeno tumoral ahora se ha introducido con éxito en la clínica. Se ha observado un número limitado, pero consistente, de respuestas inmunológicas y clínicas objetivas. Hasta el momento no está claro por qué algunos pacientes responden y otros no, pero existe un consenso general de que los protocolos actuales aplicados para generar DC pueden no dar como resultado la inducción de respuestas Th1 óptimas. Los investigadores y otros han demostrado que la maduración de las DC es uno de los factores cruciales, no solo para la migración eficaz de las DC, sino también para inducir respuestas inmunitarias antitumorales eficaces en pacientes con cáncer. Actualmente, el "estándar de oro" utilizado para madurar DC consiste en un cóctel de citoquinas proinflamatorias (IL-1b, IL-6, TNFa) y prostaglandina E2 (PGE2). Los datos recientes en ratones demostraron, sin embargo, que la maduración de DC por citoquinas proinflamatorias únicamente produjo DC que apoyaron la expansión clonal de células T, pero no lograron dirigir de manera eficiente la diferenciación de células T efectoras. Curiosamente, las CD maduradas en presencia de ligandos del receptor tipo Toll (TLR) fueron capaces de inducir la función efectora completa de las células T y desencadenar respuestas inmunitarias más potentes. Los investigadores identificaron recientemente vacunas contra enfermedades infecciosas que contienen ligandos TLR y son capaces de inducir la maduración de DC. Este conocimiento proporciona una nueva aplicación para estos agentes aplicables clínicamente: estimuladores de CC de grado clínico. Se desarrolla un protocolo de maduración de DC de grado clínico en el que se combinan ligandos de TLR (vacunas preventivas) y PGE2, lo que resultó en la generación de DC maduras que secretan altos niveles de la citoquina clave IL-12. Además, estas DC maduradas con ligando de TLR (TLR-DC) indujeron a las células T a secretar niveles al menos 20 veces más altos de las citocinas efectoras IFNa y TNFa en comparación con las DC maduradas en ausencia de ligandos de TLR.

   En el grupo de Kris Thielemans, se demostró que la capacidad estimuladora de células T de las DC pulsadas con péptidos puede mejorarse en gran medida proporcionándoles tres adyuvantes moleculares diferentes a través de electroporación con ARNm que codifica el denominado ligando TriMix de CD40 (CD40L) , CD70 y una forma constitutivamente activa de TLR4 (caTLR4). La combinación de electroporación de CD40L y caTLR4 imitaría la ligadura de CD40 y la señalización de TLR4 de las DC y genera DC secretoras de citocinas/quimiocinas fenotípicamente maduras, como se ha demostrado para la ligadura de CD40 y TLR4 mediante la adición de CD40L soluble y lipopolisacárido. Por otro lado, la introducción de CD70 en las CD proporcionaría una señal coestimuladora a las células T vírgenes CD27+ al inhibir la apoptosis de las células T activadas y al apoyar la proliferación de células T.

   En conclusión, estos datos in vitro demuestran que tanto TLR-DC como Trimix DC son candidatos prometedores para mejorar las respuestas inmunológicas y clínicas en la inmunoterapia contra el cáncer.

2. Objetivos Este es un estudio exploratorio, que consta de dos partes. En la parte I se realiza un escalado de dosis y el objetivo principal es la seguridad de diferentes dosis de TLR-DC y Trimix DC. En la parte II se comparará la vacunación Trimix DC con la vacunación TLR-DC y el objetivo principal de esta parte es la respuesta inmunológica, siendo la toxicidad y la eficacia clínica objetivos secundarios. Estos estudios proporcionarán datos importantes sobre la seguridad y los efectos inmunológicos de TLR-DC y Trimix DC.
3. Diseño del estudio La Parte I de este estudio es un estudio abierto de escalada de dosis. La Parte II de este estudio es un estudio de fase II aleatorizado de etiqueta abierta.
4. Población de estudio Nuestra población de estudio consiste en pacientes con melanoma, con expresión comprobada de antígenos tumorales gp100 y tirosinasa asociados al melanoma. Se incluirán pacientes con melanoma con metástasis en los ganglios linfáticos regionales en los que se haya realizado una disección radical de los ganglios linfáticos dentro de los 2 meses posteriores a la inclusión en este estudio (en adelante, estadio III) y pacientes con melanoma con metástasis a distancia medibles (en adelante, estadio IV). .
5. Criterios de valoración principales del estudio Los objetivos principales del estudio son investigar la toxicidad de TLR-DC y Trimix DC mediante el aumento de dosis de los números de DC en la parte I, e investigar las respuestas inmunológicas tras la vacunación con DC en la parte II del estudio.

Las respuestas inmunológicas son:

1. La activación de las células inmunitarias in vivo.
2. La respuesta inmunológica inducida con TLR-DC y Trimix DC cargada con ARNm que codifica antígenos tumorales asociados a melanoma (gp100 y tirosinasa).

La seguridad y la eficacia clínica son objetivos secundarios.