A dendritikus sejtek egylépéses antigénbetöltése és TLR aktiválása melanómás betegekben

1. Indoklás Az ex vivo generált és tumorantigénnel feltöltött dendritikus sejteket (DC) alkalmazó immunterápia sikeresen bevezetett a klinikán. Korlátozott, de következetes számú objektív immunológiai és klinikai választ figyeltek meg. Egyelőre nem világos, hogy egyes betegek miért reagálnak, mások miért nem, de általános konszenzus van abban, hogy a DC generálására alkalmazott jelenlegi protokollok nem eredményezhetik az optimális Th1 válaszok indukcióját. A kutatók és mások bebizonyították, hogy a DC érése az egyik kulcsfontosságú tényező, nemcsak a hatékony DC migrációhoz, hanem a daganatos betegek hatékony daganatellenes immunválaszának indukálásához is. Jelenleg a DC érlelésére használt "arany standard" gyulladást elősegítő citokinek (IL-1b, IL-6, TNFa) és prosztaglandin E2 (PGE2) koktéljából áll. A legújabb egéradatok azonban azt mutatták, hogy a DC-k kizárólag gyulladást elősegítő citokinek általi érlelése olyan DC-t eredményezett, amely támogatta a T-sejtek klonális expanzióját, de nem tudta hatékonyan irányítani az effektor T-sejtek differenciálódását. Érdekes módon a Toll-szerű receptor (TLR) ligandumok jelenlétében érlelt DC teljes T-sejt effektor funkciót váltott ki, és erősebb immunválaszokat váltott ki. A kutatók a közelmúltban olyan fertőző betegségek elleni vakcinákat azonosítottak, amelyek TLR ligandumokat tartalmaznak, és képesek a DC érését indukálni. Ez a tudás új alkalmazást kínál ezeknek a klinikailag alkalmazható szereknek: a klinikai minőségű DC stimulátoroknak. Egy klinikai fokozatú DC érési protokollt dolgoztak ki, amelyben a TLR ligandumokat (megelőző vakcinák) és a PGE2-t kombinálják, ami érett DC-k keletkezését eredményezte, amelyek nagy mennyiségben szekretálják az IL-12 kulcscitokint. Ezen túlmenően ezek a TLR-ligandum érlelődött DC (TLR-DC) által indukált T-sejtek, amelyek legalább 20-szor magasabb szintű IFNa és TNFa effektor citokineket szekretálnak, mint a DC, amelyek TLR ligandumok hiányában érettek.

   Kris Thielemans csoportjában kimutatták, hogy a peptiddel pulzált DC T-sejt-stimuláló képessége nagymértékben fokozható, ha három különböző molekuláris adjuvánst adunk nekik elektroporációval, úgynevezett TriMix of CD40 ligandumot (CD40L) kódoló mRNS-sel. , CD70 és a TLR4 konstitutívan aktív formája (caTLR4). A CD40L és a caTLR4 elektroporáció kombinációja utánozná a DC CD40 ligálását és TLR4 jelátvitelét, és fenotípusosan érett, citokin/kemokin szekretáló DC-t generál, amint azt a CD40 és TLR4 ligálásnál kimutatták oldható CD40L és lipopoliszacharid hozzáadásával. Másrészt a CD70 bejuttatása a DC-be kostimuláló jelet biztosítana a CD27+ naiv T-sejteknek az aktivált T-sejt-apoptózis gátlásával és a T-sejt-proliferáció támogatásával.

   Összefoglalva, ezek az in vitro adatok azt mutatják, hogy mind a TLR-DC, mind a Trimix DC ígéretes jelöltek az immunológiai és klinikai válaszok javítására a rák immunterápiájában.

2. Célkitűzések Ez egy feltáró tanulmány, amely két részből áll. Az I. részben dóziseszkalációt hajtanak végre, és az elsődleges cél a különböző dózisú TLR-DC és Trimix DC biztonsága. A II. részben a Trimix DC vakcinációt összehasonlítjuk a TLR-DC vakcinációval, és ennek a résznek az elsődleges célja az immunológiai válasz, a toxicitás és a klinikai hatékonyság pedig másodlagos cél. Ezek a vizsgálatok fontos adatokat szolgáltatnak a TLR-DC és a Trimix DC biztonságosságáról és immunológiai hatásairól.
3. A vizsgálat felépítése A tanulmány I. része egy nyílt elrendezésű dóziseszkalációs vizsgálat. Ennek a vizsgálatnak a II. része egy nyílt elrendezésű, randomizált, II. fázisú vizsgálat.
4. Vizsgálati populáció Vizsgálati populációnkat melanómás betegek alkotják, akik bizonyítottan expresszálják a melanómához társuló gp100 tumorantigéneket és a tirozinázt. Régiós nyirokcsomó-áttéttel rendelkező melanómás betegek, akiknél a vizsgálatba való bevonást követő 2 hónapon belül radikális nyirokcsomó-disszekciót végeznek (továbbiakban: III. stádium), és mérhető távoli áttéttel rendelkező melanómás betegek (továbbiakban IV. stádium). .
5. A vizsgálat fő végpontjai A vizsgálat elsődleges célja a TLR-DC és a Trimix DC toxicitásának vizsgálata a DC-számok dóziseszkalációjával az I. részben, valamint a DC vakcinációra adott immunológiai válaszok vizsgálata a vizsgálat II. részében.

Az immunológiai válaszok a következők:

1. Az immunsejtek aktiválása in vivo.
2. A melanomához kapcsolódó tumorantigéneket (gp100 és tirozináz) kódoló mRNS-sel feltöltött TLR-DC-vel és Trimix DC-vel kiváltott immunológiai válasz.

A biztonság és a klinikai hatékonyság másodlagos cél.