Single-step Antigen Loading en TLR-activering van dendritische cellen bij melanoompatiënten

1. Achtergrond Immunotherapie met ex vivo gegenereerde en tumor-antigeen-geladen dendritische cellen (DC) is nu met succes geïntroduceerd in de kliniek. Er is een beperkt, maar consistent aantal objectieve immunologische en klinische reacties waargenomen. Tot nu toe blijft het onduidelijk waarom sommige patiënten wel en andere niet reageren, maar er bestaat een algemene consensus dat de huidige protocollen die worden toegepast om DC te genereren mogelijk niet resulteren in de inductie van optimale Th1-responsen. De onderzoekers en anderen hebben aangetoond dat DC-rijping een van de cruciale factoren is, niet alleen voor effectieve DC-migratie, maar ook voor het induceren van effectieve anti-tumor immuunresponsen bij kankerpatiënten. Momenteel bestaat de "gouden standaard" die wordt gebruikt om DC te rijpen uit een cocktail van pro-inflammatoire cytokines (IL-1b, IL-6, TNFa) en prostaglandine E2 (PGE2). Recente muisgegevens toonden echter aan dat rijping van DC door uitsluitend pro-inflammatoire cytokines DC opleverde die T-celklonale expansie ondersteunde, maar er niet in slaagde om effector T-celdifferentiatie efficiënt te sturen. Interessant is dat DC gerijpt in de aanwezigheid van Toll-achtige receptor (TLR) -liganden in staat waren om volledige T-celeffectorfunctie te induceren en krachtiger immuunresponsen los te laten. De onderzoekers hebben onlangs vaccins tegen infectieziekten geïdentificeerd die TLR-liganden bevatten en DC-rijping kunnen induceren. Deze kennis biedt een nieuwe toepassing voor deze klinisch toepasbare middelen: DC-stimulatoren van klinische kwaliteit. Er is een DC-rijpingsprotocol van klinische kwaliteit ontwikkeld waarin TLR-liganden (preventieve vaccins) en PGE2 worden gecombineerd, wat resulteerde in het genereren van volwassen DC die hoge niveaus van het belangrijkste cytokine IL-12 afscheiden. Bovendien induceerden deze door TLR-ligand gerijpte DC (TLR-DC) T-cellen die ten minste 20 maal hogere niveaus van de effectorcytokines IFNa en TNFa afscheidden in vergelijking met DC die gerijpt waren in de afwezigheid van TLR-liganden.

   In de groep van Kris Thielemans en werd aangetoond dat de T-celstimulerende capaciteit van peptide-gepulste DC sterk kan worden verbeterd door ze te voorzien van drie verschillende moleculaire adjuvantia door middel van elektroporatie met mRNA dat codeert voor een zogenaamde TriMix van CD40-ligand (CD40L). , CD70 en een constitutief actieve vorm van TLR4 (caTLR4). De combinatie van CD40L- en caTLR4-elektroporatie zou CD40-ligatie en TLR4-signalering van de DC nabootsen en genereert fenotypisch volwassen, cytokine/chemokine-uitscheidende DC, zoals is aangetoond voor CD40- en TLR4-ligatie door toevoeging van oplosbaar CD40L en lipopolysaccharide. Aan de andere kant zou de introductie van CD70 in de DC een co-stimulerend signaal geven aan CD27+-naïeve T-cellen door geactiveerde T-celapoptose te remmen en door T-celproliferatie te ondersteunen.

   Concluderend tonen deze in vitro gegevens aan dat zowel TLR-DC als Trimix DC veelbelovende kandidaten zijn om de immunologische en klinische respons bij kankerimmunotherapie te verbeteren.

2. Doelstellingen Dit is een verkennend onderzoek, bestaande uit twee delen. In deel I wordt dosisescalatie uitgevoerd en het primaire doel is de veiligheid van verschillende doses TLR-DC en Trimix DC. In deel II zal Trimix DC-vaccinatie worden vergeleken met TLR-DC-vaccinatie en de primaire doelstelling van dit deel is de immunologische respons, met toxiciteit en klinische werkzaamheid als secundaire doelstellingen. Deze onderzoeken zullen belangrijke gegevens opleveren over de veiligheid en immunologische effecten van TLR-DC en Trimix DC.
3. Onderzoeksopzet Deel I van dit onderzoek is een open-label dosisescalatieonderzoek. Deel II van deze studie is een open-label gerandomiseerde fase II-studie.
4. Studiepopulatie Onze studiepopulatie bestaat uit melanoompatiënten met bewezen expressie van melanoomgeassocieerde tumorantigenen gp100 en tyrosinase. Melanoompatiënten met regionale lymfekliermetastasen bij wie binnen 2 maanden na opname in deze studie een radicale lymfeklierdissectie wordt uitgevoerd (verder stadium III genoemd) en melanoompatiënten met meetbare metastasen op afstand (verder stadium IV genoemd) zullen worden opgenomen .
5. Hoofdeindpunten van de studie De primaire doelstellingen van de studie zijn het onderzoeken van de toxiciteit van TLR-DC en Trimix DC door dosisescalatie van DC-nummers in deel I, en het onderzoeken van immunologische reacties op DC-vaccinatie in deel II van de studie.

Immunologische reacties zijn:

1. De activering van immuuncellen in vivo.
2. De immunologische respons geïnduceerd met TLR-DC en Trimix DC geladen met mRNA dat codeert voor melanoom-geassocieerde tumorantigenen (gp100 en tyrosinase).

Veiligheid en klinische werkzaamheid zijn secundaire doelstellingen.