Einstufige Antigenbeladung und TLR-Aktivierung dendritischer Zellen bei Melanompatienten

1. Begründung Die Immuntherapie mit ex vivo erzeugten und Tumorantigen-beladenen dendritischen Zellen (DC) wurde nun erfolgreich in die Klinik eingeführt. Es wurde eine begrenzte, aber konsistente Anzahl objektiver immunologischer und klinischer Reaktionen beobachtet. Bisher bleibt unklar, warum einige Patienten ansprechen und andere nicht, aber es besteht allgemeiner Konsens darüber, dass die derzeit angewandten Protokolle zur Erzeugung von DC möglicherweise nicht zur Induktion optimaler Th1-Antworten führen. Die Forscher und andere haben gezeigt, dass die DC-Reifung einer der entscheidenden Faktoren ist, nicht nur für eine effektive DC-Migration, sondern auch für die Induktion wirksamer Anti-Tumor-Immunantworten bei Krebspatienten. Derzeit besteht der „goldene Standard“, der zur Reifung von DC verwendet wird, aus einem Cocktail aus entzündungsfördernden Zytokinen (IL-1b, IL-6, TNFa) und Prostaglandin E2 (PGE2). Jüngste Mausdaten zeigten jedoch, dass die Reifung von DC durch ausschließlich entzündungsfördernde Zytokine DC ergab, die die klonale T-Zell-Expansion unterstützten, aber die Effektor-T-Zell-Differenzierung nicht effizient steuern konnten. Interessanterweise waren in Gegenwart von Toll-like-Rezeptor(TLR)-Liganden gereifte DC in der Lage, die volle T-Zell-Effektorfunktion zu induzieren und stärkere Immunantworten auszulösen. Die Forscher identifizierten kürzlich Impfstoffe gegen Infektionskrankheiten, die TLR-Liganden enthalten und in der Lage sind, die DC-Reifung zu induzieren. Dieses Wissen bietet eine neue Anwendung für diese klinisch anwendbaren Mittel: DC-Stimulatoren klinischer Qualität. Es wird ein DC-Reifungsprotokoll klinischer Qualität entwickelt, bei dem TLR-Liganden (vorbeugende Impfstoffe) und PGE2 kombiniert werden, was zur Erzeugung reifer DC führte, die hohe Konzentrationen des Schlüsselzytokins IL-12 sezernieren. Darüber hinaus induzierten diese mit TLR-Liganden gereiften DC (TLR-DC) T-Zellen, die mindestens 20-fach höhere Spiegel der Effektorzytokine IFNa und TNFa sezernierten, verglichen mit DC, die ohne TLR-Liganden gereift waren.

   In der Gruppe von Kris Thielemans und es wurde gezeigt, dass die T-Zell-stimulatorische Kapazität von Peptid-gepulsten DC stark verbessert werden kann, indem man ihnen drei verschiedene molekulare Adjuvantien durch Elektroporation mit mRNA, die einen sogenannten TriMix von CD40-Liganden (CD40L) kodiert, zur Verfügung stellt. , CD70 und eine konstitutiv aktive Form von TLR4 (caTLR4). Die Kombination von CD40L- und caTLR4-Elektroporation würde die CD40-Ligation und die TLR4-Signalgebung der DC nachahmen und erzeugt phänotypisch reife, Zytokin/Chemokin-sekretierende DC, wie für die CD40- und TLR4-Ligation durch Zugabe von löslichem CD40L und Lipopolysaccharid gezeigt wurde. Andererseits würde die Einführung von CD70 in die DC ein costimulatorisches Signal an CD27+-naive T-Zellen liefern, indem aktivierte T-Zell-Apoptose gehemmt und die T-Zell-Proliferation unterstützt wird.

   Zusammenfassend zeigen diese In-vitro-Daten, dass sowohl TLR-DC als auch Trimix DC vielversprechende Kandidaten zur Verbesserung der immunologischen und klinischen Reaktionen in der Krebsimmuntherapie sind.

2. Ziele Dies ist eine explorative Studie, die aus zwei Teilen besteht. In Teil I wird eine Dosiseskalation durchgeführt und das primäre Ziel ist die Sicherheit verschiedener Dosen von TLR-DC und Trimix DC. In Teil II wird die Trimix-DC-Impfung mit der TLR-DC-Impfung verglichen, und das primäre Ziel dieses Teils ist die immunologische Reaktion, wobei Toxizität und klinische Wirksamkeit sekundäre Ziele sind. Diese Studien werden wichtige Daten zur Sicherheit und den immunologischen Wirkungen von TLR-DC und Trimix DC liefern.
3. Studiendesign Teil I dieser Studie ist eine offene Dosiseskalationsstudie. Teil II dieser Studie ist eine offene, randomisierte Phase-II-Studie.
4. Studienpopulation Unsere Studienpopulation besteht aus Melanompatienten mit nachgewiesener Expression der Melanom-assoziierten Tumorantigene gp100 und Tyrosinase. Melanompatienten mit regionalen Lymphknotenmetastasen, bei denen innerhalb von 2 Monaten nach Aufnahme in diese Studie eine radikale Lymphknotendissektion durchgeführt wird (im Folgenden als Stadium III bezeichnet), und Melanompatienten mit messbaren Fernmetastasen (im Folgenden als Stadium IV bezeichnet), werden eingeschlossen .
5. Hauptstudienendpunkte Die Hauptziele der Studie sind die Untersuchung der Toxizität von TLR-DC und Trimix DC durch Dosiseskalation der DC-Zahlen in Teil I und die Untersuchung der immunologischen Reaktionen auf die DC-Impfung in Teil II der Studie.

Immunologische Reaktionen sind:

1. Die Aktivierung von Immunzellen in vivo.
2. Die immunologische Antwort, die mit TLR-DC und Trimix DC induziert wurde, beladen mit mRNA, die Melanom-assoziierte Tumorantigene (gp100 und Tyrosinase) codiert.

Sicherheit und klinische Wirksamkeit sind sekundäre Ziele.