Excès d'androgènes comme cause de dysfonctionnement adipogénique chez les femmes atteintes du SOPK

Objectif 1. Examiner les mécanismes du développement de l'adiposité abdominale sous-cutanée (graisse) chez les femmes SOPK de poids normal par rapport aux femmes normales (témoins) d'IMC et d'âge correspondant.

Sujets et évaluation clinique : Nous recruterons 16 sujets SOPK maigres (18,5-25 kg/M2) et 16 témoins appariés selon l'âge et l'IMC. Les sujets rempliront un questionnaire standardisé mettant l'accent sur la datation menstruelle, la croissance anormale des cheveux et l'acné. Le questionnaire annotera également l'âge, le statut tabagique, les médicaments, les antécédents chirurgicaux et les antécédents familiaux de croissance excessive des cheveux chez les femmes apparentées et de diabète chez les parents ou les frères et sœurs pour les critères d'exclusion et pour l'inclusion de certains traits de base comme covariables. Les sujets subiront également un examen physique; l'hirsutisme sera noté par la méthode Ferriman-Gallwey modifiée (mFG). Une échographie transvaginale (TVUS) sera effectuée pour déterminer la présence ou l'absence d'ovaires polykystiques. Un échantillon de sang de dépistage sera obtenu pour les déterminations des hormones stéroïdes, de la SHBG, de la TSH et de la prolactine.

Des femmes de toute origine ethnique âgées de 18 à 35 ans seront recrutées. Les patients atteints du SOPK seront diagnostiqués selon les critères des NIH de 1990. Les témoins auront des cycles menstruels réguliers à des intervalles de 21 à 35 jours, un taux de progestérone (P4) en phase lutéale > 3 ng/mL et aucun signe d'hirsutisme, d'acné, d'alopécie, d'ovaires polykystiques ou de dysfonctionnement endocrinien. Les critères d'exclusion sont : antécédents présents/passés (

Des études seront menées dans la phase folliculaire chez les témoins et pendant l'aménorrhée chez les femmes atteintes de SOPK. Tous les sujets subiront un test de tolérance au glucose intraveineux à prélèvement fréquent modifié (FSIGTT). Du glucose sous forme de solution à 50 % (0,3 g/kg) et de l'insuline humaine ordinaire (0,03 unité/kg) seront injectés par voie intraveineuse à 0 et 20 min, respectivement. Le sang sera prélevé à -20, -15, -5, 0, 2, 4, 8, 19, 22, 30, 40, 50, 70, 90 et 180 min pour les déterminations de glucose et d'insuline. La modélisation mathématique des déterminations en série du glucose et de l'insuline calculera : l'indice de sensibilité à l'insuline (SI, c'est-à-dire l'action de l'insuline pour accélérer l'absorption du glucose et supprimer la production de glucose), l'indice d'efficacité du glucose (SG, c'est-à-dire l'effet combiné du glucose pour améliorer l'absorption du glucose et supprimer la production endogène de glucose aux taux basaux d'insuline) et la réponse aiguë au glucose (AIRG).

Isolement et culture des adipocytes : environ 1 à 2 g de graisse seront prélevés dans le bas de l'abdomen SC en utilisant des procédures standard sous anesthésie locale. Les adipocytes (cellules graisseuses) et les tissus adipeux environnants seront isolés pour mesurer le nombre et le diamètre des cellules adipocytes, l'accumulation et la fonction des lipides, l'adiponectine et le développement des cellules souches.

Procédures : Toutes les procédures seront effectuées chez des femmes normales et SOPK au début de l'étude.

je). Ponction veineuse : du sang à jeun sera prélevé pour numération globulaire, bilan chimique, LH, FSH, T totale/libre, DHT, A4, DHEAS, E1, E2, hormone anti-mullérienne (AMH), SHBG, adiponectine, leptine, IL-6 , profil lipidique et acides gras libres (FFA).

ii). Composition corporelle : La composition corporelle sera évaluée par l'IMC, le tour de taille aux hanches et le balayage DEXA. La circonférence sera mesurée à la taille (section la plus étroite du torse entre les côtes et le nombril) et aux hanches (la plus grande saillie de la région des hanches, au-dessus du pli fessier). Pour la graisse corporelle totale et la répartition régionale de la graisse, des analyses du corps entier seront effectuées à l'aide de l'imagerie DEXA.

iii). Répartition de la graisse corporelle : la DEXA corporelle totale mesurera la graisse abdominale (c'est-à-dire la zone située entre le dôme du diaphragme et le haut de la hanche. Les images DEXA du corps total détermineront également le % de graisse corporelle ; masse corporelle sans graisse; graisse totale du corps, de l'abdomen et des jambes ; et le rapport masse grasse abdomen/jambe. La région de la jambe est la zone située sous le sommet de l'os de la hanche (grand trochanter).

iv). Test ovarien : une échographie transvaginale sera réalisée pendant la phase folliculaire chez les témoins et pendant l'aménorrhée chez les femmes atteintes du SOPK. Le volume ovarien sera calculé. Le nombre de follicules antraux, défini comme le nombre total de follicules (2 à 9 mm de diamètre) des deux ovaires, sera déterminé par 1 enquêteur (D.A.D.). Les ovaires polykystiques seront identifiés, avec un tel ovaire suffisant pour définir le PCO

Objectif 2. Déterminer le rôle des androgènes dans le dysfonctionnement de l'ASC abdominal SC et sa relation avec le métabolisme chez les femmes SOPK de poids normal par le biais des androgènes. antagonisme par l'utilisation clinique du flutamide par rapport au placebo.

FSIGTT modifié et études adipogéniques : le FSIGTT modifié et toutes les études adipogéniques réalisées au début de l'étude seront répétés à la fin de l'intervention flutamide contre placebo de 6 mois chez les femmes atteintes du SOPK.

Procédures : Toutes les procédures effectuées au début de l'étude seront également répétées à la fin des six cycles de 28 jours d'intervention flutamide contre placebo chez les femmes atteintes du SOPK. De plus, des études mensuelles de la fonction hépatique seront effectuées pour détecter d'éventuelles élévations des taux de transaminases sériques au-dessus de la plage normale pendant le traitement par flutamide par rapport à un placebo.

Dossiers menstruels : la fréquence ovulatoire sera déterminée en demandant aux sujets de tenir un dossier menstruel quotidien et de collecter des échantillons d'urine hebdomadaires du premier matin pour d'éventuelles déterminations de progestérone et de créatinine. Les échantillons d'urine seront congelés pour une analyse ultérieure afin de déterminer la preuve de l'ovulation, si nécessaire.

Objectif 3. Identifier les changements épigénétiques qui sous-tendent le dysfonctionnement de l'ASC abdominal SC chez les femmes SOPK de poids normal par rapport aux témoins appariés selon l'IMC et l'âge.

Les cellules souches adipeuses abdominales sous-cutanées du SOPK et des femmes témoins seront cultivées en cellules graisseuses nouvellement formées (adipocytes) en laboratoire. Les cellules seront étudiées avant et après un traitement de 6 mois avec un placebo contre le flutamide pour les changements dans l'épigénome cellulaire (méthylation, séquences d'ARN et modification des histones).